谢芳
- 作品数：10 被引量：45H指数：5
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- 铁过载诱导活性氧物质生成对骨髓造血功能影响的体外实验研究被引量：14
- 2011年
- 目的建立体外铁过载骨髓造血细胞模型，检验铁过载对细胞活性氧物质（ROS）水平的影响以及ROS升高对骨髓造血功能的影响。方法在骨髓单个核细胞培养的过程中添加枸橼酸铁铵（FAC），使细胞铁过载，检验这一过程中细胞ROS水平、细胞凋亡水平、造血细胞集落形成和CD34＋细胞计数的变化。再用去铁胺（DFO）祛铁或抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）清除过多的ROS后，检测上述指标的变化。结果①在培养液中加入不同浓度FAC培养不同时间，发现骨髓造血细胞内可变铁池（LIP）水平升高，且具有时间和浓度依赖性，在含400μmol／LFAC的培养液中培养24h时LIP水平达到最高。②在400μmol／LFAC浓度下，培养骨髓造血细胞24h后骨髓造血细胞内总的ROS、粒细胞和红细胞内ROS显著升高，分别为对照组的1．77、1．75和2．12倍。与对照组比较，DFO和NAC处理后均能明显降低细胞内ROS水平（P〈0．05）。⑧对骨髓细胞造血功能的检测发现FAC组细胞凋亡比例[（24．80±2．99）％]较对照组[（8．90±0．96）％]显著升高；造血细胞集落形成单位（CFU—E、CFU—GM、BFU—E和CFU—mix）计数明显低于对照组（P值均〈0．05）；CD34＋细胞比例[（0．39±0．07）％]较对照组[（0．91±0．12）％]也显著降低。且这些损伤都可以通过DFO和NAC处理而部分恢复。结论铁过载通过诱导ROS生成影响骨髓造血功能，这种损伤可以通过祛铁和抗氧化处理减轻。可能为治疗铁过载患者骨髓造血功能低下寻找新的靶点。
- 谢芳赵明峰李玉明朱海波江燕徐新女肖霞穆娟刘鹏江吕海蓉
- 关键词：铁超负荷活性氧骨髓细胞
- 铁过载催化的氧化应激对骨髓间充质干细胞的影响及其作用机制被引量：6
- 2013年
- 目的探讨铁过载催化的活性氧(ROS)生成对骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法体外培养MSCs,加入不同浓度(100、200、400μmol/L)的枸橼酸铁铵(FAC),培养12、24、48 h,建立铁过载模型,测定铁过载前后细胞内的不稳定铁池(LIP)和ROS水平,并采用群体倍增时间(DT)检测MSCs的细胞增殖能力,采用Annexin V-PI双标法检测细胞凋亡率,进行蛋白质印迹实验检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(P-p38MAPK)、p38MAPK、蛋白激酶B(AKT)及p53蛋白的表达情况。结果铁过载组MSCs的LIP水平明显高于对照组(平均荧光强度482.49±20.96比303.88±23.37,P<0.05);ROS的水平随FAC浓度增加而升高,在加入FAC浓度为400μmol/L时最高(P<0.05)。用400μmol/L的FAC分别处理12、24、48 h的MSCs DT分别为(1.47±0.11)、(1.80±0.13)、(2.04±0.14)d,均明显长于对照组的(1.20±0.05)d(P均<0.05)。铁过载组MSCs的凋亡率也明显高于对照组[(3.51±1.17)%比(0.66±0.62)%,P<0.05]。与对照组比较,铁过载组P-p38MAPK、p38MAPK、p53蛋白的表达增加,而AKT的表达无明显差异。结论铁过载可通过提高骨髓MSCs的ROS水平来抑制其增殖、诱导其凋亡,此过程可能与p38MAPK-p53信号通路的激活有关。
- 卢文艺赵明峰Sajin Rajbhandary赵楠谢芳肖霞穆娟李玉明
- 关键词：铁过载间充质干细胞活性氧P38丝裂原活化蛋白激酶P53
- 氧化应激对铁过载造血干祖细胞造血功能的影响被引量：12
