陶好霞
- 作品数:70 被引量:70H指数:4
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 幽门螺杆菌ureB及ureB-hspA融合基因在减毒鼠伤寒沙门菌中的表达及小鼠的免疫应答被引量:4
- 2003年
- 目的 构建H .pyloriureB单基因及ureB和hspA融合基因的减毒鼠伤寒沙门菌疫苗候选株 ,并进行初步的免疫原性分析。方法 将H .pyloriureB单基因及ureB和hspA融合基因分别克隆入pTrc99A asd质粒的多克隆位点之内。挑取单菌落质粒鉴定后 ,分别将其电击经中间宿主X3730转入最终宿主X4 0 72 ,SDS PAGE和Westernblot检测蛋白表达。将疫苗候选株经口或鼻免疫BALB c小鼠。结果 疫苗候选株能够分别表达出相对分子质量 (Mr)为 6 4× 10 3的UreB蛋白及 77× 10 3的UreB HspA融合蛋白。在免疫BALB c小鼠的肠液和血清中可以分别检测到针对H .pylori的特异性分泌型IgA和IgG抗体。结论 构建了能够表达幽门螺杆菌UreB及UreB HspA融合蛋白的活菌疫苗候选株 ,为探索制备H .pylori口服活菌疫苗奠定了基础。
- 李勣刘纯杰李淑琴陶好霞刘秀丽张兆山
- 关键词:幽门螺杆菌
- 7TD1细胞及其克隆对IL-6的反应性和依赖性被引量:1
- 1996年
- 比较了基础所和北医大提供的两株7TD1细胞。选择北医大细胞株进行克隆,筛选出对IL-6增殖反应性和依赖性较强的3株细胞(7TD1 MC1、7TD1 MC4、7TD1MC5)。其中,7TD1 MC5细胞的反应曲线呈典型的“倒S”形,对IL-6有很好的反应性和依赖性。MTT比色法显示了与~3H-TdR掺入法一致的结果,采用7TD1 MC5细胞及MTT比色法测定IL-6生物活性,可减少仪器测试的费用和避免放射性污染。确定了培养基中IL-6的最适浓度(2ng/ml)。细胞传代培养和冻存6个月,7TD1 MC5细胞对IL-6的反应性和依赖性均无明显变化。
- 巩新边疆薛冲陶好霞孙澎
- 关键词:克隆IL-6反应性
- 重组人白细胞介素6 部分理化生物学性质的鉴定
- 1999年
- 目的:对 N 端缺失 5 个氨基酸的重组人白细胞介素 6(recom binant hum an interleukin6,rh I L6)纯品的理化生物学性质进行分析鉴定。方法:用蛋白序列自动分析仪、紫外及可见光扫描仪、 S D S聚丙烯酰胺凝胶电泳、溴化氰裂解、等电聚焦电泳、蛋白质印迹法和 M T T 比色法分别对rh I L6 缺失体 N 端氨基酸序列、紫外及可见光吸收光谱、相对分子质量、肽图、等电点(p I)、抗原特异性及生物学活性进行了分析鉴定。结果:与天然 I L6 相比,rh I L6 N 端缺失了 5 个氨基酸;在276 nm 波长处有一个特异的蛋白吸收峰;相对分子质量为 21 487 ;裂解的肽段分布在理论值的肽段分布范围之内;p I为6.1;能与兔抗人 I L6 抗体特异性结合;比活性达2.05×1011 I U/g。结论:缺失 5 个氨基酸的 rh I L6 生物学活性与天然 I L6
- 陶好霞边疆孙澎巩新薛冲
- 关键词:白细胞介素6分子量等电点免疫印迹RHIL-6
- 炭疽芽孢杆菌突变株AP431与A16R的生物特性比较研究被引量:1
- 2016年
- 目的系统评价所构建的炭疽芽孢杆菌突变株AP431的生物特性,并与出发菌株A16R对比,为后续研究提供数据基础。方法绘制生长曲线比较突变株AP431和A16R的生长性能;糖酵解实验分析二者生化特性的差异;免疫印迹和流式细胞术检测菌株的保护性抗原PA蛋白表达情况;连续传代共培养分析其竞争关系;过氧化氢灭菌实验和抑菌圈实验分析菌株对活性氧的耐受性;以C57小鼠为动物模型比较二者的毒力大小。结果与A16R相比,突变株AP431生长稍慢,生化特性基本一致。突变株AP431的PA蛋白在S层呈现表达良好,并且在培养基上清、细胞内和外膜上的表达水平均比A16R高。共培养实验发现AP431的生存竞争能力明显减弱。过氧化氢敏感实验表明,突变株AP431对过氧化氢的敏感性比A16R显著增高。动物毒力实验结果显示,分别在两种注射剂量下,突变株的致死率显著降低,与A16R组相比差异显著(P<0.01)。结论与A16R相比,炭疽菌突变株AP431保护性抗原PA表达水平明显提高,毒力明显降低,可作为新的疫苗候选株进行进一步研究。
- 聂伯尧苏润雨陶好霞袁盛凌刘纯杰杨百亮王艳春
- 关键词:生物特性毒力
- 一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用
- 本发明公开了一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用。该抗原表位多肽,其氨基酸序列为序列表中序列31。它的编码基因序列为序列表中序列22。本发明提供的抗原表位多肽能刺激机体产生抗幽门螺杆菌保护性免疫反应,从而增强对幽门...
