佘鸣
- 作品数:16 被引量:18H指数:3
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划天津市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- CD3/CD22双特异性单克隆抗体的研制
- 2001年
- 佘鸣沈德诚孙同哲李洪钊白金芬黄丽华陈晓钎周立山芝芳张金香郭桂庆廖晓龙
- 关键词:双特异性单克隆抗体双功能抗体
- CD3/CD19双特异性单克隆抗体的制备、鉴定及其再导向的研究被引量:3
- 1998年
- 目的制备CD3/CD19双特异性单克隆抗体(BsAb)并研究其生物学作用。方法采用杂交-杂交瘤技术制备BsAb,以双亚类ELISA和细胞结合试验确证BsAb的存在,再用51Cr释放试验证实BsAb的再导向细胞毒效应。结果获得3株CD3/CD19四源杂交瘤细胞,其中1株已成为稳定分泌CD3/CD19BsAb的四源杂交瘤细胞株。细胞毒试验表明CD3/CD19BsAb上清、CD3/CD19纯化抗体以及CD3/CD19化学交联BsAb都能增强CD3激活杀伤细胞(CD3AK细胞)对Nalm-6靶细胞的杀伤作用(P<0.05~0.001)。结论CD3/CD19BsAb具有显著的再导向激活T细胞杀伤特异肿瘤靶细胞的功能,提示该BsAb有临床应用的潜在价值。
- 陈晓钎沈德诚孙同哲白金芬黄丽华佘鸣山芝芳李洪钊张金香刘俊霞郭桂庆周立
- 关键词:双特异性单克隆抗体CD3CD19
- 抗CD_3人/鼠嵌合抗体的研究
- 1995年
- 杨治华刘向阳田海梅王李以莞沈德诚段世利佘鸣
- 关键词:抗体嵌合抗体
- 抗CD34单克隆抗体HI273的制备和鉴定
- 2000年
- 佘鸣沈德诚廖晓龙黄丽华周立李洪钊张金香郭桂庆陈辉树
- 关键词:CD34单克隆抗体
- KGla细胞免疫小鼠脾细胞scFv噬菌体展示文库的构建及其表达被引量:9
- 2000年
- 目的 :用噬菌体展示技术构建KGla免疫小鼠的脾细胞scFv表达文库。方法 :用人髓系白血病细胞系KGla细胞免疫小鼠 ,取其脾细胞 ,RT PCR扩增VH和Vκ基因并克隆入噬菌体展示表达载体 ,构建scFv文库 ,并测定文库的库容量和BstN1酶切单个克隆分析文库的多样性。用KGla作为固相抗原 ,进行四轮吸附 洗脱 富集的筛选 ,SDS PAGE检验筛选后文库scFv的呈示表达。结果 :文库的库容为 3× 10 6cfu ,单个克隆的BstN1Ⅰ酶切图谱显示多样 ,提示文库的容量和多样性均能满足进一步筛选分离目的基因的需要 ,筛选后的文库能很好地表达外源scFv。结论
- 隋建华宋增璇佘鸣张丽艳沈德诚韩忠朝
- 关键词:噬菌体展示抗体库SCFV白血病
- 清除杂交瘤细胞支原体污染几种方法的比较被引量:3
- 1999年
- 佘鸣孙同哲沈德诚
- 关键词:杂交瘤细胞细胞培养
- 抗人CD3人/鼠嵌合抗体基因的构建
- 1995年
- 为了降低鼠源抗人CD3单抗的免疫原性,增加其在人体内的生物活性及治疗作用,使该抗体能更广泛更有效地长期多次用于人体治疗肿瘤、器官移植排斥反应及自身免疫性疾病.本文采用PCR技术从分泌抗CD3单抗的杂交瘤细胞HIT3a的mRNA中分离克隆了抗体的轻重链可变区基因的cDNA.以此轻重链可变区cDNA为特异探针从HIT3a基因文库中分离带有调控序列的功能性轻重链可变区基因;并将其插入到含有人κ轻链及人γ1重链恒定区基因的哺乳动物表达载体中成功地构建了抗人CD3人/鼠轻重链嵌合抗体基因,为研制人抗CD3人/鼠嵌合抗体完成了关键性的第一步.
