郑晓勇
- 作品数：4 被引量：24H指数：2
- 供职机构：上海医科大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：中华医学基金会基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人可溶性TRAIL蛋白诱导多种肿瘤细胞的凋亡被引量：14
- 2000年
- 目的 探讨原核表达的凋亡激活因子———人可溶性TRAIL蛋白诱导多种肿瘤、尤其实体瘤细胞凋亡的作用及与p5 3突变的关系。方法 PCR扩增人TRAIL密码子 114 2 81,JFl12 5大肠杆菌表达 ,复性并纯化该可溶性片段。电镜观察与荧光活化细胞分类器 (FACS)定量分析纯化产物对多种恶性肿瘤细胞的诱导凋亡作用。免疫组织化学 (ABC法 )分析各细胞株p5 3的突变。结果 人可溶性TRAIL蛋白经多步纯化后纯度达 90 %以上 ,蛋白可溶性好。在人乳腺癌MCF 7细胞 ,宫颈癌Hela细胞 ,肝细胞肝癌SMMC772 1、BEL740 2、740 5BEL细胞 ,肺巨细胞癌 95C细胞中观察到人可溶性TRAIL蛋白的诱导凋亡作用。上述细胞株p5 3免疫组织化学检测均呈阳性。结论 原核表达产物与真核表达产物一样具有明显诱导多种肿瘤细胞凋亡的活性。
- 郑晓勇官孝群林芷英宋后燕汤钊猷
- 关键词：肿瘤脱噬作用P53TRAIL蛋白细胞凋亡
- 选择性杀癌细胞物:TRAIL/Apo-2L
- 1999年
- 研究发现了一种能选择性诱导癌细胞发生自杀的蛋白-TRAIL,肿瘤细胞对它比正常细胞敏感得多,且其作用独立于P53。关于其选择性杀伤作用机制的研究,近期取得了突破性进展。现将其蛋白、基因及其受体的结构、分布及作用机制进行综述。
- 郑晓勇
- 关键词：TRAIL受体基因治疗肿瘤杀伤
- 人可溶性APO2L/TRAIL基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2000年
- 目的 利用基因工程技术原核表达人可溶性APO2L并复性纯化成具生物活性形式。方法 用PCR方法扩增APO2LcDNA(密码子 1 1 4～ 2 81 )并克隆至表达载体 ,重组体转化大肠杆菌JF1 1 2 5摇瓶发酵 ,筛选高表达克隆于发酵罐经温度诱导表达。经盐酸胍溶解 ,空气氧化法稀释复性 ,超滤 ,Q SepharoseFF阴离子交换柱层析等方法纯化人可溶性APO2L。利用流式细胞术检测产物对细胞的诱导凋亡活性。结果 表达产物约占菌体总蛋白质的 2 0 %并在菌体内形成了包涵体 ,SDS PAGE鉴定表达产物相对分子质量约 2 1 0 0 0。经上述纯化蛋白质纯度达 90 %以上 ,蛋白质可溶性好。观察到人可溶性APO2L诱导人宫颈癌HeLa细胞发生明显的凋亡。
- 郑晓勇官孝群林芷英宋后燕
- 关键词：克隆大肠杆菌细胞凋亡宫颈癌
- 原位微环境与nm23-H1、H-rasmRNA量及肝癌肝内转移的关系被引量：10
- 1998年
- 目的研究原发性肝癌原位微环境与转移相关基因ｎｍ２３－Ｈ１、Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ量及肝癌肝内转移的关系。方法对２５例肝细胞肝癌患者手术切除标本，采用ＲＴ－ＰＣＲ法定量检测其ｎｍ２３－Ｈ１、Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ量；用免疫组化方法分析微环境之重要因素微血管密度（ＭＤＶ）及癌细胞增殖情况指标－增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）。结果伴肝内转移癌组织其ＭＤＶ（Ｐ＝０．００５）、ＰＣＮＡ（Ｐ＜０．０１）指标明显高于不伴肝内转移组，其ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ量则相反（Ｐ＜０．０１），Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ量相差不显著（Ｐ＞０．０５）；ＭＤＶ与ＰＣＮＡ指数呈正相关（Ｐ＜０．０１），ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ量与ＰＣＮＡ指数呈负相关（Ｐ＜０．０５）。结论肝癌转移前有一明显的微环境不佳及癌细胞增生受抑制的过程。提示肝癌生长中其原位微环境不良在转移发生中起重要的选择性作用；ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ量可反映高转移潜能癌细胞的优势化生长情况。
- 郑晓勇林芷英刘银坤冯晓黎
- 关键词：肝肿瘤微环境增殖细胞核抗原
