于彬
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：吉林大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 多巴胺能神经营养因子真核表达、纯化及多克隆抗体制备被引量：1
- 2015年
- 目的:获得具有活性的脑多巴胺能神经营养因子(CDNF)蛋白并制备CDNF多克隆抗体。方法:选用VR1012作为真核表达载体,在HEK293T细胞中表达带有his标签的CDNF蛋白,镍柱亲和层析进行纯化,SDS-PAGE检测纯化情况,Western blot鉴定蛋白的正确性,MTT检测CDNF蛋白对PC12细胞的保护活性。免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。结果:构建的p VR1012-CDNF-his在HEK 293T细胞中高效分泌表达,镍柱亲和层析获得纯度90%以上的CDNF蛋白,MTT结果显示纯化获得的蛋白具有对PC12细胞的保护作用。免疫动物后,成功制备出CDNF多克隆抗体。结论:通过HEK293T细胞中表达-镍柱亲和层析获得具有纯度较高且具有生物活性的CDNF蛋白,并成功制备多克隆抗体以方便后续对于CDNF应用及相关机制的研究。
- 王立正王子璇朱瑞刘镇天于彬于湘晖赵兴红
- 关键词：多克隆抗体帕金森病
