宋干
- 作品数：69 被引量：553H指数：15
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划World Health Organization国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学历史地理更多>>
- 汉滩病毒 A9 株M基因片段在重组痘苗病毒中的表达及鉴定被引量：8
- 1998年
- 为发展国产化肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病毒基因工程疫苗，选择了汉滩病毒Ａ９株Ｍ基因片段为目的基因，构建转染质粒ｐＪＳＢＡ９Ｍ。以携带Ｌａｃ基因的重组病毒为亲本，使表达载体ｐＪＳＢ－Ａ９Ｍ上的Ｍ片段与痘苗病毒内的Ｌａｃ基因重组，将Ｌａｃ置换成Ａ９Ｍ片段。用蓝白斑法筛选重组痘苗病毒，经ＰＣＲ扩增证实Ａ９Ｍ片段重组入痘苗病毒基因组内。重组痘苗病毒感染的ＶｅｒｏＥ６细胞，用抗糖蛋白单克隆抗体（ＨＣＯ２、１１Ｅ１０、３Ｄ５、１６Ｄ２）间接免疫荧光法检测，呈阳性反应；放射免疫沉淀法（ＲＩＰ）证实，表达产物可与抗Ｇ２的糖蛋白单克隆抗体出现特异性沉淀带；间接免疫荧光染色法检测表明，重组病毒免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠的血清与Ａ９株感染的ＶｅｒｏＥ６细胞有较好的特异性反应（１：３２０），说明Ａ９Ｍ片段在痘苗中表达成功。
- 马章亮杭长寿邱建明姚树元宋干
- 关键词：肾综合征出血热汉滩病毒基因表达疫苗
- 关于肾综合征出血热──汉坦病毒感染的病原学问题
- 1996年
- 关于肾综合征出血热──汉坦病毒感染的病原学问题中国预防医学科学院病毒学研究所（北京１０００５２）宋干１病原学上的突破有力地推动了登个汉坦病毒感染研究的发展８０年代以前，由于汉坦病毒的分离培养未解决，长期以来肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）的病原特征、流行规...
- 宋干
- 关键词：肾综合征出血热汉坦病毒病原学
- 汉滩病毒糖蛋白G1 G2和核蛋白NP在痘苗病毒天坛株中的联合表达被引量：7
- 1998年
- 将汉滩病毒７６／１１８株Ｍ、Ｓ片段分别插入转染质粒ｐＪＳＢ１１７５的Ｐ１１和Ｐ７．５启动子下游，构建成重组质粒ｐＪＳＢ１１Ｍ７．５Ｓ。采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ转染技术将重组质粒分别与痘苗病毒天坛株ＴＫ＋ｖｖ和表达Ｓ片段的重组痘苗病毒ｖＪＳＡ１１７５Ｓ进行共转染，免疫酶斑和蓝白斑法筛选并纯化，得到了重组病毒ｖＪＳＢ１１Ｍ７５Ｓ。Ｂｕｄｒ的选择压力试验表明，外源基因确实插入在ＴＫ基因区；ＰＣＲ及打点杂交证实了两个片段的插入；重组痘苗病毒基因组的部分序列分析显示，两个片段与各自的启动子连接正确；间接免疫荧光及放免沉淀证明了糖蛋白Ｇ１、Ｇ２和核蛋白ＮＰ的表达。
- 姚树元杭长寿邱建明马章亮李德新薛颖李川宋干
- 关键词：汉坦病毒重组痘苗病毒糖蛋白核蛋白
- 新中国流行性出血热防治研究的主要成就被引量：125
- 2000年
- 宋干
- 关键词：流行性出血热EHF流行病学
- 流行性出血热病毒L99株(家鼠型)与国内外其它毒株抗原性的比较被引量：12
- 1995年
- 流行性出血热家鼠型（Ⅱ型）病毒L99株分别在小白鼠脑腔和金黄地鼠肾细胞传代适应，再初步纯化，所选出的毒株具有广谱抗原性和较高的毒力滴度。应用鼠脑或细胞毒种感染金黄地鼠肾细胞制成灭活疫苗免疫动物，检测血清中和抗体反应及对野鼠型（Ⅰ型）和家鼠型（Ⅱ型）强毒攻击的保护力，均证明L99疫苗有双向的免疫效果。L99活毒免疫动物血清与不同来源的Ⅰ、Ⅱ型病毒交叉中和反应亦证明L99株对两型病毒有明显的交叉反应，表明L99株病毒对两型病毒具有双向抗原性。
- 郝富勇王晓宏回良杰黄永成黄雪芬李德新杭长寿宋干
- 关键词：流行性出血热病毒抗原性疫苗