- 杨治华李以莞沈德诚田海梅刘向阳刘宝印李洁段世利佘鸣
- 关键词:抗人CD3嵌合抗体肿瘤抗CD3单抗重链可变区DNA
- 抗人CD3人/鼠嵌合抗体的表达及特性
- 1995年
- 将从HIT3a基因库分离克隆的功能性抗CD3轻重链可变区基因插入含有人κ轻链γ1重链恒定区基因的哺乳动物表达载体中,构建了抗CD3嵌合抗体基因.用Lipofectin将抗CD3人/鼠嵌合轻重链基因共转染SP2/O细胞表达,获得稳定传代和稳定表达抗CD3嵌合抗体的转染杂交瘤细胞株C-HIT3a.ELISA、免疫荧光和PCR实验证实嵌合抗体与原鼠CD3单抗有相同的特异性和亲和性.体外生物活性的初步分析表明嵌合抗体与鼠CD3单抗对人的PBMC细胞的增殖有相同类型的作用.高剂量抗体抑制人T细胞的增殖,低剂量显示明显的激活增殖作用.当与IL-2联合应用其激活增殖作用增加20倍.细胞毒实验表明嵌合CD3抗体或由该抗体介导的免疫活性细胞(CD3-AK)对多种肿瘤细胞有明显的杀伤活性,较单用IL-2或单用LAK细胞其杀伤活性增加25倍.
- 杨治华刘向阳田海梅李洁李以莞沈德诚佘鸣
- 关键词:嵌合抗体CD3单抗抗C抗人CD3杀伤活性分离克隆
- 拮抗型抗hTNF-α单克隆抗体的筛选和活性鉴定
- 2010年
- 目的制备和筛选拮抗型人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α)单克隆抗体(McAb)并检测其活性,为临床靶向治疗提供理论依据。方法用经典免疫方法获得抗hTNF-αMcAb,经接种于小鼠腹腔后获得腹水,采用硫酸铵沉淀和蛋白G亲和层析法纯化得到纯度>95%的抗hTNF-αMcAb,采用ELISA方法测定效价、抗体亚型和亲和力,MTT法测定抗体阻断hTNF-α对L929细胞的细胞毒作用和筛选拮抗型抗hTNF-αMcAb,流式细胞仪法测定抗体阻断hTNF-α诱导L929细胞凋亡的作用。结果获得1株能稳定分泌抗hTNF-αMcAb的杂交瘤细胞株XB10,分泌的抗体亚型为IgG2b;该抗体能高亲和性与hTNF-α结合,特异性阻断hTNF-α对L929细胞的细胞毒作用和抑制细胞凋亡,并呈一定剂量依赖性。结论成功制备能稳定分泌拮抗型抗hTNF-α的McAb的杂交瘤细胞株,其分泌的抗体对hTNF-α有特异性拮抗作用,为今后研制临床治疗型抗hTNF-α的基因工程抗体奠定了实验基础。
- 黄蕊马莉谷岳谢印良佘鸣邵晓枫熊冬生刘汉芝许元富
- 关键词:人肿瘤坏死因子-Α单克隆抗体拮抗剂
- 一个抗造血祖细胞单克隆抗体能特异性抑制IL3生物活性
- 1992年
- HI98(又称HIM_1,IgM)是目前国际上发 现唯一能抑制人IL_3与相应靶细胞结合的髓系单克隆抗体(单抗)。本文研究了此单抚对IL_3刺激人造血祖细胞增殖分化的作用,结果发现HI98可抑制IL_3诱导的BFU-E和CFU-GM集落形成,最大抑制率分别为55%和49%,但对CFU-E的生长无影响。对GM-CSF诱导的BFU-E和CFU-GM也无作用。用HI98单抗包被的Sepharose微球进行IL_3免疫吸附清除实验证明,其抑制作用不是抗体与IL_3直接结合的结果。本文还对HI98单抗识别的抗原分子与IL_3受体的关系进行了讨论。
- 陈璋沈德诚杨希峰白金芬孙同哲汤美华佘鸣苏月来Stephen C.Peiperkenneth S.Zuckerman
- 关键词:造血祖细胞单克隆抗体白细胞介素