袁芳芳
- 作品数:6 被引量:19H指数:4
- 供职机构:广州军区广州总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 热打击对培养肠黏膜上皮细胞IEC-6细胞活性和增殖的影响被引量:4
- 2012年
- 目的:研究梯度热打击对体外培养肠黏膜上皮细胞活性和增殖的影响。方法:肠黏膜上皮细胞株IEC-6经培养后分为正常对照组(37℃、5%CO_2培养箱培养)及39℃、41℃、43℃热打击组(分别在相应温度培养箱中培养),相差显微镜观察各组细胞培养1 h的形态学改变,CCK-8法比较各组细胞培养0、1、3、5、7 h的细胞活性和24 h增殖率,流式细胞术研究细胞周期的改变。结果:与正常对照组比较,各热打击组各个时相细胞形态变圆,伪足变短,细胞间隙增大,活力下降(P<0.01)。24 h细胞增殖实验显示,与正常对照组比较,39℃组7 h及41℃和43℃组各时相增殖率显著下降(P<0.01),呈时间及温度依赖关系。流式细胞术检查显示,热打击组细胞呈现细胞周期G0/G1和G2/M期阻滞。结论:热打击对IEC-6细胞具有细胞毒效应,可抑制IEC-6细胞的增殖,造成细胞周期G0/G1和G2/M期阻滞。
- 袁芳芳苏磊刘志锋潘志国谭新耿焱
- 关键词:肠黏膜上皮细胞细胞毒细胞增殖细胞周期
- 热打击致肠上皮细胞损伤机制的中西医研究
- 目的: 通过离体细胞和分子水平,研究热打击对肠上皮细胞和细胞间连接的影响,为阐明肠机械屏障损伤在中暑肠道病变中的可能作用机制提供实验依据。 方法: 1.热打击对肠上皮细胞形态与细胞骨架的影响 体外培养正常大鼠肠上...
- 袁芳芳
- 关键词:中暑肠上皮细胞细胞骨架细胞活力
- 二十碳五烯酸对热打击后肠上皮细胞的影响被引量:2
- 2013年
- 目的:探讨二十碳五烯酸(EPA)对热打击后肠黏膜上皮细胞通透性改变的影响。方法:使用Caco-2细胞株建立肠上皮细胞紧密连接模型,加入25、50、100、150μmol/L EPA培养96 h,进行43℃1 h的热打击。分别使用CCK-8法检测细胞增殖,transwell测定单层跨膜电阻抗(TEER)值和对大分子物质辣根过氧化物酶(HRP)的通透性,Western blot法检测occludin蛋白的表达水平,显微镜下观察考马斯亮蓝染色细胞骨架的变化。结果:50μmol/L的EPA促进细胞增殖的效果最强,升高TEER和防止HRP通透性升高的作用最大(与其他各浓度组比较,P均<0.01),对occludin表达的增加作用最明显,并有益于维持细胞骨架的正常结构。结论:50μmol/L的EPA能够保护肠上皮紧密连接,对肠黏膜屏障有一定的保护作用。
- 肖桂珍袁芳芳古正涛刘志锋张亚历苏磊
- 关键词:中暑二十碳五烯酸肠黏膜屏障
- 热打击对单层肠上皮Caco-2细胞屏障功能的影响被引量:5
- 2013年
- 目的研究热打击对肠黏膜屏障上皮细胞间紧密连接及凋亡的影响。方法采用肠上皮细胞株Caco-2建立肠屏障模型,检测经37~43℃热打击后细胞的单层跨膜电阻抗(TEER)值及对大分子物质辣根过氧化物酶(HRP)的通透性,采用Western blotting检测occludin蛋白的表达水平,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果随着热打击温度的升高,TEER值降低,HRP通透性增加,37℃热打击细胞的TEER值和HRP通透性与39、41、43℃热打击细胞差异均有统计学意义(P〈0.01)。热打击温度从37℃到41℃,occludin蛋白的表达逐渐增加,于41℃达峰值,此后逐渐下降。43℃时随热打击时间延长,occludin蛋白表达逐渐降低。随热打击温度(37~43℃)升高,细胞凋亡逐渐增加(P〈0.05或P〈0.01)。结论热打击可造成肠上皮紧密连接的明显破坏,细胞凋亡增加,从而破坏肠屏障功能。
- 肖桂珍袁芳芳古正涛刘志锋张亚历苏磊
- 关键词:中暑肠黏膜细胞凋亡
- 肠功能障碍分子机制的研究进展被引量:9
- 2012年
- 现已注意到,在重症患者各种病理生理状态下,肠功能障碍可能是引起全身性炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome)的启动因子和刺激因子,是脓毒症、多器官功能障碍综合征(MODS)的“发动机(motor of sepsis)。然而,由于肠道功能的多样性和复杂性,如具有选择性吸收营养物质、内分泌、免疫、代谢和屏障等多重复杂功能,再加上有关各种病理状态下发生肠道功能障碍,以及其与MODS的关系的研究资料很少,致使迄今尚未对肠功能障碍的诊断标准形成共识,究其原因是对重症疾病条件下肠功能障碍的分子机制认识不清。
- 袁芳芳苏磊刘志锋
- 关键词:肠功能障碍INFLAMMATORY全身性炎症反应综合征肠道功能障碍病理状态生理状态
- 热打击联合脂多糖刺激对人肠上皮细胞SW480释放细胞因子的影响被引量:5
- 2012年
- 目的:观察脂多糖(LPS)与热打击分别单独作用与联合作用对人肠上皮细胞SW480释放细胞因子的影响。方法:于37℃、5%CO_2标准培养箱中培养人肠上皮细胞株SW480。实验分4组:空白对照组直接收集细胞上清;LPS单独刺激组(LPS组)分别使用0、0.01、0.1、1和10μg/ml的LPS刺激SW480细胞,24 h后收集细胞上清;热打击组将SW480细胞进行热打击(42℃,1 h)后在标准孵箱分别培养1 h和24 h后收集细胞上清;LPS+热打击组将SW480细胞42℃热打击1 h后给予上述浓度的LPS刺激,再重新置于标准孵箱中培养,24 h后收集细胞上清。各组细胞上清用LiquiChip液相蛋白芯片系统分别检测粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等10种细胞因子/趋化因子的表达分泌水平。结果:单独LPS刺激时呈剂量依赖性诱导SW480表达分泌IL-8,对其余9种细胞因子/趋化因子的表达分泌水平影响不明显。单纯热打击仅诱导SW480细胞表达分泌IL-8的水平升高,且与空白对照组比较,仅热打击24 h后IL-8的水平显著增加(P<0.01)。热打击联合不同浓度的LPS刺激SW480细胞,LPS浓度低时并不影响SW480表达分泌IL-8的水平(P>0.05),而高浓度LPS可以显著减少其表达分泌水平(P<0.05)。结论:人肠上皮细胞SW480作为脏器实质细胞,对炎性刺激仅能产生单一种类的细胞因子,其中LPS单独刺激和一定强度的热打击均可上调SW480分泌IL-8;但高浓度LPS在热环境下可抑制SW480细胞的IL-8表达分泌水平。
- 唐丽群袁芳芳刘亚伟徐秋林苏磊刘志锋
- 关键词:脂多糖细胞因子肠上皮细胞