牟春花
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 金黄色葡萄球菌RNaseH Ⅰ、RNaseH Ⅱ和RNaseH Ⅲ突变菌株的构建及功能研究
- 2010年
- 目的:在金黄色葡萄球菌中分别构建RNaseHⅠ、RNaseHⅡ和RNaseHⅢ的突变菌株,并研究它们在金黄色葡萄球菌中的生物学功能。方法:利用同源重组的方法在金黄色葡萄球菌中分别构建RNaseHⅠ、RNaseHⅡ和RNaseHⅢ的插入突变菌株,检测突变株生长速度、溶血活性及外分泌蛋白表达水平与野生型的差异,进一步通过流式细胞术检测突变株外分泌蛋白细胞毒性的改变,同时在体外检测突变株在全血中的存活能力。结果:构建了金黄色葡萄球菌RNaseHⅠ、RNaseHⅡ和RNaseHⅢ的插入突变菌株;表型检测结果显示,与野生型菌株相比,3种突变株的生长速度减慢,溶血素和外分泌蛋白明显减少;流式细胞术检测结果显示3种突变株毒性比野生型菌株减弱;全血杀伤实验结果显示3种突变株在全血中的存活率低于野生型菌株。结论:RNaseHⅠ、RNaseHⅡ和RNaseHⅢ在金黄色葡萄球菌生长繁殖、毒素产生和侵袭机体的过程中有重要作用,它们可能与金黄色葡萄球菌的致病性相关。
- 吴娜刘玉董洁高亚萍张鑫牟春花邵宁生杨光
- 关键词：金黄色葡萄球菌突变
- 金黄色葡萄球菌SarS蛋白参与压力应激的初步研究
- 2013年
- 目的通过构建金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,简称金葡菌)中SarS蛋白突变株,研究SarS蛋白在金葡菌中的调控功能。方法利用同源重组的方法构建金葡菌8325-4来源的sarS插入突变菌株,通过MDBK细胞模型检测突变株外毒素水平,以及其在高盐、高温等条件下的生长情况。结果成功构建了金葡菌8325-4来源的sarS插入突变菌株。进一步的表型检测结果显示,与野生型菌株相比,sarS突变株在高温、高渗、重金属等应激条件下的生长速度明显下降,但是细菌外毒素对MDBK细胞的杀伤作用没有明显的改变。结论 SarS蛋白在金葡菌抵抗外界压力应激中发挥着重要的功能。
- 谭小蓉刘玉牟春花高亚萍董洁杨光
- 关键词：SARS
- 金黄色葡萄球菌ltaS突变株的构建与eLtaS蛋白的表达被引量：1
- 2012年
- 目的通过构建金黄色葡萄球菌(SAU)ltaS突变株以及体外重组表达其胞外形式的eLtaS蛋白,研究LtaS以及eLtaS蛋白在SAU中的生物学功能。方法利用同源重组的方法构建SAU 8325-4来源的ltaS缺失突变菌株,并对其生长以及外毒素水平进行检测;同时,在大肠杆菌中,体外重组表达并纯化eLtaS蛋白,继而观察其对SAU生长的影响。结果在SAU 8325-4中成功构建了ltaS缺失突变菌株,并发现ltaS突变株生长较野生型菌株缓慢;通过表达纯化成功获得高纯度的eLtaS蛋白,其与突变株共培养后对突变株的生长缓慢现象没有回复作用。结论 LtaS蛋白在SAU侵袭机体的过程中发挥着重要的功能,其胞外形式的eLtaS蛋白可能未参与脂磷壁酸(lipotei-choic acid,LTA)的合成。
- 芦强牟春花张鑫刘玉董洁高亚萍杨光
- 关键词：突变
- 金黄色葡萄球菌糖肽水解酶LytM及其C端的表达、纯化与功能研究
- 2010年
- 目的利用大肠杆菌重组表达金黄色葡萄球菌(SAU)糖肽水解酶LytM及其C端185～316 aa蛋白(LytM185～316),检测其生物学活性,并制备多克隆抗体,为检测LytM活性体的天然形式和产生机制以及研究LytM蛋白在SAU感染中的生物学意义奠定基础。方法以SAU 8325-4基因组为模板,PCR扩增lytM及其C端基因,并将其克隆入pET-28a构建重组表达载体,转化入大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG诱导阳性克隆表达目的蛋白,通过亲和纯化获得目的蛋白LytM及LytM185～316,并制备LytM的多克隆抗体;用薄层层析法测定LytM以及LytM185～316的生物活性,并检测重组蛋白对SAU 8325-4菌体的裂解作用。结果成功构建了表达载体pET-28a-LytM和pET-28a-LytM185～316,获得了纯度较高的重组蛋白LytM及LytM185～316,经测定LytM不能够水解底物而LytM185～316具有较强的糖肽水解酶活性。制备了高效价的抗LytM的多克隆抗体,并证实其可以与LytM及LytM185～316特异性结合。结论只含有C端185～316 aa的重组蛋白能够水解底物,而全长的LytM不具有糖肽水解酶活性。
- 牟春花刘玉董洁吴娜高亚萍邵宁生杨光
- 关键词：多克隆抗体
- 金黄色葡萄球菌糖肽水解酶LytM表达调控及其生物学功能的初步研究
- 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种广泛存在的革兰氏阳性致病菌,是导致医院内感染和后天免疫性群体感染的最主要的原因之一。它可以引发多种疾病,如皮肤、黏膜的化脓性炎症,甚至危及生命的败血症、心...
- 牟春花
- 关键词：金黄色葡萄球菌TRAP
- 文献传递
