姜旭淦
- 作品数：74 被引量：276H指数：10
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- PCR-ELISA检测大鼠卡氏肺孢子虫DNA的研究被引量：3
- 2005年
- 目的 建立卡氏肺孢子虫 (P .c )DNA的聚合酶链反应 酶联免疫吸附测定 (PCR ELISA)方法 ,并探讨其应用价值。 方法 实验组患卡氏肺孢子虫肺炎的SD大鼠和Wistar大鼠各 2 8只 ,采用PCR法扩增大鼠肺组织DNA和支气管肺泡灌洗液 (BALF)DNA ,用PCR ELISA检测其扩增产物。 2 8只患病大鼠分别制作肺组织印片及BALF涂片 ,姬姆萨 (Giemsa)染色镜检 10 0个视野中有无P .c包囊 (或滋养体 ) ,与PCR ELISA检测扩增产物结果比较。 结果 两种方法检测大鼠肺组织DNA阳性率及BALFDNA阳性率 ,结果相同 ,均分别为 96 4% (2 7/2 8)和10 0 % (2 8/2 8)。Giemsa染色镜检P .c包囊 (或滋养体 ) ,结果为阳性的大鼠 ,PCR ELISA检测扩增产物结果也均为阳性。阴性对照组 ,两种大鼠的肺组织和BALF各 10份标本 ,均有 1只大鼠阳性。 结论 PCR ELISA检测大鼠卡氏肺孢子虫DNA ,敏感性较高 ,特异性较好 ,操作简便 ,具有实用价值。
- 陈盛霞姜旭淦仇锦波徐会娟帅连云
- 关键词：BALF卡氏肺孢子虫PCR-ELISA染色镜检DNA
- 临床革兰阴性杆菌整合子携带情况及其与耐药性的相关性分析被引量：11
- 2019年
- 目的研究临床分离的4种革兰阴性杆菌耐药性与整合子的关系。方法收集江苏大学附属医院2017年10月—12月临床分离的肺炎克雷伯菌56株、大肠埃希菌49株、铜绿假单胞菌45株及鲍曼不动杆菌48株,Vitek 2 Compact全自动鉴定和药敏分析仪及K-B法进行药敏试验;多重PCR法检测细菌携带Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合子情况,并比较细菌耐药性与携带整合子之间的关系。结果 4种革兰阴性杆菌中共有37.37%的菌株检出Ⅰ类整合酶基因,其中鲍曼不动杆菌的阳性率为54.17%,大肠埃希菌的阳性率为46.94%,肺炎克雷伯菌的阳性率为39.29%,铜绿假单胞菌的阳性率为6.67%,所有菌株均未检测到Ⅱ类和Ⅲ类整合酶基因。4种革兰阴性杆菌中,铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌携带Ⅰ类整合子菌株对部分药物的耐药率较未携带整合子菌株差异有统计学意义,而携带Ⅰ类整合子的鲍曼不动杆菌的耐药率较未携带菌株差异均无统计学意义。结论Ⅰ类整合子在镇江地区临床分离革兰阴性杆菌中普遍存在,且与铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性存在一定的相关性。
- 周亚玲陈红朱丽华段秀杰臧福平高悦吴亮姜旭淦陈盛霞阴晴
- 关键词：革兰阴性杆菌整合子耐药性
- HbA_(1c)和HbA_0的分离纯化
- 2013年
- 目的从健康人红细胞分离并纯化血红蛋白A 1c(HbA1c)和血红蛋白A0(HbA0)。方法采集健康人全血,分离红细胞并制备溶血液,采用弱酸阳离子交换层析法分离HbA1c和HbA0,并用硼酸琼脂糖亲和层析法分别纯化。结果健康人红细胞溶血液采用弱酸阳离子交换层析法手工装柱分离提取HbA1c和HbA0峰值部分,高效液相色谱(HPLC)法测定纯度分别为79.78%和97.42%;再经硼酸琼脂糖亲和层析分别纯化,HbA1c纯度可达94.3%,HbA0纯度可达99.7%。结论单一的离子交换方法分离糖化Hb并不理想,必须与亲和层析结合,才能得到较高纯度HbA1c和HbA0。
- 涂国华王碧筠朱云娇秦瑛姜旭淦
- 关键词：离子交换树脂
- 可溶性Ⅱ型胶原蛋白提取纯化条件的研究
- 目的:优化实验条件,建立提取纯化可溶性Ⅱ型胶原蛋白(soluble collagen typeⅡ,SCⅡ)的可靠方法。方法:选择鸡胸箭突软骨为提取原料,用盐酸胍去除蛋白多糖,对胃蛋白酶的消化方式、氯化钠盐析浓度、DEAE...
- 姜旭淦陈盛霞王卉放吴亮许化溪
- 关键词：类风湿性关节炎软骨蛋白多糖
- 文献传递
- 毛细管电泳技术及其在生物分子研究中的应用进展被引量：5
- 2004年
- 姜旭淦陈盛霞
- 关键词：HPCE生物分子高效液相高效毛细管电泳毛细管电泳技术
- 分子生物学实验开放性教学改革探索
- 本文就我校面向本科生开设的分子生物学实验的改革提出设想,提出开放性实验教学模式,并客观分析了改革初期将要面临的诸多困难,提出改进方案.
