熊波
- 作品数:5 被引量:3H指数:1
- 供职机构:暨南大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学哲学宗教医药卫生文化科学更多>>
- 人卵透明带蛋白3差异表达菌的鉴定及比较
- 2009年
- 目的:研究重组人卵透明带ZP3蛋白的差异表达情况。方法:构建8个重组rhZP3的差异表达质粒在毕赤酵母中进行诱导表达,研究跨膜区保留与否、潜在酶切位点突变与否及多聚组氨酸纯化标签设计的位置是否影响rhZP3的表达情况。结果:保留跨膜区会影响重组蛋白泌出胞外而使表达量降低,潜在酶切位点存在会导致重组蛋白被不完全降解,而多聚组氨酸纯化标签设计位置对表达也有一定影响。结论:从表达量和产物完整性综合考虑,以突变型成熟肽为佳,含跨膜区的蛋白则应选用pPICZaA质粒,以便富集得到完整的表达蛋白。
- 周文燊熊波李文星谢琪璇肖銮娟张春雪潘善培
- 关键词:跨膜区
- 罗夏测验的跨文化研究——中国、以色列和美国样本的比较
- 对于罗夏测验的跨文化使用问题,争论已久。国外的一些研究者认为,罗夏测验可以摆脱文化因素的影响,在世界任何一个国家使用。另外一些研究者则认为,罗夏测验是一种具有文化敏感性的测验,深受文化因素的影响。世界各地的罗夏测验研究者...
- 熊波
- 关键词:罗夏测验大学生跨文化交流
- 文献传递
- 巴斯德毕赤酵母高密度发酵表达rHC MVp的研究被引量:1
- 2005年
- 目的:提高人巨细胞病毒嵌合肽(rHCMVp)在巴斯德毕赤酵母中的表达量,并进行发酵罐高密度发酵。方法:将生长培养基的菌体离心后等量接入诱导培养基中(包括不同体积分数的甲醇、pH值)培养,通过菌体密度检测和发酵液上清的SDS -PAGE结果分析不同条件、不同诱导时间对人巨细胞病毒嵌合肽表达的影响,并依据优化条件进行高密度发酵。结果:摇瓶培养时,转化子在体积分数1%的甲醇pH 6 0的条件下诱导72h ,A6 0 0 (菌体密度)为4 5 2 ,目的蛋白表达量达到10 2mg/L。2L发酵罐进行了高密度发酵,经体积分数1%甲醇诱导4 8h ,最终A6 0 0 (菌体密度)达到12 4 ,每升发酵液中含目的蛋白5 7 2 1mg。结论:通过条件优化,进行高密度发酵,获得大量的rHCMVp。
- 余巍谢琪璇潘善培肖銮娟熊波李文星董志炜
- 关键词:巴斯德毕赤酵母发酵
- 人卵透明带蛋白3突变体的构建及其在毕赤酵母中的表达
- 本研究利用重叠延伸PCR介导的定点诱变技术对人卵透明带3(hZP3)序列中三个潜在的酵母蛋白水解酶切割位点进行突变。通过消除这些蛋白酶切位点,希望能得到没有降解的重组hZP3蛋白。此外,本研究的另一个目的就是探讨hZP3...
- 熊波
- 关键词:定点诱变巴氏毕赤酵母
- 文献传递
- 人卵透明带3基因片断hZ3.3的克隆及其在毕赤酵母中的表达被引量:2
- 2005年
- 为了探讨透明带与精子的作用机制,人卵透明带3(humanZonaPellucida3,hZP3)第191位氨基酸到319位氨基酸之间的cDNA序列通过PCR方法扩增后,克隆到表达载体pPICZαA上,构建成重组质粒pPICZαA-hZ3.3。该质粒经SacⅠ线性化后电打孔转入Pichiapastoris酵母X-33中,用YPDSZeocin+筛选高拷贝转化子,并用PCR分析鉴定目的基因片断与酵母基因组的整合,阳性转化子用0.5%甲醇诱导,表达目的蛋白。经SDS-PAGE凝胶电泳和Western-blot鉴定分析,结果表明目的基因成功表达,表达产物大小约为37kD。
- 熊波曹佐武何柳媚丰一兴邱平明
- 关键词:克隆PICHIAPASTORIS