- 刘纯杰王艳春邱炎陶好霞
- 文献传递
- Cre-LoxP系统在炭疽芽胞杆菌基因敲除中的应用及eag基因的敲除被引量:4
- 2009年
- 将Cre-LoxP系统应用于Bacillus anthracis中并成功敲除eag基因.以B.anthracis基因组为模板扩增得到上下游同源臂,联合两端带有LoxP位点的壮观霉素抗性基因片段构建好同源重组载体,转化B.anthracisAP422,通过一系列筛选得到带有抗性标记的重组菌.然后,通过转入Cre重组酶表达质粒,去除抗性标记,得到eag基因缺失的重组菌,并在DNA水平、RNA水平和蛋白质水平进行了系统的鉴定.最终建立了Cre-LoxP系统在B.anthracis中的应用方法,并成功敲除eag基因.
- 王艳春姜娜展德文邱炎袁盛凌陶好霞王令春张兆山刘纯杰
- 关键词:炭疽芽胞杆菌同源重组基因敲除
- 能在芽孢表面展示PA<Sub>20</Sub>蛋白的炭疽芽孢杆菌及其应用
- 本发明公开了一株能在芽胞表面展示PA<Sub>20</Sub>蛋白的炭疽杆菌株及其应用。该菌株,是将pagA<Sub>20</Sub>基因插入到炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)芽胞蛋白bclA基因未端...
- 展德文王艳春刘纯杰陶好霞袁盛凌王令春王芃
- 文献传递
- 炭疽芽孢杆菌保护性抗原在大肠杆菌中的表达及纯化
- 2005年
- 按照炭疽芽孢杆菌保护性抗原(PA)基因成熟肽编码序列设计引物,从炭疽杆菌pOX1质粒中扩增出PA基因片段,将该片段定向插入到原核表达载体pET-28a中,获得了pET-PA原核表达重组质粒,限制性酶切分析和DNA序列测定均证实该克隆插入片段为PA基因的成熟肽编码序列。将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,重组蛋白在大肠杆菌表达系统中获得了高效表达;Western印迹分析表明表达产物具有良好的免疫学活性。
- 展德文刘向昕陶好霞王令春张兆山
- 关键词:炭疽杆菌保护性抗原
- 一种预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的疫苗
- 本发明公开了一种预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的疫苗。该疫苗的活性成分为HP0762蛋白,所述HP0762蛋白的氨基酸序列如GenBank AccessionNo.ACM46115.1所示。首先通过反向疫苗学的方法从幽门螺...
- 刘纯杰王涛陶好霞王令春袁盛凌展德文王芃王艳春
- 文献传递
- 幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用
- 本发明公开了一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用。该抗原表位多肽,其氨基酸序列为序列表中序列37。它的编码基因序列为序列表中序列28。本发明提供的抗原表位多肽能刺激机体产生抗幽门螺杆菌保护性免疫反应,从而增强对幽门...
- 刘纯杰王艳春邱炎陶好霞