- 周丽萍王卉放姜旭淦郑铁生徐顺高马洁
- 关键词：开放性教学分子生物学实验教学教学改革
- 文献传递
- 刚地弓形虫RH株速殖子在HeLa细胞系体外培养的实验观察被引量：12
- 2008年
- 目的建立稳定高效的刚地弓形虫RH株速殖子(以下简称弓形虫速殖子)体外培养模型。方法①将HeLa细胞(1×104个)接种置于细胞培养皿内底部的盖玻片,12h后将纯化的弓形虫速殖子接种于细胞培养皿(1×104个/皿),继续培养0.5～96h,观察弓形虫速殖子在HeLa细胞内增殖情况;②将纯化的弓形虫速殖子接种于HeLa细胞后分为2组,一组于37℃分别培养24～120h后,移入25℃培养120h;另组于37℃培养48h后,移入25℃分别培养72～168h,观察不同温度和时间对弓形虫速殖子产率和活虫率的影响;③当培养的HeLa细胞80%发生细胞融合时更换速殖子培养液,同上法12h后接种纯化的弓形虫速殖子进行培养,当80%HeLa细胞被感染增殖的弓形虫速殖子涨破时,收集、计数弓形虫速殖子,并用其感染(3×106个/瓶)新的HeLa细胞,观察其连续传代情况;④每隔5代取弓形虫速殖子,腹腔接种昆明小鼠(3×106个/只),观察小鼠存活时间、评价该体外培养条件对弓形虫速殖子毒力的影响。结果接种弓形虫速殖子96h后HeLa细胞均被感染及涨破,培养弓形虫速殖子30代(3～4d为1代)增殖稳定,每代获得弓形虫速殖子1×107～5×107个,增殖5～20倍。各代弓形虫速殖子对昆明小鼠的平均致死时间为5.80～6.40d,毒力未见减弱(P>0.05)。HeLa细胞接种弓形虫速殖子,于37℃培养72h后,移至25℃培养120h,其产率高达40倍以上,活虫率为90%以上,仅残留极少量Hela细胞。结论刚地弓形虫RH株速殖子可在HeLa细胞中增殖并长期稳定传代。
- 吴亮陈盛霞李琳婕车飞虎邓红艳姜旭淦
- 关键词：刚地弓形虫速殖子HELA细胞体外培养
- 基于hxgprt^-缺陷的弓形虫顶质体荧光突变株的构建被引量：1
- 2012年
- 目的:构建绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记顶质体的弓形虫突变株,建立检测顶质体的简便方法。方法:扩增顶质体酰基载体蛋白(acyl carrier protein,ACP)基因并构建转染载体pHX-ACP-GFP,转入弓形虫hxgprt-株速殖子,经霉酚酸和黄嘌呤筛选荧光突变株。激光共聚焦显微镜和蛋白质印迹技术检测突变株ACP-GFP融合蛋白的表达。结果:通过霉酚酸和黄嘌呤筛选,可以在1周内获得突变株。激光共聚焦显微镜下观察到ACP-GFP融合蛋白聚集于顶质体,用抗GFP抗体能检测出ACP的转运肽型和成熟型蛋白。结论:顶质体荧光突变株可清晰标记出顶质体的位置,借助GFP标签即可检测融合蛋白的表达。
- 吴亮姜旭淦李礼鞠爱萍沈进傅行礼陈盛霞周红
- 关键词：弓形虫突变株绿色荧光蛋白
- 刚地弓形虫绿色荧光蛋白突变株的研究
- 目的:构建稳定表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的弓形虫突变株,探讨通过虫体荧光检测宿主细胞感染率的方法。方法:HeLa细胞中培养弓形虫RH株速殖子,待虫体涨破细胞后离心收集虫...
- 吴亮姜旭淦傅行礼逯兆喜涂国华李礼陈盛霞
- 关键词：弓形虫突变株绿色荧光蛋白荧光显微镜流式细胞仪
- 文献传递
- 刚地弓形虫RH株速殖子外泌体的分离与鉴定被引量：1
- 2020年
- 目的:分离与鉴定刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株速殖子外泌体。方法:收集弓形虫速殖子与人结肠癌SW480细胞共培养上清液,经离心、过滤,采用基于聚合物沉淀技术的试剂盒法分离外泌体;透射电镜观察外泌体形态特征,纳米颗粒跟踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)检测外泌体粒径大小,蛋白质印迹法检测外泌体经典标志分子CD63、HSP70以及弓形虫特异蛋白表面抗原1(surface antigen 1,SAG1)、棒状体蛋白16(rhoptry protein 16,ROP16)、ROP18和致密颗粒蛋白1(dense granule protein 1,GRA1)。结果:从弓形虫与细胞共培养上清液中分离出囊泡样物质,其外形为圆形,有完整的膜结构,直径为30~150 nm;表达外泌体特异性蛋白CD63、HSP70;检测出弓形虫特异性蛋白SAG1、ROP16、ROP18和GRA1。结论:从弓形虫速殖子与SW480细胞共培养上清液中获得弓形虫外泌体。
- 凌薇宋玉洁汪慧朱昱蓉袁琳马雨润程芳姜旭淦陈盛霞
- 关键词：刚地弓形虫外泌体共培养
