尹建海
- 作品数：27 被引量：64H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 日本血吸虫新基因Sj79的分子特征及RNA干扰效应
- 2015年
- 目的研究日本血吸虫新基因Sj79的结构特征及特点,并进行RNA干扰以观察其RNAi效应,为进一步研究其在抗血吸虫生殖发育中的作用及机制提供依据。方法利用NCBI数据库中已公开的日本血吸虫EST序列信息对Sj79的分子结构特征进行分析,并对不同虫期和性别血吸虫的Sj79的mRNA表达水平进行分析,对雌虫进行Sj79的siRNA浸泡干扰,干扰后采用定量PCR检测Sj79转录本相对表达水平变化。结果 Sj79蛋白的开放阅读框含有696对碱基,由一个外显子构成。该基因具有明显的期特异性,在雌虫中转录水平较高。siRNA片段浸泡3 d后,低剂量(20 nmol/L)siRNA-1组Sj79转录本的表达水平[(41.0±12.3)%]低于siRNA-NC组[(103.2±14.4)%],差异有统计学意义(t=3.28,P<0.05);高剂量(200 nmol/L)siRNA-1组[(15.8±10.9)%]、siRNA-2组[(11.1±8.8)%]虫体Sj79转录本的相对表达水平均低于siRNA-NC组[(100.1±6.3)%],差异均有统计学意义(t=13.44、27.84,P均<0.01),前二者对Sj79转录本的转录抑制率可达84.2%、88.9%。si RNA片段浸泡7 d后,仅低剂量siRNA-1[(43.4±4.5)%]、siRNA-2[(62.5±5.4)%]干扰后虫体Sj79转录本的相对表达水平低于siRNA-NC组[(100.4±5.2)%](t=8.33、5.07,P均<0.01)。结论本研究完善了Sj79基因的mRNA序列和基因组信息,了解了其结构特征,并用siRNA干扰法筛选到了有效的si RNA-1和si RNA-2片段,有利于后续观察Sj79分子干扰对体外雌虫产卵的影响。
- 姜岩岩袁忠英徐馀信臧炜曹建平王莹尹建海沈玉娟
- 关键词：日本血吸虫分子特征RNA干扰
- 上海及周边部分地区隐孢子虫基因分型研究
- 由隐孢子虫感染引起的疾病称隐孢子虫病（cryptosporidiosis）,为新发传染病。隐孢子虫卵囊可通过污染水源和食物引起该病的爆发和流行,严重威胁婴幼儿、免疫功能缺陷患者身体健康,影响畜牧业生产。全球已有多起大规模...
- 尹建海
- 关键词：隐孢子虫动物水源基因分型
- 2012年和2018年我国输入性恶性疟原虫氯喹抗性基因多态性分析
- 2020年
- 目的对2012年和2018年我国输入性恶性疟原虫样本氯喹抗性分子标记位点基因多态性进行检测,分析恶性疟原虫氯喹抗性转运蛋白基因(Plasmodium falciparum chloroquine re sistant transporter,Pfcrt)第72~76位密码子抗性相关位点突变类型,并分析不同输入来源样本的特异性。方法收集2012年和2018年国家疟疾诊断参比实验室674例输入性恶性疟病例滤纸血样本,以样本中恶性疟原虫7号染色体上Pfcrt基因第72~76位点为扩增片段,采用巢式PCR法进行扩增并测序,对目的产物片段测序结果、地理分布等特征进行统计分析。结果2012年和2018年我国674例输入性恶性疟病例中,95.5%(644/674)来自非洲,其余4.5%(30/674)来自东南亚和大洋洲(巴布亚新几内亚);非洲又以西非和中非为主(占非洲样本的80.4%,518/644)。共检测到C72S、M74I、N75E、K76T 4个位点突变和5种单体型类型(CVMNK、CVIET、SVMNT和两种混合型),其中CVMNK与CVIET为非洲和东南亚地区恶性疟原虫共有的单体型类型,SVMNT仅在东南亚(缅甸)和巴布亚新几内亚输入样本中检测出;2种混合型为CVMNK/CVIET和CVMNK/SVMNT,前者在非洲和东南亚输入样本中分布,后者仅在东南亚缅甸来源样本中检出。自非洲输入的样本野生型较多,占77.7%(478/615);而自东南亚和巴布亚新几内亚输入的样本中,抗性分子标记样本占68.0%(17/25),两者差异有统计学意义(χ^2=28.5,P<0.05)。非洲不同地区来源样本中,抗性基因比例和野生型构成差异有统计学意义(P<0.01),西非野生型所占比例最低。结论2012年和2018年我国674例输入性恶性疟病例样本中,自东南亚输入的恶性疟原虫Pfcrt基因第72~76位点抗性基因比例和分子多态性均较非洲来源样本高。
- 燕贺王笑笑丰俊张丽尹建海李美夏志贵黄芳
- 关键词：恶性疟原虫输入性疟疾基因多态性
- 多重PCR检测肠道新发原虫试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种多重PCR检测肠道新发原虫试剂盒，其用于同时检测隐孢子虫、贾第虫，环孢子虫和微孢子虫，该试剂盒包括如下引物：隐孢子虫的特异性引物：SEQ ID NO.1，SEQ ID NO.2；贾第虫的特异性引物：SEQ...
