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孙佑赫: 作品数：11 被引量：41H指数：5; 供职机构：西南林业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金云南省森林灾害预警与控制重点实验室开放基金国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学化学工程更多>>

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思茅松毛虫四龄幼虫肠道好氧细菌的ARDRA分析及鉴定被引量：8: 2012年; 从思茅松毛虫Dendrolimu kikuchii Matsumura4龄幼虫肠道环境中分离、纯化、培养,获得11株好氧细菌菌株。以细菌基因组DNA为模板,用细菌通用引物(27f、1492r)对模板进行PCR扩增,并用4种限制性内切酶HaeⅢ、HindⅢ、HinfⅠ、TaqⅠ对PCR产物进行ARDRA(amplified rDNA restriction analysis)多态性分析,在84%的相似水平上可分成6大类群,多样性丰富。对6大类群的代表菌株进行16SrDNA序列测定,分析表明:分离到的11株好氧细菌中4N05、4N08和4N11归属克雷伯氏杆菌属(Klebsiellasp.),4N02归属Lysinibacillus属;4N03和4N09确定到种,分别是γ-变形杆菌(Gamma proteobacterium)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis strain);4N04、4N06、4N07和4N01、4N10也可以确定到种,其中前3株是短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevisstrain),后2株是沼泽短芽孢杆菌(Brevibacillus limnophilusstrain),并且这5株菌都归属短芽孢杆菌属(Brevibacillus sp.)。通过研究,既可以为松毛虫的生物防治提供微生态理论依据,又丰富了微生物资源库。; 孙佑赫熊智王金华张武先王海林; 关键词：思茅松毛虫多样性 ARDRA

一株产α-淀粉酶细菌的分离、鉴定及酶学性质初步研究被引量：5: 2012年; 利用纯培养和碘液显色从松毛虫幼虫肠道中分离筛选得到一株产α-淀粉酶细菌2N02,通过16S rDNA序列比对,鉴定为枯草芽孢杆菌。摇瓶发酵后,产生的α-淀粉酶酶活力20.0 U/mL;经硫酸铵沉淀、透析脱盐后,初步研究酶学性质,测得酶反应最适温度50℃,最适pH值6.5,Mg2+、Ca2+对酶具有激活作用,Zn2+和EDTA则抑制酶活性。研究表明,该菌株是产α-淀粉酶较好的材料,具有一定的应用前景。; 孙佑赫周开艳熊智; 关键词：Α-淀粉酶酶学性质

云南松毛虫肠道产纤维素酶菌株的筛选鉴定及酶学性质被引量：6: 2012年; 从云南松毛虫肠道中分离筛选得到28株产纤维素酶的菌株。经生理生化试验观察和16S rRNA序列比对分析,初步鉴定这些产酶菌株属于肠杆菌属、芽孢杆菌属、克雷伯氏杆菌属和约克氏菌属。同时筛选出一株产酶能力较高的菌株DK4,鉴定为蜡状芽孢杆菌,并构建系统发育树。对该菌株产酶特性进行了初步研究,其酶反应的最适温度是35℃,最适pH值7.0,连续发酵70 h左右时纤维素酶活达到最高值19.24 U/mL。; 孙佑赫周开艳熊智; 关键词：肠道细菌云南松毛虫纤维素酶酶学性质

思茅松毛虫6龄幼虫肠道细菌的ARDRA分析与鉴定被引量：5: 2012年; 从自然种群的思茅松毛虫(Dendrolimus kikuchii Matsumura)6龄幼虫肠道环境中分离、纯化、培养获得了6株细菌。以细菌基因组DNA为模板进行PCR扩增,用2种双酶组合HaeⅢ和Hin dⅢ、HinfⅠ和TaqⅠ对PCR产物进行核糖体DNA扩增片段限制性内切酶分析(ARDRA),得到了3个操作分类单元(OTUs)。对每个操作分类单元(OTU)的代表菌株进行16 S rDNA序列测定,序列分析结果表明,分离到的6株肠道细菌中,6N01、6N02、6N03、6N04和6N05属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.),6N06属于克雷伯氏杆菌属(Klebsiella sp.)。; 孙佑赫熊智王金华张武先王海林; 关键词：肠道细菌 ARDRA

3龄思茅松毛虫幼虫肠道好氧细菌的分离及ARDRA多态性分析被引量：3: 2012年; 从3龄思茅松毛虫(Dendrolimus kikuchii)幼虫肠道样品中分离得到11株好氧细菌。以细菌基因组DNA为模板,扩增16 S rDNA,并用4种限制性内切酶HaeⅢ和HindⅢ、HinfⅠ和TaqⅠ对PCR扩增产物进行ARDRA多态性分析。对聚类图谱的分析结果发现11株好氧细菌在70%的遗传相似度水平上聚成4个不同分类操作单元(OTU),表明3龄松毛虫中肠道内好氧细菌的遗传多样性水平偏低。; 康柳王金华孙佑赫高艳张凯; 关键词：肠道细菌 ARDRA

