刘华
- 作品数：5 被引量：21H指数：3
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛病毒性腹泻病病毒NS3表位串联蛋白表达及抗体间接ELISA方法的建立被引量：12
- 2011年
- 为建立一种有效的牛病毒性腹泻病病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)抗体检测方法,作者将BVDVNS3蛋白2个抗原表位的编码核酸序列进行串联,构建重组表达载体pET-30a-EXnN,并在原核表达系统中表达了重组蛋白。选取包含12个表位肽的重组蛋白(r-BVDV-EX6N)作为包被抗原建立NS3蛋白抗体间接ELISA方法。该方法的特异性和稳定性良好,与2种商品化试剂盒的符合率分别为96.05%和78.95%。试验结果表明建立的ELISA方法可用于BVDV NS3蛋白抗体的检测。
- 贾莹李岩尹鑫温凯刘华张文龙王君伟
- 关键词：BVDVNS3蛋白间接ELISA
- 牛病毒性腹泻病毒VEDEVAC株E2蛋白线性表位区的筛选
- 为了筛选牛病毒性腹泻病毒E2 B细胞线性表位区域,本研究分段克隆了BVDVVEDEVAC株E2基因,并利用pET原核表达系统,分段表达目的蛋白,表达的蛋白经过纯化后,利用western blot方法筛选与感染血清反应的片...
- 李岩贾莹温凯刘华王君伟
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E2蛋白抗原性
- 牛病毒性腹泻病毒基因Ⅱ型HLJ-10分离株全基因组克隆及其序列特征分析被引量：4
- 2012年
- 为研究牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的分子特征,本研究参考GenBank中登录的BVDV基因Ⅱ型病毒株全基因组序列,设计多对引物,通过RT-PCR方法,对一株分离自某商品化血清中的BVDV分离株HLJ-10全基因组进行分段克隆及序列测定,获得了该分离株的全基因组序列。生物信息学分析表明,该分离株为BVDV基因Ⅱ型,全长12 284 nt,编码区为11 694 nt,共编码3 897个氨基酸,5'和3'非编码区分别为385 nt和205 nt。与其它BVDV参考株序列比对分析表明,HLJ-10与SH-28和KZ91CP进化关系较密切,预测该分离株含有22个潜在糖基化位点,氨基酸差异性分析表明E2蛋白的氨基酸序列在瘟病毒属中变异性较大。
- 刘华付培芬李岩温凯贾莹刘晓玫张海丽商云鹏高明春马波张文龙王君伟
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒基因组
- 1型鸭肝炎病毒E53株VP1基因在昆虫细胞中的表达及产物分析
- 2012年
- 根据1型鸭肝炎病毒E53株基因组序列设计并合成一对特异性引物,RT-PCR扩增VP1基因,将其定向克隆至pFastBacTMHTB载体,转化至DH10BacTM感受态细胞中,蓝白斑筛选获得重组穿梭质粒rBacmid-VP1,重组质粒在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒。结果表明VP1蛋白在昆虫细胞中获得表达,表达产物能够与兔抗1型鸭肝炎病毒VP1蛋白多抗血清和鸭肝炎病毒阳性血清发生特异性反应。在昆虫细胞中表达VP1蛋白为VP1功能的研究及鸭肝炎病毒抗体的检测提供了物质材料。
- 付培芬刘华刘琰母晓宇董井泉刘晓玫马波王君伟
- 关键词：VP1基因昆虫细胞
- 东北地区规模化奶牛场牛病毒性腹泻/黏膜病血清学调查被引量：6
- 2013年
- 为了解东北地区牛病毒性腹泻/黏膜病病毒(BVDV)的流行情况,本研究采用间接ELISA试验与套式RT-PCR分型检测方法对东北地区19个规模化奶牛场的1 198份血清进行了BVDV的抗体与核酸检测。结果表明,BVDV在东北地区呈散发性流行,抗体阳性率为23.5%,各奶牛场抗体阳性率在0～40%之间;BVDV核酸阳性的奶牛场均包括在抗体阳性的奶牛场中,并且均为BVDV I型。结果提示,东北地区大部分奶牛场中存在BVDV污染,并且可能存在有持续性感染牛,应采取相应的净化措施对该病进行控制。
- 商云鹏刘华张海丽高明春张文龙王君伟
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒间接ELISART-PCR血清学调查
