戴亮芳 作品数:47 被引量:234 H指数:10 供职机构: 江西师范大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 江西省教育厅科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 化学工程 更多>>
东乡野生稻及其渐渗系应答低磷胁迫的基因差异表达分析 2015年 以东乡野生稻耐低磷渐渗系IL171及其双亲(栽培稻‘协青早B’和东乡野生稻)为试材,采用cDNA-AFLP技术分析其幼苗期应答低磷胁迫的差异表达谱特征,并采用实时荧光定量PCR分析验证差异表达基因的表达特性,为探究东乡野生稻耐低磷胁迫的分子机制、发掘耐低磷相关的基因奠定基础。结果显示:(1)基于17对扩增效果较好的cDNA-AFLP引物分析发现,不同胁迫时间的参试材料与其对照组(正常磷水平)相比,具有很多(20~159个)上调或下调表达的差异片段。(2)与‘协青早B’相比,IL171中特异性上调的差异带有36条,下调表达61条,而东乡野生稻中分别有79条和136条;IL171与东乡野生稻共有的上调差异带为13条,下调差异带有15条。(3)回收纯化其中60条特异性差异表达条带,最终克隆测序获得50个差异表达基因片段TDFs;通过Blast比对和功能分析,可将TDFs分为8类,包括能量与代谢、基因表达调控、信号转导和转录因子等。(4)实时荧光定量PCR验证其中6个TDFs发现,各差异片段的荧光定量PCR表达模式与cDNA-AFLP结果一致,表明该实验的cDNAAFLP差异表达结果可靠,东乡野生稻的部分耐低磷相关基因已成功导入到渐渗系中,是发掘利用东乡野生稻耐低磷相关基因、探究其耐低磷分子机制的重要资源。 罗向东 赵俊 戴亮芳 温秀芳 刘李珠 张帆涛 谢建坤关键词:东乡野生稻 低磷胁迫 CDNA-AFLP 实时荧光定量PCR 野黄瓜(Cucum is hystrix Chakr.)与3种不同基因型栽培黄瓜(C. sativus L.)种间杂交及杂种鉴定 被引量:6 2006年 野黄瓜(Cucum is hystrix,2n=24)为短日照植物,因其与栽培黄瓜(C.sativus,2n=14)花期不遇等杂交障碍的存在而使种间杂交难以顺利进行。对野黄瓜短光照处理40 d以上,使得两者花期相遇,成功地进行了野黄瓜与3种不同基因型栽培黄瓜(“二早子”、“长春密刺”和“NC4406”)的正反杂交,从中获得了3种杂交组合的幼胚。采用改良的方法对这3种基因型杂种胚进行胚胎拯救,再生频率达80%以上,其杂种的真实性通过植物学性状观察、体细胞染色体计数和天冬氨酸转氨酶(AAT)同工酶分析得到了证实。研究中还发现不同基因型杂种F1的育性存在明显差异,其中以C.hystrixדNC4406”育性最高,花粉可染率达23.3%,是在二倍体水平上进行育种利用的良好材料。 罗向东 戴亮芳 陈龙正 钱春桃 陈劲枫杜鹃花色素的分离与鉴定分析 被引量:14 2011年 运用特征性颜色反应、高效液相色谱(HPLC)和质谱(MS)等技术对浅红色毛叶杜鹃(R.championae Hook)花瓣花色素提取液进行初步鉴定和含量测定。结果表明:该杜鹃品种的花色素含有非红色的黄酮类化合物,主要有黄酮、黄酮醇、二氢黄酮等色素,其中还有部分酚类色素。高效液相色谱(HPLC)显示杜鹃花色素提取液至少包括39种物质,其中有7种可以确定,分别为杨梅黄素3-半乳糖苷、槲皮素3-半乳糖苷、槲皮素-鼠李糖苷、槲皮素3-葡萄糖苷、锦葵素3-阿拉伯糖苷-5葡萄糖苷、杨梅黄素3-鼠李糖苷、绿原酸。