李德新
- 作品数：28 被引量：162H指数：9
- 供职机构：中国预防医学科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划World Health Organization国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 汉滩病毒糖蛋白G1 G2和核蛋白NP在痘苗病毒天坛株中的联合表达被引量：7
- 1998年
- 将汉滩病毒７６／１１８株Ｍ、Ｓ片段分别插入转染质粒ｐＪＳＢ１１７５的Ｐ１１和Ｐ７．５启动子下游，构建成重组质粒ｐＪＳＢ１１Ｍ７．５Ｓ。采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ转染技术将重组质粒分别与痘苗病毒天坛株ＴＫ＋ｖｖ和表达Ｓ片段的重组痘苗病毒ｖＪＳＡ１１７５Ｓ进行共转染，免疫酶斑和蓝白斑法筛选并纯化，得到了重组病毒ｖＪＳＢ１１Ｍ７５Ｓ。Ｂｕｄｒ的选择压力试验表明，外源基因确实插入在ＴＫ基因区；ＰＣＲ及打点杂交证实了两个片段的插入；重组痘苗病毒基因组的部分序列分析显示，两个片段与各自的启动子连接正确；间接免疫荧光及放免沉淀证明了糖蛋白Ｇ１、Ｇ２和核蛋白ＮＰ的表达。
- 姚树元杭长寿邱建明马章亮李德新薛颖李川宋干
- 关键词：汉坦病毒重组痘苗病毒糖蛋白核蛋白
- 流行性出血热病毒结构蛋白的研究被引量：15
- 1990年
- 用超速离心方法从感染流行性出血热(EHF)病毒的细胞培养液中浓缩和纯化了A9、Chen、76-118、R22、L99 5株病毒,对5株病毒进行的SDS-PAGE均显示了此病毒的G1、G2和NP 3个结构蛋白。3株野鼠型病毒A9、Chen、76—118株的结构蛋白分子量相同,两株家鼠型病毒R22、L99株的结构蛋白分子量相同,但两个不同血清型病毒间有所不同。用放射免疫沉淀(RIP)分析了16株EHF病毒的G2,发现存在着分子量为55kD、57kD两种不同的G2.RIP和蛋白印迹实验(Western-blot)均发现在EHF病毒中至少存在分子量分别为48kD、50kD和52kD的3种NP。根据G2、NP的分子量,可将从我国不同地区不同宿主分离的15株EHF病毒分为两型 5个亚型。
- 李德新宋干杭长寿梁米芳张全福
- 关键词：流行性出血热病毒结构蛋白
- 麻疹病毒CC-47株非编码区核苷酸序列测定与比较被引量：2
- 2001年
- 目的 测定麻疹病毒疫苗株长 47(CC 47)的非编码区核苷酸序列 ,并和其他麻疹病毒比较 ,为利用疫苗株病毒进一步研究奠定基础。方法 用RT PCR分段扩增并克隆麻疹病毒CC 47株基因组全序列 ,用基因特异引物测定非编码区的核苷酸序列。结果 CC 47疫苗株非编码区在基因组上为 7个不连续的片段 ,总计 1791个核苷酸。与其他野毒株及Edmonston衍生 5株疫苗株非编码区序列比较发现 ,CC 47疫苗株具有与Edmonston疫苗株系列相同的 4个特征性的核苷酸替代位点 ,分别位于基因组 3′末端第 2 6位 (U→A)、42位 (U→G)和M F基因间隔区FmRNA 5′非翻译区的 4978位(A→G)、5 34 9位 (A→G) ,这些位点的改变可能会影响病毒mRNA的合成、加工和翻译效率以及基因组的复制和包装。结论 不同基因型麻疹病毒具有同样的位点改变可能与病毒在半许可细胞中适应或减毒有关 。
- 胡孔新林崇哲王晓芳李川孟祥芝李德新
- 关键词：麻疹病毒非编码区核苷酸序列
- 一组生产汉坦病毒样颗粒的哺乳动物工程细胞系
- 本发明为一组生产汉坦病毒样颗粒的哺乳动物工程细胞系，工程细胞系分别整合有汉坦病毒姬鼠型(HTN)、家鼠型(SEO)、棕背型(PUU)、杜布洛瓦型(DOB)各型病毒的M和S基因或单一M基因，稳定表达上述汉坦病毒M基因编码...
- 李德新梁米芳李川
- 文献传递
- 流行性出血热病毒分子生物学研究及应用
- 杭长寿李德新梁米芳石晓宏张全福
- 1、该项目属于生物科学技术领域：863-102-10-03“流行性出血热病毒基因工程疫苗研究”中的基础部分，从分子水平上阐述病毒结构和功能的关系，对发展基因工程疫苗，了解病毒本质，继而对整个研究起到推动作用。2、主要内容...
