王达安
- 作品数：43 被引量：134H指数：7
- 供职机构：暨南大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 谷氨酰胺强化的肠外营养对普外科全身炎症反应综合征的影响被引量：7
- 2003年
- 目的 :研究谷氨酰胺 (Gln)增强的肠外营养对普外科全身炎症反应综合征 (SIRS)的影响。方法 :将4 0例符合SIRS诊断标准的外科危重和大手术后病人随机分成Gln组和对照组 ,各 2 0例 ,两组均给予常规外科治疗 ,并于术后第 1- 3d开始肠外营养连续 7d ,其中Gln组的氮量由 2 0 %L -丙氨酰 -L -谷氨酰胺溶液供给 (0 .5g·kg-1·d-1) ,其余部分供给 (7- 11.4 ) %氨基酸溶液 ,对照组的氮量仅用 (7- 11.4 ) %氨基酸溶液供给。两组病人分别于肠外营养前和营养后 7d抽取外周血测量血红蛋白 (HB)、白蛋白 (Alb)、转铁蛋白 (TRF)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)水平。并进行APACHEⅡ评分。结果 :Gln组经肠外营养治疗后IgG水平、TRF水平分别由(9.2± 3.1)g/L、(1.17± 0 .3)g/L增高至 (14± 2 .8)g/L、(1.36± 0 .7)g/L ,相比差异显著 (P <0 .0 5 )。治疗后两组A PACHEⅡ评分均低于治疗前 (P <0 .0 5 ) ,Gln组评分又低于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :Gln增强的肠外营养能促进普外科SIRS病人蛋白质合成代谢 ,提高机体免疫功能 ,减轻病情的危重程度。
- 姜海平刘春安王达安
- 关键词：谷氨酰胺胃肠外营养脓毒症综合征
- 人p53不同突变体的构建、表达及其对亚砷酸盐诱导细胞凋亡的影响被引量：1
- 2008年
- 目的构建人p53的不同突变体,并在真核细胞中表达,研究这些突变体对应激刺激诱导细胞凋亡的影响。方法采用PCR方法扩增人p53 cDNA序列,使用常规酶切、连接方法将其重组至pcDNA3/HA载体中,对阳性克隆进行酶切和PCR鉴定。将阳性重组体的第15位和第46位丝氨酸突变为丙氨酸,并转染NIH3T3细胞,观察其在NIH3T3细胞内的表达情况。转染不同突变体的NIH3T3细胞用Annexin V-FITC和碘化丙啶双标后,利用流式细胞术检测亚砷酸盐刺激前后的凋亡情况。结果构建的pcDNA3/HA-p53(WT)、pcDNA3/HA-p53(S15A)和pcDNA3/HA-p53(S46A)是正确的,且能在NIH3T3细胞内有效表达。流式细胞术检测表明,p53(WT)的表达使亚砷酸盐诱导的细胞凋亡增加,p53(S15A)的表达使细胞凋亡减少,而p53(S46A)没有明显影响。结论p53的第15位丝氨酸在其介导亚砷酸盐诱导的细胞凋亡中具有重要作用。
- 刘爱华龚小卫魏洁明小燕王达安邓鹏罗深秋姜勇
- 关键词：P53定点突变基因表达细胞凋亡亚砷酸盐
- 家兔静脉灌注水杨酸钠对EGTA性发热及其脑脊液cAMP,PGE_2含量的影响被引量：8
- 1991年
- 为确定cAMP和PGE是否参与EGTA性发热的机制,作者用40只家兔进行实验,观察预先静脉灌注一定剂量水杨酸钠对侧脑室灌注EGTA所引起的发热效应以及脑脊液cAMP和PGE_2含量的增多有何影响。实验结果表明:静脉注射1.25mM随后以9.6μM/分钟恒速灌注水杨酸钠,可抑制由侧脑室灌注0.6mM EGTA所引起的脑脊液PGE_2含量增多(P<0.01),但对其引起的发热效应及脑脊液cAMP含量增多无明显影响(P>0.05),在EGTA性发热时,发热效应与脑脊液cAMP含最增多之间呈明显正相关(r=0.983 9,P<0.01)。据此,作者推论:在EGTA性发热机制中,中枢Na^+/Ca^(++)比值增高引起cAMP含量增多可能起重要作用;而中枢PGE_2含量增多则不是必需环节,也不是中枢cAMP含量增多的原因。
