刘启文
- 作品数：10 被引量：18H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用PCR扩增技术检测卡氏肺孢子虫DNA被引量：8
- 1995年
- 本文报道了用ＰＣＲ扩增技术检测卡氏肺孢子虫感染大鼠的肺组织、支气管灌洗液和外周血病原体ＤＮＡ，并和肺印片结果进行比较。共检测了实验感染鼠３４只及正常大鼠６只，肺印片阳性者１８例，ＰＣＲ检测肺组织样品出现特异的扩增条带者１９例，检测支气管灌洗液样品出现特异的扩增条带者１６例，外周血样品全部阴性。根据实验结果，认为此法用于检测卡氏肺孢子虫病原体ＤＮＡ有很好的应用前景。
- 余海昕邝丽贤刘启文
- 关键词：多聚酶链反应卡氏肺孢子虫孢子虫DNA
- 日本血吸虫cDNA文库的免疫筛选和融合蛋白的表达被引量：5
- 1997年
- 沈定文詹希美刘启文
- 关键词：日本血吸虫基因文库疫苗抗原
- 三种方法对日本血吸虫抗原cDNA克隆的筛选和鉴定
- 1997年
- 利用融源表达、平板裂解法和PCR扩增三种不同方法分别对日本血吸虫抗原cDNA基因进行鉴定和分析,8个免疫筛选阳性克隆均能在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达,表达蛋白分子量为140～150kDa,抗原cDNA基因经限制性内切酶EcoRI酶解后,琼脂糖凝胶电泳显示其大小为700～900bp,PCR能扩增出特异性条带。结果表明,上述三种方法能从蛋白质和核酸水平有效地鉴定血吸虫抗原cDNA基因。
- 沈定文罗金萍詹希美刘启文王燕妮
- 关键词：日本血吸虫抗原CDNA
- 日本血吸虫重组抗原保护性免疫力的诱导被引量：2
- 1996年
- 采用日本血吸虫重组抗原加福氏佐剂免疫小鼠,攻击感染后,不仅可减少虫负荷(减虫率为29.2％—51.0％),还可降低血吸虫雌虫的产卵量(减卵率为52.1％—74.3％),抗体滴度在初次免疫后3wk即显著升高,并持续维持较高水平。结果表明,经大肠杆菌表达的日本血吸虫重组抗原能够诱导抗攻击感染的保护性免疫力,可望作为混合多价疫苗的候选组分。
- 沈定文詹希美刘启文练丙生
- 关键词：日本血吸虫重组抗原保护性免疫力
- 鉴定日本血吸虫cDNA阳性克隆三种方法的比较
- 1996年
- 本文利用融源表达、平板裂解法和PCR扩增对日本血吸虫cDNA阳性克隆进行鉴定。所有8个阳性克隆均能在宿主菌大肠杆菌Y1089中表达,PCR能扩增出特异性条带,cDNA阳性克隆经限制性核酸内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳后,显示为700-900bp。结果表明,我们所采用的三种方法均能有效地鉴定日本血吸虫阳性克隆。
- 沈定文李云詹希美刘启文
- 关键词：日本血吸虫阳性克隆PCR扩增限制性核酸内切酶琼脂糖凝胶电泳
- 日本血吸虫成虫抗原基因的克隆和序列分析被引量：1
- 1997年
- 本实验在用感染兔血清和单克隆抗体对日本血吸虫（大陆株）成虫ｃＤＮＡ表达文库进行筛选的基础上。
- 陈代雄刘启文詹希美
- 关键词：克隆日本血吸虫抗原基因
- 日本血吸虫(大陆株)融合蛋白保护性免疫力的研究
- 1996年
- 采用日本血吸虫(大陆株)融合蛋白加福氏佐剂免疫小鼠,攻击感染后,不但可减少虫负荷(减虫率为29.2—51.0%),还可降低血吸虫雌虫的产卵量(减卵率为52.1—74.3%),血清抗体在初次免疫后3周即明显升高,并持续维持较高的水平。结果表明,经大肠杆菌表达的日本血吸虫重组融合蛋白能诱导抗攻击感染的保护性免疫力,可望作为混合多价疫苗的候选组份而大规模的生产。
- 罗金萍沈定文詹希美刘启文
- 关键词：日本血吸虫保护性免疫力重组融合蛋白免疫后雌虫
- 日本血吸虫感染过程抗原定位的动态变化研究被引量：1
- 1996年
- 本实验用ＩＦＡ方法，用日本血吸虫感染过程中的各期兔血清进行了成虫和虫卵的抗原定位研究，以观察抗原的定位随感染进程的动态变化。结果表明，用Ｒｏｓｓｍａｎ＇ｓ固定液固定的成虫石蜡切片的抗原定位及反应强弱依次为肠管壁、间质和皮层。雄性生殖系统，如睾丸可见荧光反应。雌性生殖系统未见荧光反应。雄虫的反应强度比雌虫强，尤其在间质部位最明显。成虫冰冻切片抗原定位反应最强的部位在皮层。间质较弱，肠管壁几乎阴性。对病鼠肝内虫卵抗原定位结果显示，石蜡切片抗原从感染后第４周起可见定位在虫卵内毛蚴的顶腺、侧腺及卵黄膜、卵间隙和卵壳上。顶腺和侧腺的阳性反应最强。第五周开始可见卵周有何博礼现象。冰冻切片的抗原也在第四周开始出现，定位在卵黄膜及卵壳上。
- 何蔼刘启文容瓘何书明
- 关键词：日本血吸虫免疫荧光抗原定位
- 用抗体探针筛选日本血吸虫成虫cDNA文库被引量：3
- 1995年
- 本文将重组体噬菌斑的表达抗原转移至硝酸纤维素膜上，用经假筛选法纯化的日本血吸虫感染兔血清（IRS）来检测。结果6×10^5个噬菌班形成单位（pfu）初筛出23个可能阳性噬菌斑，经再次筛选，其中有8个克隆持续出现阳性。结果表明该免疫筛选能有效地分离单个编码日本血吸虫抗原的克隆，筛选效率高，特异性强，不需同位素标记技术，操作简便，为进一步筛选编码诱导日本血吸虫保护性免疫力的抗原基因打下了基础。
- 沈定文罗金萍詹希美刘启文
- 关键词：日本血吸虫菌斑抗体保护性免疫力CDNA文库重组体
- 日本血吸虫抗原cDNA基因的鉴定和分析
- 1997年
- 采用3种不同的方法（融源表达、平板裂解法和PCR检测）对日本血吸虫抗原CDNA克隆进行鉴定和分析，8个免疫筛选阳性克隆均能在大肠杆菌Y1089中表达．表达产物分子量为140－150kDa，抗原cDNA基因经限制性内功酶消化后，琼能糖凝胶电泳显示为700－900bp，PCR检测亦得出类似的结果。表明上述三种方法均能有效地鉴定日本血吸虫抗原cDNA基因。
- 沈定文詹希美刘启文
- 关键词：日本血吸虫抗原CDNA基因血吸虫病疫苗