4种单体化合物对甜菜夜蛾嗅觉行为的影响被引量：3: 2012年; 利用Y型嗅觉仪测定方法,研究了己酸、壬酸、己醇和壬醛4种单体化合物对甜菜夜蛾嗅觉行为的影响,并对4种化合物的有效剂量进行了筛选。结果表明,4种供试化合物均对甜菜夜蛾雌虫表现出明显的驱避作用。己酸的驱避活性剂量范围为稀释200～1 200倍,壬酸的有效剂量范围为稀释10～1 000倍,己醇在稀释300倍和500倍时表现出显著的驱避活性,而壬醛在稀释800～1 200倍时对甜菜夜蛾雌虫有显著的驱避作用。己酸、壬酸、己醇和壬醛驱避效果最佳的稀释倍数分别为1 000倍、500倍(和800倍)、500倍、1 000倍,驱避率依次为96%、82%、76%、82%。因此,这4种对甜菜夜蛾具有明显抑制作用的单体化合物在甜菜夜蛾的防治方面有潜在的应用前景。; 周开艳杨发忠杨斌孙佑赫; 关键词：甜菜夜蛾嗅觉行为单体化合物己酸

松毛虫肠道产蛋白酶菌株的筛选鉴定及培养条件研究被引量：12: 2012年; 为了获得产蛋白酶能力高的细菌资源,采用酪蛋白平板法从松毛虫肠道中分离筛选得到16株产蛋白酶的菌株。通过比较透明圈大小和测定发酵后酶活力,筛选出一株产酶能力较高的菌株2N01。根据序列比对结果,构建关于2N01的系统发育树,将其鉴定为Enterobacter hormaechei。研究培养条件对该菌株生长的影响,确定2N01产酶培养的最适温度是40℃,最适pH8.0,培养72h左右出现产酶峰值,酶活力达50.07U/mL。通过研究表明,菌株2N01是产蛋白酶的较好材料,具有一定的应用前景。; 孙佑赫周开艳熊智; 关键词：肠道细菌蛋白酶酶学性质

思茅松毛虫2龄幼虫肠道好氧细菌的筛选及毒力测定被引量：4: 2011年; [目的]筛选思茅松毛虫(Dendrolimu.kikuchii Matsumura)2龄幼虫肠道好氧细菌并测定其毒力。[方法]将思茅松毛虫2龄幼虫中肠样品倍比稀释后涂布平板分离菌株,共分离得到5株好氧细菌。以细菌基因组DNA为模板,用细菌16S rDNA通用引物(27f和1492r)对模板扩增,并用4种限制性内切酶Hae Ⅲ和Hind Ⅲ、HinfⅠ和TaqⅠ对PCR扩增产物进行ARDRA多态性分析。[结果]聚类图谱分析发现,5株好氧细菌在95%的相似水平上聚成2个不同分类操作单元(OTU),表明思茅松毛虫2龄幼虫肠道内好氧细菌的遗传多样性水平偏低。室内毒力试验表明,肠道细菌杀虫死亡高峰期在4～10d,菌株4杀虫效果最佳,12d时校正死亡率达到53.57%。[结论]为防治思茅松毛虫提供了参考。; 张武先王金华熊智孙佑赫李彪赵丽芳王海林; 关键词：思茅松毛虫肠道细菌毒力

思茅松毛虫2龄幼虫肠道好氧细菌的筛选及毒力测定(英文): 2011年; [目的]筛选思茅松毛虫2龄幼虫肠道好氧细菌并测定其毒力。[方法]将思茅松毛虫2龄幼虫中肠样品倍比稀释后涂布平板分离菌株,共分离得到5株好氧细菌。以细菌基因组DNA为模板,用细菌16S rDNA通用引物(27f和1492r)对模板扩增,并用4种限制性内切酶Hae III和Hind III、Hinf I和Taq I对PCR扩增产物进行ARDRA多态性分析。[结果]聚类图谱分析发现,5株好氧细菌在95%的相似水平上聚成2个不同分类操作单元(OTU),表明思茅松毛虫2龄幼虫肠道内好氧细菌的遗传多样性水平偏低。室内毒力试验表明,肠道细菌杀虫死亡高峰期在4～10d,菌株4杀虫效果最佳,12d时校正死亡率达到53.57%。[结论]为思茅松毛虫的防治提供了参考。; 张武先王金华熊智孙佑赫李彪赵丽芳王海林; 关键词：思茅松毛虫肠道细菌毒力

思茅松毛虫肠道产脂肪酶菌株的筛选鉴定及酶学性质初步研究被引量：5: 2012年; 利用纯培养和筛选培养,从思茅松毛虫幼虫肠道中分离得到7株产脂肪酶的菌株。通过提取基因组DNA并进行16S rDNA序列测定,构建产酶菌株的系统发育树,初步鉴定结果显示:菌株D2、D12、D19属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.),菌株D7、D17属于芽胞杆菌属(Bacillus sp.),菌株D9、D16属于克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)。初步研究所产脂肪酶的酶学性质,确定这些酶的最适作用温度30～40℃、最适作用pH值8.0～9.0,为中温碱性脂肪酶。; 孙佑赫周开艳熊智; 关键词：肠道细菌思茅松毛虫脂肪酶酶学性质

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