周建华
- 作品数：121 被引量：155H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金哈尔滨市科技攻关计划项目黑龙江省发展高新技术产业专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学理学更多>>
- 感染马传染性贫血病毒的巨噬细胞差异表达蛋白质组分析
- 马传染性贫血病毒(EIAV)系逆转录病毒科，慢病毒属的一种线状单股正链RNA病毒，感染马属动物。目前对EIAV感染机制的研究主要集中在基因组学及病毒毒力和免疫原性方面，即通过反向遗传操作技术，免疫学实验等方法分析基因的组...
- 杜承刘海芳林跃智王雪峰周建华
- 马属动物cyclinT1基因的扩增与真核表达载体的构建
- 2009年
- 在慢病毒复制过程中cyclinT1(CycT1)是重要的辅助因子。为了揭示慢病毒的复制机理,试验使用RT-PCR方法扩增马和驴的cyclinT1基因,并进行克隆和序列分析,然后用DNASTAR(MegAlign)软件将测得的序列和国外发表的马属动物CycT1序列(GenBank中登录号为AF137509和AF190905)进行同源性比较。结果表明:马属动物CycT1大小为2184bp,编码727个氨基酸;4种CycT1基因氨基酸同源性在98%以上;将扩增出的马CycT1基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经酶切及测序鉴定证实成功构建了pcDNA3.1(+)/eCycT1重组质粒。
- 史楠赵立平吕晓玲马建周建华
- 关键词：克隆真核表达载体
- EIAV弱毒疫苗株和强毒株诱导的特异性体液免疫应答差别被引量：2
- 2009年
- 目的:通过研究EIAV弱毒疫苗株和强毒株在诱导多种特异性抗体方面的差异,初步探讨特异性体液免疫应答在EIAV弱毒疫苗株保护性免疫中的作用。方法:试验马匹根据接种毒株分为疫苗组和强毒隐性感染组,应用ELISA方法对血清中病毒囊膜蛋白Env和衣壳蛋白P26结合抗体的滴度、亲和力及Env结合抗体的构象依赖性进行动态实相检测,同时采用细胞蚀斑染色和逆转录酶活性检测方法对中和抗体水平进行同期检测。结果:Env和P26结合抗体的滴度、亲和力、构象依赖性及中和抗体的中和活性均存在一个缓慢上升的过程。对于P26抗体滴度及Env抗体亲和力,疫苗组和强毒隐性感染组仅在病毒接种2个月内,表现为统计学差异(P<0.05)。疫苗组从接种后14d开始,Env抗体的构象依赖性高于强毒隐性感染组(P<0.05),并持续至最后一个监测点。最明显的是,疫苗组诱导产生具有中和强毒特性毒株(EIAVDLV34)和弱毒特性毒株(EIAVFDDV)活性的中和抗体均高于强毒隐性感染组(P<0.05)。结论:弱毒疫苗株和强毒株诱导机体产生结合抗体和中和抗体的时间、水平和性质均存在明显差异,其中中和抗体和构象依赖性抗体的差异,可能是EIAV弱毒疫苗诱导保护性免疫的主要因素之一。
- 朱振营林跃智王宇宏赵立平朱远茂周建华
- 关键词：马传染性贫血病毒弱毒疫苗株抗体亲和力中和抗体
- 马传染性贫血发病过程中细胞毒性T细胞的作用及其表位研究进展
- 2007年
- 马建孔宪刚沈荣显周建华
- 关键词：马传染性贫血病毒细胞毒性发病过程猴免疫缺陷病毒EIAV
- 抗病毒免疫因子Viperin的研究进展被引量：4
- 2015年
- 先天免疫因子Viperin是一种功能与内质网相关的抗病毒蛋白,可被干扰素、多种病毒、细菌脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)和poly(I:C)等诱导表达。Viperin通过与病毒蛋白和某些细胞内蛋白的相互作用抑制病毒增殖,具有广谱抗病毒活性。在与宿主相互作用的长期进化过程中,某些病毒能够抑制细胞内Viperin的表达,逃逸其抗病毒功能。除抗病毒作用外,Viperin还具有其他一些生物学功能。近年来有关Viperin的研究,特别是在其抗病毒机理方面,进展较快,本文结合自身研究体会,就其基本特性和研究状况做一介绍。
- 朱春辉汤艳东徐方周建华
- 关键词：抗病毒蛋白细胞膜宿主蛋白相互作用
- 马传染性贫血病毒LTR在驴胎皮肤细胞中的基因进化及启动子活性比较
- 将EIAV驴白细胞弱毒疫苗株在驴胎皮肤细胞中连续传代，分别提取第13、18、21、23、26代病毒培养物的前病毒DNA，以LTR特异性引物PCR扩增前病毒LTR，并进行克隆及测序分析。与本实验室已测定的驴白细胞毒株LTR...
