邓云华
- 作品数：50 被引量：250H指数：9
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 人ABCB6表达载体的构建及稳定表达细胞株A375的筛选被引量：2
- 2012年
- 目的构建表达载体pIRES2-ZsGreen1-ABCB6,在转染的人黑素瘤细胞系株A375中筛选其稳定表达的细胞株。方法抽取健康人外周血,分离外周血单个核细胞,提取总RNA,逆转录获取cDNA序列,加入特异性引物经PCR扩增获得ABCB6cDNA双链,再经过BglII、EcoRI双酶切PCR产物及质粒载体pIRES2-ZsGreen1,酶切产物经回收、T4DNA连接酶连接,产物转化到大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆经菌落PCR鉴定、酶切鉴定和测序分析,以确定构建质粒正确。转染人黑素瘤细胞株A375,G418筛选稳定表达ABCB6的单克隆细胞株,应用荧光显微镜鉴定ABCB6蛋白的表达情况。结果 pIRES2-ZsGreen1-ABCB6质粒经菌落PCR、酶切、测序鉴定正确,经过G418筛选后获得稳定细胞株,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白在A375细胞中的表达。结论表达载体pIRES2-ZsGreen1-ABCB6构建正确,并成功筛选出稳定表达ABCB6的A375细胞株,为进一步研究ABCB6的生物学功能奠定了良好基础。
- 张彩娥陈岚任伟萍梅爱华邓云华
- 关键词：转染A375细胞
- 艾滋病误诊为Sweet综合征1例
- 2016年
- 患者男,52岁。口腔疼痛性溃疡2个月,全身散发水肿性红斑、斑块伴疼痛和瘙痒1周。皮肤科情况:颜面、躯干及四肢可见散在分布浸润性水肿性红斑及斑块,界清,部分融合,呈环状或类圆形,部分表面可见绿豆大丘疹,似水疱,部分皮疹破溃并结痂。鼻端、舌尖及舌背可见多个浅溃疡,基底潮红,上覆厚层黄白色伪膜样物。入院后按Sweet综合征对症治疗,皮损无改善,继续有新发皮损,发热加重。刮取患者舌部溃疡伪膜样分泌物镜检发现真菌菌丝,培养鉴定为白念珠菌。采用流式细胞术分析外周血发现淋巴细胞亚群Th/Ts(CD4^+/CD8^+)为0.00,HIV抗体初筛实验与确证实验均呈阳性。修正诊断:获得性免疫缺陷综合征。
- 陈露珠陈岚石小霞李宏文石娴邓云华陈兴平
- 关键词：获得性免疫缺陷综合征SWEET综合征
- 加载HPV6E7抗原肽的HLA-A2单体及其四聚体的制备和鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的制备可生物素化的可溶性HLA-A2/HPV6E7单体,进一步组装成PE标记的可溶性HLA-A2/HPV6E7四聚体。方法以原核表达的sHLA-A2BSP为重链,β2m为轻链,与人工合成的HPV6E7(22-30)抗原肽(GLH-CYEQLV)利用稀释法进行共折叠复性得到单体。利用HLAI类分子单抗(W6/3)和抗Bzm抗体进行Westernblot和ELISA鉴定折叠产物的构象。以BirA酶对其进行生物素化,经过超滤离心后得到纯化的sHLA-A2/HPV6E7单体,再与Streptavidin-PE按4:1比例混合形成四聚体。结果该四聚体具有与HLA-A2阳性HPV6感染的CA患者的抗原特异性CTL结合活性。结论成功获得了天然构象的sHLA-A2/HPV6E7单体及PE标记的HLA-A2/HPV6E7四聚体。