- 沈玉娟曹建平刘华袁忠英姜岩岩尹建海王燕娟
- 文献传递
- 基于棘球蚴微管蛋白为靶点的抗棘球蚴病高通量药物筛选方法
- 本发明公开了一种基于细粒棘球蚴和多房棘球蚴微管蛋白为靶点的抗棘球蚴高通量药物筛选方法，包括以下步骤：分别连接细粒棘球蚴和多房棘球蚴各14个α‑微管蛋白同型基因和11个β‑微管蛋白同型基因到质粒载体，得到包含质粒载体的蛋白...
- 刘丛珊姚嘉青张皓冰陶奕薛剑尹建海
- 我国隐孢子虫/隐孢子虫病流行研究现状
- 隐孢子虫是一种人兽共患肠道原虫,是机会性致病病原体,感染免疫抑制或受损人体常导致严重的腹泻,甚至死亡。隐孢子虫被世界卫生组织列为世界六大腹泻病病原体之一,引起的隐孢子虫病被认为是新发传染病。在世界各地,尤其是发达国家,隐...
- 曹建平尹建海沈玉娟
- 文献传递
- 熊果酸在制备抗包虫药物中的应用
- 本发明涉及治疗包虫病的新型药物的发现研究，公开了熊果酸在制备抗包虫药物中的应用。本发明通过深入研究熊果酸对细粒棘球蚴的作用效果，探索其作为抗包虫药物新药的应用前景。经实验验证，熊果酸作用于体外培养的细粒棘球蚴生发层细胞，...
- 尹建海曹建平刘丛珊张皓冰沈玉娟
- 文献传递
- 他克林在制备治疗包虫病药物中的应用
- 本发明涉及治疗包虫病的新型药物的发现研究，公开了他克林在制备治疗包虫病药物中的应用。本发明通过深入研究他克林对细粒棘球蚴的作用效果，探索其作为治疗包虫病药物新药的应用前景。经实验验证，他克林作用于体外培养的细粒棘球蚴原头...
- 刘丛珊张皓冰尹建海薛剑陶奕
- 他克林体外抗细粒棘球蚴作用研究被引量：3
- 2018年
- 目的研究乙酰胆碱酯酶抑制剂他克林体外抗细粒棘球蚴的作用效果。方法体外分离和培养细粒棘球蚴原头节和生发层细胞,经浓度为4、8、10、20和40μg/mL的他克林作用3d后经0.1%亚甲基蓝染色观察,记录死活原头节的数目以计算原头节死亡率,另外用CCK-8试剂盒检测药物对生发层细胞活性的影响并计算细胞活性抑制率。同时用透射电镜和扫描电镜分别观察药物对细粒棘球蚴原头节和生发层细胞超微结构造成的影响。结果经20μg/mL和40μg/mL的他克林体外作用3d后,原头节的死亡率高达100%,其中死亡原头节的体壁出现轻微肿胀且伴随着外部轮廓的消失,同时超微结构亦发生明显改变,原头节体壁组织中出现了大量的空泡和脂肪滴。当他克林浓度为40μg/mL时,可造成生发层细胞全部死亡。细粒棘球蚴生发层细胞粘附于培养介质的基质消失、细胞发生聚集且数目减少。扫描电镜可观察到他克林作用3d后的细胞出现塌陷或者萎缩。结论他克林可直接影响体外培养的细粒棘球蚴原头节和生发层细胞的活性,是潜在的包虫病治疗药物。
- 刘丛珊尹建海姚嘉青薛剑陶奕张皓冰
- 关键词：他克林细粒棘球蚴原头节
- 他克林在制备治疗包虫病药物中的应用
- 本发明涉及治疗包虫病的新型药物的发现研究，公开了他克林在制备治疗包虫病药物中的应用。本发明通过深入研究他克林对细粒棘球蚴的作用效果，探索其作为治疗包虫病药物新药的应用前景。经实验验证，他克林作用于体外培养的细粒棘球蚴原头...
- 刘丛珊张皓冰尹建海薛剑陶奕
- 文献传递
