王丽婷
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:上海市计划生育科学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人绒毛膜促性腺激素β亚基单一B-细胞表位(β5、β9或β8)融合蛋白的表达和纯化被引量:1
- 2004年
- 作为开发新型实用性人绒毛膜促性腺激素 (hCG)疫苗的一种尝试 ,我们已构建若干组合靶抗原三个线性B_细胞表位和外源强T_细胞表位的基因工程hCG嵌合肽。为了检测用这些嵌合肽免疫的动物血清中是否能产生抗各表位的三种抗体 ,本研究选用能在大肠杆菌中高表达和与生物素亲和性强且特异 (方便通过亲和层析纯化 )的链霉亲和素为载体 ,分别构建了三种含 β_hCG不同单一线性B_细胞表位 (β5 ,β9和 β8)的融合蛋白。在链霉亲和素基因下游多克隆区EcoRⅠ和HindⅢ位点插入各表位编码基因片段 (带TAA终止密码子 )的pTSA_18重组质粒 ,转化BL2 1(DE3)pLysS宿主菌后 ,它们在IPTG诱导下均能以较高水平表达各自目的融合蛋白 ,而且它们的表达产物在Westernblot鉴定中都能被抗各表位特异的多抗或单抗或抗报告表位单抗识别。用改良的制备性PAGE方法可以一步纯化电泳均一性高于 95 %的三个融合蛋白 ,它们的收得率相对 1L培养物约为 5mg。作为化学合成表位肽的替代物 ,β_hCG三个单一B_细胞表位融合蛋白的可获得性将有助于所构建hCG基因工程嵌合肽以及其他hCG疫苗 ,也包括它的DNA疫苗的免疫原性分析。
- 徐万祥何亚萍何远王丽婷孙志达季朝能顾少华陈金中应康谢毅
- 关键词:人绒毛膜促性腺激素免疫印迹纯化
- 人卵透明带蛋白-3在E.coli中的分段表达、纯化及其鉴定
- <正> 哺乳动物包括人的卵子外都围有一层半透明带(zona pellucida, ZP),它们通常由按电泳迁移率大小命名的ZP1、ZP2和ZP3或按所克隆基因大小命名的ZPA、ZPB和ZPC三种糖蛋白组成。长期以来,ZP...
- 徐万祥何远何亚萍王丽婷孙志达季朝能钱吉王曙谢毅
- 文献传递