- 张彩娥邓云华吴雄文梁智辉翁秀芳卢小玲夏芳珍钟茂华陆盛军
- 关键词：HLA-A2尖锐湿疣细胞毒性T细胞
- 系统型结节性脂膜炎骨髓受累分析被引量：2
- 2001年
- 目的 探讨系统型结节性脂膜炎患者骨髓受累情况。方法 对 13例住院患者同时进行血象和骨髓象的检查与分析。结果 ①血象中红细胞减少 12例 ;白细胞减少 10例 ,其中中性粒细胞降低伴淋巴细胞增高 7例 ;3例白细胞总数增多。②骨髓象中骨髓增生活跃 12例 ,减低 1例 ;粒系增生减低 9例 ,活跃 3例 ;红系增生减低 3例 ,活跃 3例 ;淋巴系增生活跃 2例 ,余正常。结论 ①患者的血象异常来源于其骨髓受累 ,异常表现为红系和粒系有不同程度受抑、淋巴系受累较轻 ;②骨髓受累程度与病情轻重相关 ,轻症患者骨髓受损较轻 ,积极治疗可阻止病情发展 ;
- 邓云华徐祖森陈兴平周礼义陈映玲
- 关键词：血象骨髓象
- 卡介菌多糖核酸对正常小鼠T淋巴细胞亚群的影响被引量：8
- 2004年
- ①目的 探讨卡介菌多糖核酸对正常小鼠T淋巴细胞亚群的影响及其免疫调节的机制。②方法用流式细胞仪测量小鼠胸腺、脾脏、外周血单个核细胞中T细胞亚群CD+ 4 、CD+ 8细胞变化并计算CD+ 4 /CD+ 8的比值。③结果 与正常对照组比较 ,卡介菌多糖核酸可提高正常小鼠上述 3种不同组织中CD+ 4 、CD+ 8细胞的比例 ,并在第 35天有明显差异 (F =5 .6 3～ 1 1 .2 1 ,q =5 .32～ 9.1 3,P <0 .0 5 ) ,而对CD+ 4 /CD+ 8比值无明显影响。④结论卡介菌多糖核酸可以促进T细胞的分化与成熟 ,并可能通过调节CD+ 4 、CD+ 8细胞两亚群之间的平衡来发挥免疫调节作用。
- 李永喜陈兴平邓云华陈映玲周礼义
- 关键词：卡介菌多糖核酸T淋巴细胞免疫测定小鼠
- 皮肤感染分离菌对5种氟喹诺酮抗菌药物耐药性分析
- 2002年
- 目的 了解 5种氟喹诺酮抗菌药物对皮肤感染分离菌的耐药情况。方法 用ATBExpression系统鉴定细菌 ,用纸片扩散法检测其对抗生素的敏感性 ,比较 5种氟喹诺酮抗菌药与临床常用抗生素的耐药性。结果 ①氧氟沙星、司氟沙星、莫西沙星、左氧氟沙星、环丙沙星对皮肤感染分离的金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、人苍白杆菌、假单胞菌及大肠埃希菌耐药率均为 0 ,而对凝固酶阴性葡萄球菌的耐药率分别为 2 3.8%、2 3.8%、9.5 %、14 .3%、2 1.1% ;②庆大霉素、万古霉素、头孢他啶对葡萄球菌亦未出现耐药 ,而红霉素、阿奇霉素及青霉素耐药率均较高。结论
- 曹育春徐祖森邓云华邹耘陈兴平陈如
- 关键词：皮肤感染氟喹诺酮耐药性抗菌药
- 累及掌跖的玫瑰糠疹2例
- 2006年
- 累及掌跖的玫瑰糠疹较少报道。现报告确诊的2例,并予以讨论。例1,女,21岁。躯干、四肢皮肤淡红斑,双手掌丘疱疹与红斑26天。例2,女,26岁。胸、背、四肢散发淡红斑疹及斑片伴轻度瘙痒1月。2例均经临床表现结合组织病理检查确诊。
- 李皓邓云华陈兴平
- 关键词：玫瑰糠疹
- 复发性生殖器疱疹患者外周血IL-12与Th1/Th2细胞因子的检测被引量：15