利用紫外分光光度法测得杜鹃花瓣中花色苷的含量为131.025mg/100g,总黄酮含量为10.68mg/g。 吴丽媛 罗向东 戴亮芳 曹娟芳 刘丽萍 洪海燕 潘文艳关键词:杜鹃 花色素 高效液相色谱-质谱 东乡野生稻基因渐渗系中逆转座子逆转录酶序列的克隆及表达分析 被引量:6 2013年 以东乡野生稻(Oryza rufipogon)耐冷渐渗系IL5335、IL5243及其双亲为试材,克隆到75条存在高度异质性的Ty1-copia类逆转座子逆转录酶序列,经聚类分析将这些逆转录酶序列分为7个家族;家族6和7含有65条逆转录酶序列,序列间的相似性为44.9%–99.3%;家族1–5仅含10条逆转录酶序列,其中8条来源于耐冷渐渗系,它们与亲本的序列相似性为29.2%–52.8%,分析发现这些序列曾发生缺失或插入突变。实时荧光定量PCR检测结果显示,IL5335和IL5243中的houba、osr15及osr17逆转录酶的表达量均远高于受体亲本(表达量增加1.50–5.07倍),表明渐渗杂交诱发改变了IL5335和IL5243中逆转录酶序列的结构及其表达活性。该结果为今后水稻表观遗传学研究及外源优异基因利用奠定了基础。 陈雅玲 罗向东 张帆涛 戴亮芳 胡标林 谢建坤关键词:东乡野生稻 表达活性 渐渗系 逆转座子 东乡野生稻渐渗系基因组结构变化及多样性分析(英文) 2012年 [目的]研究东乡野生稻渐渗系基因组结构变化及对其进行多样性分析。[方法]以东乡野生稻(O.rufipogon Griff.,供体)和栽培稻协青早B(O.sativa sp.indica Kato.,受体)构建的BC1F6渐渗群体为研究材料,利用筛选出的分布在12对染色体上的25对SSR引物对群体中的239个株系进行多态性分析。[结果]适25个微卫星位点都有东乡野生稻DNA片段不同程度的渗入,群体均大部分保留亲本协青早B或东乡野生稻的DNA序列。渐渗系基因组中平均受体纯合条带百分率为78.13%,最高达94.98%(引物为RM131),最低为60.25%(引物为RM171)。平均供体纯合条带百分率为13.37%,最高达32.64%(引物为RM171),最低为2.93%(RM1095)。群体中还存在一些杂合位点,平均杂合率为5.62%,最高达10.04%(引物为RM401)。此外,BC1F6渐渗群体中发现有双亲条带的丢失和一些双亲所没有的新条带出现,其中平均亲本条带丢失率为2.88%,最高达13.39%(引物为RM311),最低为0(引物为RM401),平均新带率为1%。高世代渐渗群体平均Nei’s基因多样性(He)和平均Shannon’s信息多样性指数(I)分别为0.276和0.457。[结论]通过远缘杂交渐渗系发生了广泛遗传与表观遗传变异,扩大了遗传变异基础,为水稻品种改良与种质创新奠定了重要基础。 邓晓娟 罗向东 谢建坤 万勇 胡标林 曹娟芳 戴亮芳关键词:东乡野生稻 渐渗系 SSR分析 羊踯躅提取物的抗癌活性检测方法及其应用 本发明提供了羊踯躅提取物的抗癌活性检测方法及其应用。羊踯躅提取物的抗癌活性检测方法包括挖掘与检测羊踯躅提取物对不同癌细胞的抑制活性、羊踯躅提取物抑制癌细胞克隆形成的检测、羊踯躅提取物诱导细胞凋亡引起周期阻滞的分析、羊踯躅... 罗向东 张金 陈敏娜 戴亮芳 刘见 宗露野文献传递 濒危羊踯躅子代幼苗遗传多样性的SSR分析 被引量:1 2019年 利用本课题组此前开发的20对多态性较高的羊踯躅SSR引物,分析来自3个省份的4个羊踯躅野生幼苗自然居群(共64个株系)的遗传多样性和遗传结构,以期为羊踯躅保护提供科学依据。