- 王达安李楚杰
- 关键词：发热水杨酸钠脑脊液
- 川芎嗪对肺心病患者肺动脉高压的影响及其机制探讨被引量：10
- 2006年
- 王达安程少冰
- 关键词：川芎嗪高血压肺性血管内皮细胞
- pNTAP-MK2真核表达载体的构建及其稳定表达细胞系的建立
- 2010年
- 目的构建pNTAP-MK2真核表达质粒,并建立其稳定表达的HEK293细胞系。方法将MK2亚克隆至串联亲和纯化载体pNTAP质粒上,构建成重组质粒pNTAP-MK2,转化该重组质粒至感受态大肠杆菌DH5α,阳性克隆进行PCR、酶切及DNA测序验证正确后,利用脂质体PolyFect介导将其转染至HEK293细胞中,再通过G418筛选建立稳定表达TAPtag-MK2融合蛋白的HEK293细胞系;利用Western blotting和细胞免疫荧光标记法检测融合蛋白TAPtag-MK2的表达及细胞内定位情况。结果重组真核表达载体构建正确,该重组质粒能在HEK293细胞中稳定表达,表达产物TAPtag-MK2主要分布在核内。结论成功构建pNTAP-MK2真核表达载体并建立了其稳定表达的HEK293细胞系,TAP标签未对MK2定位产生明显影响。
- 王达安龚小卫刘爱华梅柱中王丹明小燕王旭魏洁邓鹏姜勇
- 关键词：真核表达载体分子克隆
- N-乙酰半胱氨酸对肺心病患者肺动脉压的影响及其机制探讨被引量：4
- 2006年
- 目的探讨N-乙酰半胱氨酸对肺心病肺动脉压的影响及其机制。方法将肺心病患者随机分为常规治疗组和常规治疗+N-乙酰半胱氨酸治疗组(N-乙酰半胱氨酸组),测定两组治疗前、后的右室射血前期时间与肺动脉血流加速时间比值(RVPEP/AT)的变化,作为衡量肺动脉压的指标;此外,测定健康组及两治疗组治疗前、后的循环内皮细胞(CEC)计数、血浆内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)含量的变化。结果治疗前两治疗组CEC计数和血浆ET-1明显高于健康组,而NO明显低于健康组(P均<0.01)。两治疗组治疗后RVPEP/AT、CEC计数和ET-1含量均低于治疗前,而NO高于治疗前(P<0.01或P<0.05);但所有这些变化均以N-乙酰半胱氨酸组的变化程度更明显(P<0.01)。结论N-乙酰半胱氨酸有助于肺心病患者肺动脉高压的缓解,其机制可能与保护肺血管内皮细胞、重建血管活性因子平衡有关。
- 王达安程少冰
- 关键词：N-乙酰半胱氨酸肺心病血管内皮细胞
- Septin 8红色荧光蛋白融合载体的构建及表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建在哺乳动物细胞中表达的septin 8红色荧光蛋白融合表达载体(pmCherry-C2/septin 8),并观察其在细胞内的表达和定位情况。方法采用PCR的方法从人脑胶质细胞瘤cDNA文库中扩增获得septin 8基因编码区序列,将其克隆至红色荧光蛋白载体pmCherry-C2上,重组质粒经PCR、酶切以及序列分析正确无误后转染NIH3T3细胞,并利用Western blotting和细胞免疫化学技术分析重组蛋白在细胞内的表达和定位。结果重组pmCherry-C2/septin 8融合蛋白在NIH3T3细胞中得到高量表达且主要分布于细胞浆。结论成功构建了pmCherry-C2/septin 8融合表达载体,该载体能在哺乳动物细胞NIH3T3中表达,为进一步研究septin 8细胞内生物学功能打下了良好的基础。
