吴军
- 作品数：133 被引量：213H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- EBOV三聚体糖蛋白在新型糖基工程酵母中的表达与纯化
- 2017年
- 目的用新型糖基工程酵母表达并纯化得到具有类似哺乳动物细胞糖基化修饰的埃博拉病毒三聚体糖蛋白(EBOV-GP),为其亚单位疫苗研究提供基础。方法人工合成EBOV-GP基因,将编码全长EBOV-GP基因和编码缺失黏蛋白样域(MLD)与穿膜区的EBOV-GPΔMLDΔTM基因分别克隆到pPICZ-αA载体上,电转化糖基工程酵母,与在HEK-293T细胞中表达的EBOV-GP进行比较,利用PNGaseF和EndoH酶切分析其糖基化修饰,利用亲和层析与离子交换层析纯化目的蛋白,蛋白质N端测序分析其在蛋白翻译修饰过程中是否正确切除了信号肽,同时利用凝胶柱分析是否能形成三聚体结构。结果 PNGaseF酶切结果显示,用糖基工程酵母和HEK-293T细胞表达的EBOV-GP糖蛋白相对分子质量大小与N-糖基化程度均一致,EndoH酶切显示EBOV-GPΔMLDΔTM的N-糖基化修饰是非高甘露糖形式的复杂型糖基化修饰;经三步纯化得到的目的蛋白,N端测序显示为GP蛋白成熟肽序列,其自身信号肽被正确切除;凝胶柱分析显示纯化得到的目的蛋白以三聚体形式存在。结论用糖基工程酵母表达制备了具有复杂型糖基化修饰的EBOV-GP。
- 吴慕胜巩新唱韶红刘波吴军
- 关键词：埃博拉病毒表达纯化
- 过表达RimL的大肠杆菌及其在制备N-乙酰化胸腺素α中的应用
- 本发明公开了一种过表达RimL的大肠杆菌及其在制备N-乙酰化胸腺素α中的应用。本发明提供了一种重组菌，为将RimL的编码基因和胸腺素α的编码基因导入宿主菌中得到的重组菌。本发明的实验证明，本发明构建了N-乙酰基转移酶Ri...
- 吴军刘波巩新唱韶红马清钧
- 长效蛋白药物研究进展被引量：2
- 2009年
- 基因工程蛋白和多肽药物是第一代基因工程药物的主体，已广泛应用于临床，但这类药物的血浆半衰期一般只有数十分钏至数小时，疾病治疗时往往需要反复频繁注射，
- 吴军马清钧
- 关键词：修饰
- 血清白蛋白与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的融合蛋白
- 本发明公开了一种血清白蛋白与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的融合蛋白，编码融合蛋白的DNA序列，携带该DNA序列的重组表达载体及被重组表达载体转化的细菌、酵母、动物细胞、植物细胞；本发明的融合蛋白包括与人血清白蛋白至少85％...
- 吴军唱韶红巩新马清钧
- 文献传递
- 一种细菌多糖结合疫苗的载体蛋白及其应用
- 本发明公开了一种细菌多糖O糖基化修饰的重组霍乱毒素B亚单位融合蛋白及其应用。本发明提供了一种多糖和蛋白的偶联物，由细菌多糖和重组霍乱毒素B亚单位融合蛋白偶联而成；所述细菌多糖以O-糖苷键形式连接在所述重组霍乱毒素B亚单位...
- 吴军孙鹏王恒樑潘超刘波朱力唱韶红巩新曾明
- 文献传递
- 用糖基工程酵母制备具有动物细胞糖基化修饰流感血凝素糖蛋白的方法
- 本发明公开了用糖基工程酵母制备具有动物细胞糖基化修饰流感血凝素糖蛋白的方法。本发明提供的方法，包括如下步骤：使流感病毒的血凝素HA基因在酵母突变体中表达，得到重组酵母；将所述重组酵母培养，制备得到具有哺乳动物糖型结构且无...
- 刘波吴军巩新唱韶红王莎马清钧
- 分泌表达rhOPG-HSA融合蛋白的毕赤酵母菌株的构建被引量：5
- 2009年
- 目的:将骨保护素(osteoprotegerin,OPG)与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)基因融合,以构建高效分泌表达的巴斯德毕赤酵母菌株。方法:通过RT-PCR扩增OPG基因,构建pHILD2-HSA-OPG质粒,并对HSA-OPG分泌表达产物进行了ELISA检测。结果:pHILD2-HSA-OPG表达质粒经鉴定与测序证明正确,并在毕赤酵母GS115中能够实现较高表达。结论:成功构建了高效分泌表达重组骨保护素融合蛋白(rhOPG-HSA)的毕赤酵母菌株,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。
- 刘俊丽张建中路浩军刘波司少艳施生根吴军马清钧
- 关键词：血清白蛋白基因表达
- 血清白蛋白与粒细胞集落刺激因子的融合蛋白
- 本发明公开了一种血清白蛋白与粒细胞集落刺激因子的融合蛋白，编码融合蛋白的DNA序列，携带该DNA序列的细菌、酵母、动物细胞、植物细胞；本发明的融合蛋白包括与人血清白蛋白至少85％序列同源的第一区和与人粒细胞集落刺激因子至...
- 吴军唱韶红巩新马清钧
- 文献传递
- 用酵母制备三聚体埃博拉病毒糖蛋白突变体的方法
- 本发明公开了一种用酵母制备三聚体埃博拉病毒糖蛋白突变体的方法。该方法包括如下步骤：1)将编码埃博拉病毒糖蛋白突变体(缺失了黏蛋白样区域和C‑端穿膜区的博拉病毒糖蛋白)的基因导入受体酵母细胞中，得到重组酵母细胞；2)对重组...
- 吴军吴慕胜刘波
- 利用异源启动子控制大肠杆菌基因组N-乙酰基转移酶表达重组菌及应用
- 本发明公开了一种利用异源启动子控制大肠杆菌基因组N-乙酰基转移酶表达重组菌及应用。本发明提供的重组菌，为将外源诱导型启动子插入宿主菌的乙酰基转移酶编码基因的上游，用于启动所述乙酰基转移酶编码基因的表达，得到的重组菌。本发...
- 刘波吴军唱韶红巩新马清钧