- 2005年
- 目的检测复发性生殖器疱疹(RGH)患者不同病期外周血CD4+T细胞内IL-12,IFN-,γIL-4的水平,探讨IL-12,Th1与Th2亚群在疾病中的可能作用。方法应用流式细胞仪对20例发作期、15例恢复期RGH患者和15名健康人外周血CD4+T细胞IL-12,IFN-γ和IL-4进行检测。结果发作期患者外周血IFN-γ+-CD4+T细胞百分率显著低于正常对照组(P<0.05),IL-4+-CD4+T细胞百分率明显高于正常对照组(P<0.01),Th1/Th2比值显著低于正常对照组(P<0.01),同时IL-12+-CD4+T细胞百分率显著降低(P<0.01)。恢复期患者外周血IL-12+-CD4+T细胞百分率仍显著低于正常(P<0.05)。结论RGH患者存在Th1/Th2比例失衡和IL-12水平低下,而后者可能是导致Th1/Th2比例失衡和病情反复发作的重要原因。
- 邓云华杨东亮万沐芬陈兴平陈映玲
- 关键词：复发性生殖器疱疹CD4^+T细胞
- 根据前驱症状施药能有效减轻复发性生殖器疱疹病情被引量：4
- 2007年
- 目的探讨利用前驱症状的“警示”信号尽早使用国产法昔洛韦胶囊对复发性生殖器疱疹(RGH)临床疗效的影响。方法将60例RGH患者随机分为试验组和对照组各30例。试验组患者于复发的前驱症状出现时经自行判断而尽早服用备用法昔洛韦胶囊,每次0.25 g,tid,连用6 d,皮损处外搽1%喷昔洛韦乳膏,第2次复发时给药方法同前;对照组患者于复发后立即复诊用药。记录两组患者复发皮损面积、复发间隔时间与皮损痊愈时间。结果试验组复发皮损面积较对照组显著缩小(P<0.01),试验组复发皮损痊愈时间较对照组显著缩短(P<0.01),两组2次复发后间隔时间差异无显著性。结论利用RGH前驱症状的“警示”信号在复发的最早期及时使用有抗疱疹病毒药物的疗法能有效减轻RGH复发病情。
- 邓云华李皓陈兴平
- 关键词：法昔洛韦生殖器疱疹复发性前驱症状
- 去唾液酸糖蛋白受体特异性单链抗体的优化表达及亲和常数的测定被引量：5
- 2006年
- 目的:表达及纯化抗去唾液酸糖蛋白受体(ASG-PR)的单链抗体的可溶性,并测定其亲和常数。方法:用噬菌体C1克隆感染E.coliHB2151,挑取单个菌落接种于2×TY培养基中,于37℃震荡培养过夜。将培养物作1∶100稀释并转种后,用终浓度为0.25、0.5、1.0mmol/L的IPTG,分别在37℃、25℃和20℃下诱导表达过夜。取其培养上清,用饱和硫酸铵沉淀后,以120g/LSDS-PAGE分析。另外,将饱和硫酸铵沉淀物用30mLPBS重新溶解、透析除盐后,用Ni2+螯合柱进行纯化,再以120g/LSDS-PAGE鉴定纯化scFvC1的纯度。用非竞争酶免疫法测定scFv的亲和常数。结果:用0.5mmol/LIPTG在25℃诱导过夜,表达的scFvC1的量较多,其相对分子质量(Mr)约为28000,以可溶性的形式存在于培养基中。通过Ni2+亲和柱纯化后scFvC1的纯度在95%以上,产量约为0.8mg/L。scFv的亲和常数为(2.31±0.36)×10-7mol/L。结论:以筛选的C1噬菌体感染E.coliHB2151后可表达低亲和力的可溶性scFv,对肝癌的基因治疗具有潜在的应用价值。
- 王炜煜易继林邓云华司进王从俊李翔曹利民
- 关键词：去唾液酸糖蛋白受体单链抗体
