高勇
- 作品数：12 被引量：44H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 商陆抗病毒蛋白抗HCV作用的初步研究
- 2002年
- 目的 探讨商陆抗病毒蛋白 (PAP)对HCV的抑制作用。方法 用不同浓度PAP处理HCV感染细胞模型 ,用荧光定量PCR检测HCVRNA。结果 HepG2 细胞内HCV持续表达达 3 0d以上。PAP处理HCV HepG2 细胞后 ,各组细胞内HCVRNA含量在 48h、96h和 14 4h差异非常显著 (P <0 .0 1)。培养上清液HCVRNA含量在 48h时 ,各组间无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,但在 96h和 14 4h时 ,各组间差异非常显著 (P <0 .0 1)。此种抑制作用随PAP浓度的增加而增强。结论 PAP具有抑制HCV复制和表达的作用。
- 贺永文陈瑞烈高勇郭劲松
- 关键词：丙型肝炎
- 干扰素治疗对慢性乙型肝炎患者外周血TC和Ts细胞的影响被引量：8
- 2002年
- 目的 探讨干扰素治疗对慢性乙型肝炎患者外周血ＴＣ和Ｔｓ细胞状忘的影响，并分析干扰素疗效与Ｔｃ和Ｔｓ细胞变化的关系。方法 用双重染色免疫细胞学技术检测３２例干扰素治疗慢性乙型肝炎患者外周血ＴＣ和Ｔｓ细胞。结果 有２１例患者达到完全或部分应答标准，其中９例为完全应答，１２例为部分应答，１１例无应答；干扰素治疗结束时产生完全或部分应答组，Ｔｃ细胞水平较正常对照组均显著增高，Ｔｓ细胞水平均显著低于正常对照组；完全应答与部分应答组之间Ｔｃ和Ｔｓ细胞间的差异无显著性；无应答组Ｔｃ与完全或部分应答组相比，差异无显著性，而Ｔｓ细胞均显著高于后两组、结论 慢性乙型肝炎患者干扰素治疗可以导致患者体内Ｔｃ和Ｔｓ细胞水平Ｓ发生变化，其中尤以Ｔｓ细胞的变化更为明显，Ｔｓ水平的改变可能与干扰素抗病毒疗效的关系更为密切。
- 朱传武罗端德曾令兰高勇李淑莉
- 关键词：干扰素慢性乙型肝炎外周血TS细胞
- 丙型肝炎病毒感染细胞模型的实验研究被引量：2
- 2003年
- 目的 建立接近体内自然感染状态并能长期复制的丙型肝炎病毒 (HCV)感染细胞模型。方法 用HCV阳性血清感染人肝癌细胞株HepG2、SMMC 772 1及胎肝细胞株L0 2 ,继续培养 6 0d ,用巢式逆转录 聚合酶链反应(nestedRT PCR)检测培养细胞及上清中正、负链HCVRNA。结果 HepG2、SMMC 772 1在感染后第 2～ 30d ,L0 2在感染后第 3～ 30d细胞中可以间断检出HCV正链RNA ;3株细胞的细胞内HCV负链RNA均在感染后第 3～ 30d可以间断检出 ,检出率与正链RNA接近。 3株细胞以HepG2细胞中HCVRNA正、负链检出率较高 ,并在第 31～ 6 0d仍可间断检出 ,但复制程度逐渐减弱。 3株细胞的培养上清中HCV正链RNA感染后也呈间断阳性 ,检出率与细胞内正链RNA基本一致。培养上清中均未检出HCV负链RNA。结论 HepG2、SMMC 772 1及L0 2细胞均对HCV易感 ,并能支持HCV长期复制。
- 陈瑞烈贺永文高勇李淑莉杨小铭罗端德
- 关键词：丙型肝炎病毒感染细胞模型细胞培养
- 乙型病毒性肝炎的基因治疗被引量：2
- 2001年
- 近年来乙型病毒性肝炎基因治疗的研究取得了很大的进步 ,本文就反义RNA、核酶、反基因、基因免疫等技术及基因治疗的肝脏靶向性几个方面的研究进展作一综述。
- 高勇罗端德