- 汉坦病毒弱毒株的选育被引量：5
- 1996年
- 为了研制肾综合征出血热减毒活疫苗,研究病毒毒力,改进了汉坦病毒感染环磷酰胺处理地鼠动物模型,即检测地鼠感染病毒后出现的类似于人发病过程的四期经过。利用该动物模型从汉坦病毒(Ⅰ型)A9毒株中,采用空斑选育法筛选,获得1株对乳小鼠丧失脑内致死力及对环磷酰胺处理地鼠丧失致病力的弱毒株。弱毒株感染乳小鼠及环磷酰胺处理地鼠后,在肝、脾、肾、肺及脑中呈"一过性"繁殖,用免疫荧光法检测不到明显的病毒抗原,但采用逆转录-聚合酶链反应可检测到特异性病毒核酸。
- 邱建明宋干杭长寿张全福霍子威陈健樱姚树元
- 关键词：汉坦病毒弱毒株选育疾病模型聚合酶链反应
- 免疫亲和层析纯化汉坦病毒核壳蛋白实验条件的研究
- 1996年
- 为了建立免疫亲和层析纯化汉坦病毒核壳蛋白(NP)的方法,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)洗脱模型筛选出一种高效而温和的 NP 洗脱液,即 et-MgCl_2(乙二醇-MgCl_2)。et-MgCl_2能高效洗脱 NP,可在数分钟内将结合干 ELISA 板固相与 A35单克隆抗体(McAb)结合的 NP 几乎完全解离;在用 A35McAb-Sepharose 4B 免疫亲和层析柱纯化 NP 的实验中观察到同样的洗脱效果,经 SDS-PAGE 和 Western blot 证实,获得了高纯度的 L99株病毒 NP。
- 石晓宏宋干杭长寿林静
- 关键词：汉坦病毒核壳蛋白
- 汉滩病毒包膜糖蛋白G1和G2重组杆状病毒表达载体的构建与表达及其免疫原性被引量：15
- 1995年
- 将汉滩病毒（ＨＴＮＶ）Ｍ基因插入杆状病毒转移质粒ｐＡｃＹＭＩＢ多角体启动子下游附近，与Ｂｓｕ３６１酶切线性化的杆状病毒（ＡｃＶＥＰＡ）ＤＮＡ共同转染Ｓｆ９细胞，经空斑筛选获得了表达包膜糖蛋白（Ｇ１、Ｇ２）的重组杆状病毒（ＡｃｖＨａｎＭ）。经纯化ＡｃＶＨａｎＭＤＮＡ的Ｓｏｕｔｈｅｍｂｌｏｔ证实，Ｍ基因正确插入了杆状病毒基因组中。用抗糖蛋白混合单克隆抗体和病人血清做免疫荧光染色，观察到细小的特异性荧光颗粒，呈典型的核周分布。免疫荧光检测还证实，重组糖蛋白与９株抗糖蛋白单抗均起反应，提示重组糖蛋白的抗原位点分布与病毒毒粒糖蛋白相同或相似，用放射免疫沉淀（ＲＩＰ）分析仅显示Ｇ２带，且表达的Ｇ２分子量略小于病毒Ｇ２，这可能与两者的糖基化程度不同有关。研究还表明，重组糖蛋白具有细胞融合活性。
- 石晓宏杭长寿宋干梁米芳
- 关键词：汉滩病毒包膜糖蛋白杆状病毒免疫原性
- 汉滩病毒毒力标志的建立被引量：3
- 1995年
- 比较了汉滩病毒Ａ９株强毒克隆病毒与弱毒克隆病毒在体外培养、诱导中和抗体能力，以及单克隆抗体（单抗）反应谱等方面的差异。发现最为明显的区别在于弱毒克隆病毒对小鼠腹腔巨噬细胞及人外周血单核细胞敏感性降低，在Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞上繁殖缓慢，空斑形成需较长时间，且斑小。但强、弱毒克隆病毒的致细胞融合活性，刺激ＣＴＬｓ应答活性，以及时Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞的吸附速率与穿透力均无明显差别。经温度敏感（ｔｓ）试验及缺损干扰（ＤＩ）颗粒检测，表明弱毒克隆病毒为非ｔｓ株，不含ＤＩ颗粒。而弱毒克隆病毒免疫６～８周龄ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，同样能诱导较高滴度的中和抗体。强、弱毒克隆病毒的单抗反应谱表明，除了对４株抗糖蛋白单抗的反应性有显著差异外，两克隆病毒对１８株抗核蛋白单抗及１８株抗糖蛋白单抗的反应性无显著差异。
- 邱建明宋干杭长寿张全福霍子威桃树元
- 关键词：汉滩病毒
- 病毒性出血热新进展被引量：2
- 2006年
- 宋干
- 关键词：病毒性出血热HEMORRHAGIC出血热病毒生物恐怖埃博拉出血热病毒所