- 王丹梅柱中刘爱华明小燕王达安王旭姜勇
- 关键词：红色荧光蛋白基因表达
- 川芎嗪对肺心病循环内皮细胞、血MDA和SOD的影响
- 2005年
- 王达安李菁
- 关键词：循环内皮细胞川芎嗪SOD肺血管内皮细胞特异性指标
- 丙氨酰-谷氨酰胺对外科危重患者术后免疫功能的影响被引量：4
- 2003年
- 目的 研究丙氨酰 谷氨酰胺 (Ala Gln)对外科危重患者术后免疫功能的影响。方法 将 3 0例外科急症大手术后APACHEⅡ评分大于 12分的患者随机分成实验组和对照组。两组均于术后给予常规外科治疗并于术后第 1～ 3天输入全营养混合液 ,其中实验组的部分氮量由 2 0 %L 丙氨酰 L 谷氨酰胺双肽注射液按每天 0 .5 g/kg体重提供 ,余部分氮量由氨基酸溶液供给。对照组仅用氨基酸溶液为氮源。分别取治疗前 (术后第 1天 )及治疗后第 7天的外周血标本测量CD3 、CD4、CD8、CD4/CD8、IgG、IgA、IgM、总淋巴细胞计数 (TLC)。 结果 实验组IgG、IgA治疗后 ( 14 .12± 3 .70 ) g/L、( 3 .5 1± 1.10 ) g/L较治疗前 ( 9.19± 4.10 )g/L、( 2 .49± 1.2 0 ) g/L显著升高 (P <0 .0 1) ;TLC( 1.13±0 .87)× 10 9/L较治疗前 ( 1.0 3± 0 .79)× 10 9/L显著升高 (P <0 .0 5 )。结论 丙氨酰 谷氨酰胺强化的肠外营养能提高外科危重患者术后免疫球蛋白和淋巴细胞计数 ,提高免疫功能。
- 姜海平刘春安王达安
- 关键词：外科危重患者术后免疫功能
- 肌动蛋白和Tau蛋白荧光蛋白融合载体的构建、表达及其细胞内定位
- 2009年
- 背景:肌动蛋白和Tau蛋白分别是微丝和微管的重要组成成分,肌动蛋白和Tau蛋白的分布能否作为微丝和微管的观察指标。目的:构建肌动蛋白和Tau蛋白的红色和绿色荧光蛋白融合表达载体并转染真核细胞,观察其在细胞内的表达和定位情况。设计、时间及地点:单一样本观察实验,于2008-03/08在南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室共同完成。材料:克隆在pcDNA3载体上的肌动蛋白和Tau蛋白真核表达载体pcDNA3-actin和pcDNA3-Tau,以及红色荧光蛋白表达载体pmCherry-C2和绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C2、大肠杆菌株DH5α和小鼠NIH3T3细胞系由南方医科大学病理生理学教研室保存。方法:将克隆在pcDNA3上的肌动蛋白和Tau蛋白亚克隆到红色荧光蛋白载体pmCherry-C2和绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2上,然后转染NIH3T3细胞,利用荧光显微镜观察重组载体的表达和细胞内定位。主要观察指标:NIH3T3细胞转染24h后,利用Leica荧光显微镜观察上述重组载体在细胞中的表达和定位情况。结果:重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在NIH3T3细胞中可获得高量表达。融合蛋白发出的红色和绿色荧光均表明,肌动蛋白在细胞质中呈短丝状弥散分布,Tau蛋白以细胞核为中心呈放射状排列。结论:成功构建了肌动蛋白和Tau蛋白的不同荧光蛋白融合表达载体,并在真核细胞中得到有效表达,这为研究细胞骨架在信号分子移位中的作用提供了一个重要的工具。
- 明小燕龚小卫王丹王达安王旭姜勇
- 关键词：肌动蛋白TAU蛋白荧光蛋白细胞内定位
