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高尔基体蛋白磁性免疫检测方法的建立被引量：1: 2013年; 高尔基体蛋白73（Golgi protein73。GP73）被认为是目前最具潜力的肝细胞癌（hepatocellular carci．noma，HCC）的早期诊断标志物之一。我们于2012年11月至2013年4月利用本实验室表达的Gfy73抗原、抗GP73的多克隆抗体和单克隆抗体，建立了GP73磁性免疫检测方法．报告如下。; 刘芳官月平张爱英王安娜姜涛谢立刘凯陈德喜; 关键词：高尔基体磁性诊断标志物单克隆抗体多克隆抗体肝细胞癌

HBsAg阳性供肝和HBcAb阳性供肝在肝移植中的应用被引量：9: 2012年; 目的探讨乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性和乙型肝炎核心抗体（HBcAb）阳性供肝对肝移植受者近期乙型肝炎复发率和移植物及受者存活时间的影响。方法回顾分析2004年6月至2011年12月间单中心长期随访的387例肝移植受者的资料，其中HBsAg阳性供肝9例，HBcAb阳性供肝50例，乙型肝炎病毒（HBv）阴性供肝328例。采用乙型肝炎免疫球蛋白（HBIG）＋抗病毒药物的联合方案预防复发。比较3组受者术后近期HBV再感染（或移植肝HBV感染）及受者和移植肝存活情况。结果接受HBsAg阳性供肝者术后HBsAg持续为阳性。接受HBcAb阳性供肝者中，1例乙型肝炎再感染。接受HBV阴性供肝者中，5例出现HBsAg阳性（其中乙型肝炎病毒耐药复发2例，非乙型肝炎相关性疾病术后移植肝HBV感染3例）。接受HBsAg阳性供肝者的1、3、5年受者累积存活率为100％、86％和43％，接受HBcAb阳性供肝者的1、3、5年受者累积存活率为87％、79％和57％，接受HBV阴性供肝者的1、3、5年受者累积存活率为87％、80％和79％（Log-rank=1．287，P=0．525）。接受HBsAg阳性供肝者的1、3、5年移植物累积存活率为100％、86％和43％，接受H13cAb阳性供肝者的1、3、5年移植物累积存活率为85％、77％和56％，接受HBV阴性供肝者的1、3、5年移植物累积存活率为86％、79％和77％（Log-rank=1．288，P=0．525）。随访期内均未出现因乙型肝炎复发或HBV感染所致的移植肝功能丧失和受者死亡。结论在采取有效的抗病毒治疗措施的情况下，HBcAb阳性供肝对移植物及受者存活时间无明显影响。对于危重患者，可以考虑采用HBsAg阳性供肝的肝移植。; 姜涛卢实春赖威王孟龙刘源曾道炳李传云武聚山段斌炜王璐代传宙李宁; 关键词：肝移植组织供者

非乙肝相关性疾病肝移植术后新肝乙型肝炎病毒感染的临床分析: 【目的】总结非乙肝相关性疾病肝移植术后新肝感染乙型肝炎病毒(HBV)的临床特点,探讨其预防策略。【方法】回顾分析2004年6月至2011年12月首都医科大学附属北京佑安医院肝胆外科暨肝移植中心510例肝移植术中,应用HB...; 姜涛卢实春赖威刘源

ASPP2以p53非依赖形式促进自噬引起Hep3B细胞凋亡被引量：4: 2013年; p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)能特异性地与p53蛋白结合并增强其促凋亡的功能,进而发挥抗肿瘤作用.本室前期研究发现,ASPP2可以通过p53-DRAM-自噬途径诱导细胞凋亡.在本研究中,利用ASPP2腺病毒感染Hep3B细胞(p53缺陷型肝癌细胞系)并用甲基磺酸(MMS)处理后;Calcein AM/PI和M30染色检测细胞凋亡;GFP-LC3质粒转染细胞后检测自噬;荧光定量PCR和免疫印迹检测自噬基因表达.结果表明,ASPP2在p53缺陷的Hep3B细胞内可诱导发生凋亡;在MMS存在和缺失条件下,Adr-ASPP2均引起自噬体水平升高及自噬基因的表达增加,且MMS协同Adr-ASPP2能使自噬水平增加;进一步用VPS34 siRNA和DRAM siRNA抑制自噬发现,细胞凋亡水平下降,说明由Adr-ASPP2诱发经损伤相关自噬调节蛋白(DRAM)介导的自噬参与了肝癌细胞系凋亡的发生.综上结果表明,ASPP2可以通过非p53依赖的DRAM介导自噬,并促进肝癌细胞凋亡.该研究可为肝癌的基因治疗提供新的思路.; 刘凯王安娜姜涛温韬殷继明刘道洁乔录新石英李莉李宁陈德喜; 关键词：自噬

饥饿诱导DRAM介导的自噬与肝细胞凋亡的关系被引量：1: 2013年; 目的探讨在饥饿情况下,自噬与正常肝脏细胞凋亡的关系,及凋亡与损伤调节自噬调控基因(dam-age-regulated autophagy modulator,DRAM)介导的自噬之间的关系。方法采用无血清培养基培养正常肝脏细胞系7702细胞36h,采用M30免疫荧光染色观察凋亡,采用免疫印记检测自噬和DRAM基因的表达水平;并用DRAM特异的小干扰RNA(siRNA)阻断DRAM作用后,观察凋亡和自噬的水平。结果和0h相比,在12、24和36h3个时间点,饥饿可明显诱导7702细胞凋亡(P<0.001)。免疫印记结果显示,饥饿后第12、24和36小时的DRAM水平和自噬水平均逐渐增高,两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。用DRAMsiRNA阻断DRAM功能后,在12、24和36h未检测到DRAM的表达,同时凋亡细胞数明显下降(P<0.05)。DRAMsiRNA阻断DRAM功能后,在12、24和36h的自噬水平无明显差异。结论 DRAM介导的自噬可导致正常肝脏细胞凋亡,其对凋亡的影响可能成为肝癌研究的新思路。; 刘凯姜涛王安娜温韬殷继明任峰时红波刘道洁乔录新李宁陈德喜; 关键词：凋亡自噬

再次肝移植单中心16例分析: 2013年; 目的研究再次肝移植术的手术适应证、临床效果和预后。方法回顾性分析2004年4月至2013年4月我中心进行的612例肝移植临床资料。结果共有16例再次肝移植，再次肝移植率2．61％（16／612）。两次移植间隔时间（即首次移植物存活时间）为（16．2±18．3）个月（10d至64个月，中位时间9．5个月）。再次肝移植后总体病死率50％（8／16），围手术期病死率18．75％（3／16）；再次移植物存活时间为（37．4±34．3）个月（3d至94个月，中位时间39．5个月）；受者平均生存时间（53．6±33．9）个月（10d至94个月，中位时间57个月），5年总体生存率48．3％。结论对于肝移植术后常规方法难以治疗的严重并发症，再次肝移植是合理、必要和可行的救治手段。再次肝移植在首次移植6个月后进行，有利于降低再次肝移植的围手术期病死率。; 赖威曾道炳卢实春姜涛段斌炜孔德刚武聚山郭庆良; 关键词：病例报告

非乙肝相关性疾病肝移植术后新肝乙型肝炎病毒感染的临床分析: 目的总结非乙肝相关性疾病肝移植术后新肝感染乙型肝炎病毒(HBV)的临床特点,探讨其预防策略.方法回顾分析2004年6月至2012年12月首都医科大学附属北京佑安医院肝胆外科暨肝移植中心614例肝移植术中,应用HBV阴...; 姜涛卢实春赖威刘源

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