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rhM-CSFsR在大肠杆菌中的表达及其配基结合活性分析被引量：4: 1999年; 从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)胞外具有结合活性区域的cDNA,经平端连接将其克隆到原核表达载体pET-28a的His-Tag下游,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,重组的人可溶型M-CSFR(rhM-CSFsR)在宿主菌中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的38%.重组蛋白经Ni2+组氨酸结合树脂螯合层析柱纯化,获得了纯化的rhM-CSFsR,经SDS-PAGE显示为单一区带,其表观分子量为34kD.用酶联免疫吸附分析(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)证明rhM-CSFsR有明显的M-CSF专一结合活性,Kd值为7.8nmol/L,只有一个M-CSF结合位点.本实验结果显示原核表达的rhM-CSFsR具有明显的配基结合活性,提示M-CSFR的糖基化程度对于其配基结合活性不是必不可少的。; 罗寿青郑德先饶青刘彦信马正宇吴克复; 关键词：巨噬细胞集落刺激因子受体

sTRAIL在大肠杆菌中的表达及其诱导细胞凋亡活性的研究被引量：11: 1999年; TRAIL(TNF relatedapoptosis inducingligand ,简称TRAIL或Apo 2L)是肿瘤坏死因子家族的新成员 ,体外研究表明其具有特异性杀伤肿瘤细胞的功能 .为了进一步探索TRAIL的生物学功能及其临床应用前景 ,首次从中国正常人外周血淋巴细胞中扩增了TRAIL胞外功能区(sTRAIL) ,并将其插入原核表达载体 ,转化大肠杆菌后 ,可溶型重组蛋白 (rsTRAIL)获得了高效稳定表达 ,其产量达到菌体总蛋白的 30 %左右 .体外研究表明 ,亲和层析纯化后的重组蛋白在 0 .1～ 1 μg/mL的浓度范围内 ,能显著诱导所试全部 7种肿瘤细胞株细胞凋亡 ,但不能诱导正常鼠成纤维细胞株细胞凋亡 ;进一步研究表明 ,rsTRAIL对贲门癌、乳腺癌和恶性胸腺瘤等原代细胞也具有强烈的杀伤作用 ,但不能杀伤正常人外周血淋巴细胞 .此实验结果为rsTRAIL特异性地诱导肿瘤细胞凋亡的生物学作用提供了新的实验证据 ,具有重要的临床应用价值 .; 朱迅刘彦信马正宇郑德先; 关键词：肿瘤细胞细胞凋亡 STRAIL 肿瘤坏死因子

TNF家族新成员TRAIL及其受体与细胞凋亡被引量：1: 1999年; 肿瘤坏死因子家族(TNF)成员在细胞凋亡的调控中发挥重要作用。TRAIL(TNF related apoptosis inducing ligand)是最近发现的TNF家族成员。在体外史验中,TRAIL能诱导多种肿瘤细胞凋亡,而正常组织细胞却对其不敏感,提示TRAIL可能成为一种新的抗肿瘤药物。TRAIL受体的发现揭示了一种新的细胞凋亡调控机制,即通过假受体竞争性抑制配体,从而诱导细胞凋亡作用。TRAIL可能与Fas系统互补而发挥作用,并且与HIV-1感染所致的T细胞减少及p53介导的DNA损伤所致细胞凋亡有关。; 马正宇; 关键词：TRAIL 肿瘤坏死因子细胞凋亡信号转导

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马正宇