- 关键词：
- 关键词：流行性出血热病毒病毒结构基因克隆基因工程疫苗
- 流行性出血热地鼠肾细胞灭活疫苗人体试用细胞免疫反应观察被引量：11
- 1992年
- 观察了20位志愿者在接种试验性流行性出血热(EHF)地鼠肾细胞(GHKC)双价灭活疫苗后的细胞免疫反应,并以其体液免疫反应作对照观察。用淋巴细胞转化试验测定细胞免疫水平。结果首针疫苗接种后42天和56天,特异性刺激指数(SSI)和非特异性刺激指数(NSI)均较免疫前显著增高(P_(SSI)<0.001;P_(NSI)<0.02),免疫后SSI累计阳转率为100％,NSI累计阳转率为60％,免疫后6个月二者均降低至正常水平。免疫后56天测定抗体,荧光抗体阳转率为100％;微量感染性中和试验表明,针对家鼠型病毒L99株中和抗体阳转率为95％,而针对野鼠型病毒JR株阳转率为65％。
- 詹发先宋干黄永成杭长寿石晓宏艾翠薇霍子威张全福田映良李德新刘为民
- 关键词：灭活疫苗流行性出血热
- 流行性出血热细胞培养灭活疫苗灭活方法的比较被引量：1
- 1992年
- 比较了β-丙内酯(BPL)、福尔马林、γ-射线照射和加热等四种灭活方法对EHF病毒的灭活作用,灭活对病毒核壳蛋白(NP)和糖蛋白(G2)抗原的影响,以及用不同方法灭活制备的疫苗免疫动物后各种血清抗体反应。发现福尔马林可破坏病毒的G2糖蛋白,而BPL对它的破坏较小。加熱灭活后EHF病毒NP抗原滴度比灭活前有4～16倍增高,而同时使G2抗原滴度有2～4倍的降低,而γ-射线对病毒NP和G2抗原均无明显影响。同一批病毒培养物用四种方法灭活后免疫动物,血清抗体检查结果显示,γ-射线照射灭活疫苗免疫的动物其抗体滴度较高,0.3％BPL和福尔马林灭活者其血清抗体反应偏低。加热灭活疫苗IFA及抗G2抗体反应较高,但其中和抗体和HI抗体反应明显较低。用0.025％的福尔马林灭活的病毒免疫动物后产生的中和抗体滴度与0.05％及0.1％的BPL灭活者无明显差别,而以0.39％BPL灭活病毒免疫者其抗体反应偏低。血凝抑制抗体则BPL灭活疫苗免疫者较高。上述结果表明,福尔马林灭活疫苗免疫动物可产生与BPL灭活疫苗免疫者同样水平的中和抗体反应,适用于EHF灭活疫苗的生产。在四种灭活方法中,γ-射线灭活疫苗在对两种抗原的保存及免疫动物的抗体反应均较优,值得进一步研究。
- 刘为民宋干张全福李德新杭长寿
- 关键词：流行性出血热灭活疫苗
- 用单克隆抗体分析流行性出血热病毒的核蛋白抗原位点被引量：33
- 1989年
- 17株针对流行性出血热病毒(EHFV)L99株和C4株核蛋白(50kd)的单克隆抗体(McAb),根据抗原性分析可分为组特异性、型特异性(野鼠型或家鼠型),以及反应谱不全的亚组特异性McAb。这表明,在EHFV核蛋白上不仅有组特异性抗原决定簇,而且有型特异性抗原决定簇,采用竞争性酶联免疫吸附试验,以亲和层析纯化的核蛋白傲为抗原,用这些McAb分析L99株和C4株核蛋白的抗原位点,在两株病毒核蛋白上各发现了至少7个共有的位点,3个野鼠型和两个家鼠型病毒特有的位点,组特异性抗原位点至少分布在两个独立的区域,其构象和分布在不同毒株表现不尽相同,无论野鼠型或家鼠型病毒,其型特异性抗原位点均较集中在一个独立区域内。
- 梁米芳宋干杭长寿李德新李盈盈
- 关键词：出血热病毒位点分析
- 流行性出血热传代细胞多价纯化疫苗
- 流行性出血热传代细胞多价纯化疫苗是属生物技术领域“九五”国家医学技术攻关专题研究内容，包括我国流行性出血热病毒流行株在Vero传代细胞中的传代适应，毒株的选育，Vero细胞库的建立，病毒在Vero细胞中的培养、收获，超滤...
- 杭长寿李德新孙世华解燕乡霍子威张全福梁米芳
- 文献传递
- PCR技术在汉坦病毒研究中的应用
- 2001年
- 孟祥芝李德新
- 关键词：汉坦病毒聚合酶链反应