结果显示:(1)20对SSR引物共扩增出314个等位基因,每个SSR位点的平均等位基因数为15.700,多态信息含量PIC和有效等位基因数N_e的均值分别为0.850和4.457。(2)羊踯躅幼苗自然居群的基因多样性指数H和Shannon多样性指数I的均值分别为0.717和1.557,其中江西金溪(JX)居群的遗传多样性最丰富,浙江磐安(PA)的最低。(3)基于无限等位基因模型(IAM)分析发现,羊踯躅幼苗种群的基因流N_m和遗传分化系数F_(st)分别为1.372和0.155;AMOVA分析表明,羊踯躅幼苗种群的86.0%变异发生于居群内,仅有14%变异发生在居群间。(4)遗传距离法聚类NJ分析和Structure分析结果基本一致,分别聚为3大类和4大类。综合比较分析发现,羊踯躅幼苗种群中的各个遗传多样性相关的指标参数均低于成年自然居群,表明生境片段化已对羊踯躅的生存构成了极大的威胁。 董丽敏 戴亮芳 白李唯丹 刘梦露 谢建坤 罗向东关键词:SSR 濒危植物 辣椒细胞质雄性不育系及其保持系的AFLP分析(英文) 被引量:6 2010年 [目的]对辣椒细胞质雄性不育系及其保持系进行AFLP分析,为进一步深入研究辣椒细胞质雄性不育的分子机制奠定基础。[方法]采用AFLP技术对辣椒细胞质雄性不育系21A及其保持系21B进行分析,获得不育系21A特异扩增片段。将特异扩增片段回收测序并用BLASTn和BLASTX程序在NCBI数据库中进行同源性检索和相似性比对。[结果]获得了不育系21A特异性扩增片段AA/CAG169,该片段中部分序列(位于122~158bp,AGAATTGGTA CGCAGTCTATGATGAGTCCTGAGTAAC,共37bp)是Penaeus monodon性别及生长性状相关的AFLP标记序列(AFE549M27.1)中串联重复序列;BLASTX和TBLASTX分析结果表明,该特异性片段的翻译产物与马铃薯的假拟gag-pol蛋白、假拟逆转座子蛋白、假拟逆转座子gag蛋白具有较高的相似性。[结论]特异性片段AA/CAG169的功能可能与逆转座子有关,表明其可能与育性密切相关。 罗向东 戴亮芳 陈劲枫 王述彬关键词:辣椒 细胞质雄性不育 AFLP分析 一种濒危羊踯躅多态性SSR分子标记开发与应用的方法 本发明公开了一种濒危羊踯躅多态性SSR分子标记开发与应用的方法,利用简化基因组测序技术开发得到11,687对羊踯躅SSR分子标记,从中鉴定获得了16对多态性SSR分子标记,它们能够检测到羊踯躅基因组的SSR位点信息,其有... 罗向东 程马龙 戴亮芳 田欢 谢建坤文献传递 辣(甜)椒细胞质雄性不育系减数分裂和雄配子发生过程 被引量:34 2004年 运用减数分裂制片技术和石蜡切片法观察了辣椒细胞质雄性不育系21A和保持系21B以及甜椒细胞质雄性不育系金A和保持系金B减数分裂和雄配子发生的整个过程。结果表明,不育系和保持系都能进行正常减数分裂,中期I的染色体构型为9个环状二价体和3个棒状二价体,后期I和后期II都均等分裂,形成了正常的四分孢子(n=12)。保持系的四分孢子经过单核和双核期后形成成熟花粉粒。雄性不育系从小孢子单核靠边期开始异常,绒毡层细胞径向异常膨大,挤压花粉粒,致使小孢子在形成双核之前完全裂解,导致不育。 王述彬 罗向东 戴亮芳 钱春桃 陈劲枫 刘金兵 潘宝贵关键词:辣椒 细胞质雄性不育 减数分裂