- 关键词：乙型病毒性肝炎基因治疗反义RNA核酶
- 乙型肝炎病毒(HBV)反基因与HBV的结合及对HBV复制的影响被引量：4
- 2001年
- 目的 研究三螺旋形成寡核苷酸与ＨＢＶ基因的结合情况及其对ＨＢＶ复制的影响。方法 合成一段能与ＨＢＶ核心启动子位点（１７３４～１７５３ｎｔ）形成三螺旋的寡核苷酸（ＴＦＯ２０）并标记上生物素，分别用脂质体－ＴＦＯ２０及裸ＴＦＯ２０转染ＨｅｐＧ２．２．１５细胞，用链酶亲和素－生物素法（ＳＡＢＣ）检测其转染效率及其与ＨｅｐＧ２．２．１５细胞中ＨＢＶ ＤＮＡ的结合情况；并采用ＥＬＩＳＡ、半定量逆转录（ＲＴ）－ＰＣＲ及荧光定量ＰＣＲ法分别检测经寡核苷酸处理的ＨｅｐＧ２．２． １５细胞及空白对照细胞上清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ ＤＮＡ及细胞中ＨＢＶ ＲＮＡ的水平。结果 脂质体－ＴＦＯ２０转染ＨｅｐＧ２．２．１５细胞的效率可达８０％，而裸ＴＦＯ２０转染率最高为４０％；ＴＦＯ２０主要定位于细胞核及胞浆中。ＴＦＯ２０处理组细胞上清中ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ含量分别较空白对照组降低３７．０％及７８．２％，ＨＢＶ ＤＮＡ水平较空白对照组明显降低；而细胞中２．４ｋｂ／２．１ｋｂ ＲＮＡ、３．５ ｋｈ／３．４ ｋｂ ＲＮＡ亦分别降低３１．６％及７０．２％。结论 ＴＦＯ２０通过脂质体包裹后可以很好地进入细胞并与ＨＢＶ ＤＮＡ结合；ＴＦＯ２０能?
- 高勇罗端德蔡淑清曾令兰李淑莉
- 关键词：乙型肝炎病毒HBV病毒复制
- 商陆抗病毒蛋白对感染细胞模型中HCV复制的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨商陆抗病毒蛋白(PAP)对丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞模型中HCV复制的影响。方法:用不同浓度PAP处理HCV感染细胞模型(HCV-HepG2),以荧光定量PCR法检测培养上清液中及细胞内HCV RNA,以不同浓度的α-2b干扰素(IFNα-2b)处理同样的细胞模型作为对照。结果:经PAP处理后各模型组细胞内HCVRNA含量于48小时、96小时和144小时进行比较,差异有非常显著性意义(P<0·01);培养上清液中HCV RNA含量在48小时时,各组间比较,差异无显著性意义(P>0·05),但在96小时和144小时时,各组间比较差异有非常显著性意义(P<0·01)。PAP对HCV的抑制作用随PAP浓度的增加而增强,以100μg/ml浓度的抑制作用最强。用IFN-α2b处理HCV-HepG2模型亦得出类似的结果。两者均以第48小时的抑制率最高。但在96小时、144小时时PAP对细胞内HCV的抑制作用明显强于IFN(P<0·05,P<0·01)。结论:PAP对HCV感染细胞模型中的HCV复制有明显地抑制作用,且作用强于IFN-α2b。PAP对细胞无明显毒性。
- 陈瑞烈林少锐李忆璇郑晓丹贺永文高勇杨小铭罗端德
- 关键词：丙型肝炎病毒干扰素
- 丙型肝炎病毒体外感染Hep G_2细胞的研究被引量：1
- 2005年