- 全滟平韩秀娥沈楠赵立平周建华沈荣显相文华
- 关键词：基因进化启动子活性
- 马传染性贫血病毒强毒株gag和gp45基因的体内进化分析
- 2012年
- 为研究马传染性贫血病毒(EIAV)强毒株体内进化规律,将3匹马分别以1×105 TCID50/匹接种EIAVLN40强毒株后,在不同时间点采取外周血,分离单核白细胞。提取白细胞中的DNA,并以其为模板,应用套式PCR技术分别扩增EIAV前病毒DNA的p15,p9和gp45基因,经克隆后进行序列分析。结果显示,与接种前EIAVLN40相比较,p15基因核苷酸和氨基酸平均差异率分别为1.8%(0～2.9%)和1.7%(0～3.6%);p9分别为2.5%(0.3%～3.8%)和2.9%(0～4.8%);gp45-Ⅰ分别为1.3%(0.3%～2.1%)和1.8%(0～3.2%),gp45-Ⅱ分别为2.1%(0～3.4%)和2.6%(0～4.7%)。在EIA发热期,每个基因核苷酸和氨基酸差异率最小;在亚临床阶段,每个基因平均差异率总体上相对较高。氨基酸变异位点分析发现,发病期(2-2、3-1)各基因氨基酸序列回复到亲本株EIAVLN40,其余时期p15基因氨基酸稳定变异位点16N/S、88T/S和112M/E;p9基因115E/G和122K/M;gp45-Ⅰ基因9T/F/L;gp45-Ⅱ基因21E/K和29G/S。此外,p15基因进化树结果显示,发热期(2-2、3-1)p15基因序列与EIAVLN40序列处于同一分支上,亚临床阶段大多数p15基因序列处于另一个大分支上;其他基因进化情况与p15基因类似。对EIAV p15、p9、gp45基因体内进化分析,有助于对EIAV在马体内感染进程的研究,为进一步研究EIAV持续感染和逃避免疫监视的机制提供参考。
- 刘强王雪峰王珊珊韦华冕杜承林跃智马建周建华王凤龙
- 关键词：马传染性贫血病毒P15基因
- S2基因失活突变马传染性贫血病毒感染性克隆的构建及感染性研究被引量：2
- 2010年
- 为研制马传染性贫血病毒(EIAV)标记疫苗株,本研究在EIAV驴胎皮肤(FDD)细胞弱毒疫苗株感染性克隆pEIAVFDDV3-8的S2基因内部引入两个终止密码子,致使S2基因终止表达,构建了一株S2基因突变的感染性克隆pEIAVFDDV3-8△S2。用该重组质粒转染FDD细胞,盲传至第4代时,转染细胞病变明显,电镜下可见细胞内的典型病毒颗粒。反转录酶活性检测和Real-time PCR对病毒拷贝数的检测均证明,获得了EIAVS2基因终止表达的感染性克隆毒株,命名为EIAVFDDV3-8△S2。
- 耿庆华郭巍赵立平吕晓玲相文华周建华
- 关键词：马传染性贫血病毒感染性克隆
- 马传染性贫血病毒p26蛋白单克隆抗体的制备被引量：1
- 2011年
- 为制备马传染性贫血病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的EIAVp26蛋白作为免疫原免疫8周龄的BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,建立抗EIAV衣壳蛋白p26抗体的杂交瘤细胞。应用重组p26蛋白为抗原建立ELISA筛选方法,获得两株能够稳定分泌特异性MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为E11和F8。经试验证明,这些抗p26MAb均能够与感染驴胎皮肤细胞的EIAV和经SDS-PAGE分离的EIAV总蛋白中的p26蛋白结合。这两株p26蛋白MAb的获得将为EIAV的检测及鉴别诊断奠定基础。
- 韩秀娥张萍王雪峰李萌魏萍周建华尹杰超
- 关键词：马传染性贫血病毒单克隆抗体
- 诊断马流感病毒和鉴定其亚型的多重RT－PCR方法
- 本发明公开了一种诊断马流感病毒(EIV)和鉴定其亚型的多重RT－PCR方法，包括：以待检样品RNA为模板，以SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4两组核苷酸序列为多...
- 郭巍戴伶俐李雪峰赵利平相文华周建华
- 文献传递
