何泉
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院阜外心血管医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国医学科学院基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 从糜酶和肾素的转基因研究探索RAS在心肌重塑中的作用
- 2002年
- 心肌肥厚是多种心血管疾病中的一种病理改变,主要表现为心脏重塑包括心肌细胞肥大和间质成分的改变.心脏的结构与功能受到生理因素,血液动力学因素和神经体液因素等多种因素的调控,这些因素异常改变均可使心脏发生生理或病理的改变.在所有这些因素中,以肾素血管紧张素系统(RAS)及其受体最为引人关注.RAS最早作为循环内分泌系统被认识,主要参与血压调节.近年来发现在心脏等组织存在局部RAS,以自分泌,旁分泌和胞内分泌形式参与许多生理和病理过程.RAS在心脏中的作用主要通过可溶性多酶体系的级联反应形成的终末产物AngⅡ和其受体所介导.近年来关于心脏局部RAS在心脏重塑中的作用及机制研究已成为RAS研究的热点问题,但其详细作用机制尚不十分清楚,诸如:1.心脏局部RAS是否真实存在?2.心脏组织AngⅡ形成是否存在糜酶途径,该途径与ACE途径的相对贡献如何?3.糜酶与ACE途径是否存在时相性?4.糜酶对心脏重塑中是否有作用?5.肾素是心脏组织AngⅡ形成的限速因子吗?6.心脏组织中AngⅡ通过何种途径刺激心脏重塑?对上述问题的回答是揭示心脏局部RAS在心脏重塑中机制关键,针对这些研究热点我们从分子、细胞、整体动物模型等多个层次,从动态的观察角度对这些问题进行了探索.
- 陈兰英李鹏何泉姜立群周晓霞陈朋民张鹏华王醒刘嘉丽刘宏
- 关键词：糜酶转基因研究RAS肾素肾素血管紧张素系统心肌重塑
- 原核注射产生转基因小鼠中的缺失整合
- 1997年
- 用心脏特异性启动子肌球蛋白轻链－２（ｍｙｏｓｉｏｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎ－２）ＭＬＣ２和糜酶结构基因相拼接构建ＭＬＣ２－糜酶融合基因，通过原核注射法产生转基因小鼠。用特异性引物对新生鼠鼠尾ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增初选，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交确定整合有外源基因的阳性鼠。低熔点琼脂糖凝胶电泳回收阳性鼠ＰＣＲ扩增的ＤＮＡ片段，经测序后，与所转外源基因序列比较，发现缺失整合现象。
- 何泉陈兰英田小利赵淑华姜立群
- 关键词：转基因动物小鼠
- 筛选转基因动物的新方法——PCR及其产物测序法被引量：3
- 1997年
- 用特异性引物对肌球蛋白轻链 2启动子 (myosinlightchain 2 ,MLC2 ) 糜酶融合基因的转基因新生鼠鼠尾DNA进行PCR筛选 ,低熔点琼脂糖凝胶电泳回收阳性样品PCR所扩出的DNA条带 ,纯化后用同一对引物中的一个进行单引物PCR测序 ,与所转外源基因序列比较 ,进一步确定整合有外源基因的阳性鼠 .PCR及PCR产物测序法检测转基因动物具有操作方便 。
- 何泉李鹏姜立群陈兰英
- 关键词：基因工程转基因动物聚合酶链反应测序法
- 转基因小鼠中外源基因部分内含子序列的缺失及其对转录的影响被引量：7
- 1999年
- 利用PCR扩增及PCR测序在显微注射法产生的转基因小鼠中发现,整合在小鼠染色体上的肌球蛋白轻链2启动子(myosinlightchain2promoter,MLC2)-糜酶(chymase)外源融合基因存在两种形式,一种为全长的融合基因,另一种在糜酶结构基因的第一内含子中缺失了213bp的序列。RT-PCR结果表明,缺失了部分内含子序列的外源融合基因不能在转基因小鼠心脏中表达.而全长的外源融合基因则能较高水平地表达,竞争性PCR定量实验表明在200ng心脏总RNA反转录产物中约含5.05(±1.38)×106个糜酶cDNA分子。上述结果表明,糜酶结构基因的第一内含子可能对MLC2-糜酶基因的表达具有调控作用。
- 李鹏何泉陈兰英
- 关键词：糜酶基因表达转基因小鼠