- 目的 建立接近体内自然感染状态并能长期复制的丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞模型。方法 用HCVRNA阳性血清感染人肝癌细胞株HepG2 ,培养6 0d ,用套式逆转录聚合酶链反应(nestedRT PCR)检测培养细胞及上清中正、负链HCVRNA。结果 HepG2 在感染后第2～30天,细胞中可以间断检出HCV正链RNA ;负链RNA在感染后第3～30天可以间断检出,检出率与正链RNA接近。在第31～6 0天仍可间断检出HCVRNA正、负链,但检出率逐渐降低。HepG2 培养上清中HCV正链RNA感染后也呈间断阳性,检出率与细胞内正链RNA基本一致。培养上清中均未检出HCV负链RNA。结论 HepG2 细胞对HCV易感,并能支持HCV长期复制,HepG2 细胞是较为理想的HCV体外感染细胞模型。
- 陈瑞烈贺永文高勇李淑莉杨小铭罗端德
- 关键词：体外感染HEP人肝癌细胞株负链正链
- 丙型肝炎病毒对SMMC 7721细胞体外直接致病作用的研究被引量：3
- 2002年
- 目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)的直接致病作用。方法:用HCV阳性血清体外感染SMMC 7721细胞,观察细胞形态的变化,并运用四甲基偶氮唑盐(MTT)法及流式细胞仪(FCM)分别检测培养细胞的存活率及凋亡率,同时用套式逆转录-聚合酶链反应(nest RT-PCR)检测其中的正、负链HCV RNA。结果:HCV感染后部分SMMC7721细胞发生皱缩、脱壁,8h细胞存活率为74.2％,细胞凋亡率为18.7％,至56h后细胞存活率回复至84.3％以上,而细胞凋亡率又降至7.4％以下;各时间组的细胞存活率显著低于未感染HCV的SMMC7721细胞,而凋亡率则显著高于未感染的SMMC 7721细胞。感染后24h细胞及上清中HCV RAN检测结果均阴性,48h后在细胞中可检出正、负链HCV RNA,96h后细胞中HCV RNA正链呈阳性、负链转为阴性。结论:1.HCV具有一定的直接致病作用;2.HCV感染SMMC7721后的复制不稳定。
- 陈瑞烈贺永文高勇李淑莉郭劲松杨小铭
- 关键词：丙型肝炎病毒致病作用SMMC体外感染细胞凋亡
- 核苷类似物抗HIV的研究进展被引量：18
- 2001年
- 近年来,抗HIV药物的研究取得了巨大的进步,先后出现了多种有效的药物。本文综述了国外核苷类似物抗HIV的研究情况,分别从其临床应用、作用机制、药代动力学、毒副作用及耐药性几个方面作了介绍。
- 高勇
- 关键词：核苷类似物齐多夫定拉米夫定去羟肌苷
- PCR-SSCP法检测乙型肝炎病毒前C区基因变异被引量：2
- 2002年
- 为探索一种快速、简便检测乙型肝炎病毒 (HBV)前 C区基因变异的方法 ,用聚合酶链反应 (PCR)技术扩增 94例乙肝患者血清 HBV前 C区基因片断 ,阳性扩增产物用单链构象多态性 (SSCP)法进行检测 ,对具有不同特征性电泳图谱的 PCR产物再以直接测序法加以核定 ,以辨别不同图谱与野生株、变异株或野生株、变异株混合感染之间的关系。结果显示 :有 86例患者 HBV前 C区 PCR扩增阳性 ,SSCP法检测发现有 3种常见的特征性电泳图谱 ,测序后证实 ,它们分别代表了野生株、变异株 (nt1896位 G→ A)及野生株、变异株混合感染的 SSCP图谱 ;在某些变异株图谱中 ,尚可见其它位点也存在变异 ,其中以 nt1899位 G→ A突变最为常见。提示 :以 PCR- SSCP技术检测 HBV前C区变异具有敏感性高 ,特异性强 ,简单、快捷、价廉等优点 ,而且特别适用于大样本的筛检 ,因此有应用价值 。
- 朱传武罗端德曾令兰李淑莉李伟高勇
- 关键词：聚合酶链反应单链构象多态性乙型肝炎病毒