- 2011年
- 目的 体外诱导脐血来源的造血干祖细胞铁过载,检测参与氧化应激的活性氧物质（ROS）的水平以及对造血干祖细胞造血功能的影响.方法 通过体外培养脐血单个核细胞（MNC）的过程中添加枸橼酸铁铵（FAC）,建立铁过载造血干祖细胞模型.实验分组：对照组、FAC组、FAC＋N-乙酰半胱氨酸（NAC）组、FAC＋谷胱甘肽（GSH）组.检测各组细胞内ROS水平,并用抗氧化剂处理,检验这一过程中ROS、细胞内可变铁池（LIP）、凋亡水平、造血集落形成和脐血各系造血细胞数目的变化.结果（1）在培养液中加入不同浓度FAC（50、100、200、400μmol/L）培养不同时间（6、12、24 h）,发现ROS水平随着FAC的浓度和培养时间变化,且在200μmol/L FAC的培养液中培养24h时ROS水平达到最高.（2）用抗氧化剂（NAC、GSH）联合FAC处理细胞发现,抗氧化剂处理组细胞内总的ROS以及髓系细胞和红系细胞内的ROS明显低于FAC组（均P＜0.05）.（3）在200 μmol/LFAC的浓度下,培养脐血MNC 24 h后细胞内总的LIP、髓系细胞和红系细胞内LIP水平均显著高于对照组（均P＜0.05）,但抗氧化剂NAC和GSH对铁过载细胞内LIP没有明显影响.（4）对脐血造血干祖细胞造血功能的检测发现：FAC组细胞凋亡比例[（20.90±3.45）％]明显高于对照组[（9.20±1.29）％]（P＜0.05）；造血集落形成单位（CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-mix）计数明显低于对照组（前3项两组间差异具有统计学意义,P ＜0.05）；CD34＋、CD33＋、GlyA＋细胞比例及细胞计数均显著低于对照组（均P＜0.05）；这些损伤都可以通过NAC或GSH处理部分恢复.结论 氧化应激在铁过载造血干祖细胞的损伤中扮演着重要角色,可以通过升高细胞内ROS水平抑制其造血功能,清除细胞内多余的ROS能减轻这些损伤.研究结果可为治疗铁过载患者因氧化应激诱导的造血功能低下提供新的靶点和研究思路.
- 谢芳赵明峰朱海波卢文艺徐新女肖霞穆娟刘鹏江李玉明
- 关键词：氧化性应激铁超负荷造血干祖细胞造血功能
- 铁过载骨髓造血细胞体外模型的建立及其对造血的影响被引量：7
- 2011年
- 本研究通过铁与骨髓单个核细胞共培养,建立铁过载骨髓造血细胞模型并观察其对造血功能的影响。在体外培养骨髓单个核细胞的过程中,在培养液中添加枸橼酸铁铵(FAC),使细胞铁过载,建立铁过载骨髓造血细胞模型,然后检验这一过程中造血细胞的凋亡水平、造血集落形成(CFU-E、CFU-GM、BFU-E和CFU-mix)和CD34+细胞的计数变化。再用去铁胺(DFO)祛铁,观察上述指标的变化。结果发现:在不同时间加入培养液中不同浓度FAC,骨髓造血细胞内可变铁池(LIP)水平升高,且具有时间和浓度依赖性,在含400μmol/L FAC的培养液中培养24小时时LIP水平达到最高。骨髓细胞造血功能检测表明,FAC组细胞凋亡比例(24.8±2.99%)较对照组(8.9±0.96%)显著升高(p(0.01);造血集落形成单位计数明显低于对照组(p(0.05);CD34+细胞比例(0.39±0.07%)与对照组(0.91±0.12%)相比也显著降低(p(0.01)。这些损伤影响可以通过DFO的处理部分消除。结论:在体外培养过程中添加铁能诱导骨髓单个核细胞铁过载,建立铁过载骨髓造血细胞模型,并能引起骨髓造血功能损伤,而这种损伤作用可以通过祛铁法减轻。本模型为深入研究铁过载对骨髓细胞造血功能的作用机制提供实验方法,并为骨髓造血功能低下的铁过载病人治疗提供新的靶点。
- 谢芳赵明峰朱海波肖霞徐新女穆娟李玉明
- 关键词：铁过载造血功能
- 白血病干细胞免疫表型与急性白血病疗效及预后的关系被引量：4
- 2012年
- 研究表明，白血病细胞中的CD34＾＋CD38＾-CDl23＾＋亚群［1］和CD34＾＋CD38＾-CD96＾＋亚群［2］同样具备白血病干细胞（LSC）的特性。但是，目前为止，还没有哪个表面标志是公认的LSC特异标志，如何准确界定LSC仍然是研究的难点和热点。LSC表面标志对白血病疗效和预后判断的作用如何？
- 朱海波赵明峰李玉明谢芳江燕徐新女邓琦耿莉肖霞刘鹏江穆娟
- 关键词：急性白血病预后判断细胞免疫表型白血病干细胞白血病细胞
- 白血病干/祖细胞相关基因表达在急性白血病中的临床意义被引量：2
- 2011年
- 本研究旨在检测白血病干/祖细胞(LSPC)相关基因ABCB1、BMI-1、HOXB4在急性白血病患者骨髓中的表达,并探讨其在急性白血病中的临床意义。采集41例初治急性白血病患者的骨髓、16例缓解期患者的骨髓及10例非恶性血液病患者骨髓标本(作为对照)。采用SYBR Green相对定量RT-PCR法检测ABCB1、BMI-1、HOXB4基因的表达水平,并分析它们与急性白血病疗效、预后的关系。结果表明,ABCB1、BMI-1、HOXB4在对照组均无表达,在初治组相对表达量分别为4.26±2.26、3.72±1.91、3.74±2.38;而在缓解标本组分别为2.14±1.47、2.07±0.99、1.47±0.89,均明显低于初治组(p<0.05);正规化疗2个疗程内能够获得完全/部分缓解的患者的基因相对表达量分别为1.77±1.29、2.09±1.26、1.78±1.49,明显低于未缓解的难治病例(分别为7.23±1.78、3.96±0.92、4.48±2.57)(p<0.01)。单因素分析发现,各个基因高表达患者的白血病干/祖细胞免疫表型(CD34+CD38-CD96+和CD34+CD38-CD123+)表达阳性的比例及出现高白细胞(≥30×109/L)的几率均高于低表达患者,差异显著(p<0.05);而综合分析各个基因的表达,上述变化的p值均小于单因素分析p值,差异更显著(p<0.01)。结论:LSPC相关基因(ABCB1、BMI-1、HOXB4)表达与LSPC免疫表型呈相关性,在急性白血病患者发病初期表达增高,缓解后其表达水平明显下降;表达高者易出现高白细胞,化疗效果差,缓解率低。综合多指标分析可能是一种更好地临床评估疗效和预后的方法。
- 朱海波赵明峰谢芳肖霞徐新女穆娟杨皎娃刘鹏江吕海容李玉明
- 关键词：白血病干细胞BMI-1HOXB4急性白血病
- 活性氧物质对骨髓造血功能的影响被引量：13
- 2011年
- 活性氧物质（ROS）一般情况下是由体内正常的氧代谢产物形成，在细胞信号转导过程中起重要作用。细胞内适当水平的ROS在调控一些生物学现象中发挥着重要的作用，包括一些信号通路的激活以及这些信号所涉及的基因表达。然而，在各种因素的影响下，ROS生成增多和（或）正常细胞内抗氧化系统的损伤都会导致细胞的氧化应激反应，
- 谢芳赵明峰
- 关键词：活性氧物质骨髓造血功能细胞信号转导氧化应激反应抗氧化系统
- 白血病干细胞相关基因表达在急性白血病中的临床意义
- ＜正＞目的:检测白血病干细胞（leukemia stem cell,LSC）相关基因abcb1、bmi-1、hoxb4在急性白血病患者骨髓中的表达,研究探讨其在急性白血病中的临床意义。方法:采集41例初治急性白血病患者的...
- 朱海波赵明峰谢芳肖霞徐新女穆娟杨皎娃刘鹏江吕海蓉李玉明
- 文献传递
- 铁过载诱导ROS生成对骨髓造血功能的影响
- ＜正＞目的:体外建立铁过载骨髓造血细胞模型,以此模型检验铁过载对活性氧物质（ROS）水平的影响以及ROS升高对骨髓造血功能的影响和作用机制,同时观察祛铁和抗氧化处理对以上指标是否有逆转作用。方法:1.体外分离培养骨髓单个...
- 谢芳赵明峰李玉明朱海波卢文艺邓琦
- 文献传递
- 白血病干细胞免疫表型表达与急性白血病疗效预后的关系
- ＜正＞目的:检测急性白血病患者骨髓白血病干细胞免疫表型CD34+CD38-CD96+（简称CD96）和CD34+CD38-CD123+（简称CD123）的表达,并研究探讨其与急性白血病患者疗效预后的关系。方法:采用流式细...
- 朱海波赵明峰李玉明谢芳江燕徐新女邓琦耿莉肖霞刘鹏江穆娟
- 文献传递
