孙彩军
- 作品数：8 被引量：28H指数：3
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- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学更多>>
- 壳聚糖-铜离子有序凝聚体的形貌
- 2004年
- 用原子力显微镜对自然风干后的壳聚糖絮凝剂富集铜离子后的样品在非接触模式下进行观察。结果表明 ,在未完全脱水时 ,由壳聚糖 铜离子形成的胶粒有较规则的排列。脱水后的样品中 ,壳聚糖 铜离子胶粒进一步聚集 ,形成较为规则的由一些小颗粒堆积而成的环形凝聚体。铜离子被络合的过程可能类似于以颗粒为组成单元的螺旋盘绕过程。而浓度较大的样品中则形成由胶粒组成的规则圆盘 ,其直径在 3 5～ 5 0 μm之间。
- 王彬蔡继业冯倩杨培慧梁志红曾谷城孙彩军
- 关键词：壳聚糖铜离子原子力显微镜
- 用AFM对质粒DNA在云母表面的自组装研究被引量：1
- 2004年
- 通过原子力显微镜(AFM)对在云母表面上自然挥干的不同质量浓度的质粒DNA分子进行扫描,原子力显微镜图像显示:当质量浓度为0 1μg/mL时,DNA分子呈现出线性结构,随着质量浓度加大至1μg/mL,DNA分子相互缠绕为网状结构,质量浓度为10μg/mL时,呈现出具有典型的聚合形态,当质量浓度进一步加大到100μg/mL,则呈现出明显的树状脉络结构.通过原子力显微镜对质粒DNA分子的形态表征,可以看出质粒DNA分子具有典型的自组装的特性.
- 王彬蔡继业孙彩军冯倩曾谷城梁志红潘善培
- 关键词：原子力显微镜脱氧核糖核苷酸自组装形态学
- 壳聚糖-卵透明带DNA纳米微囊的制备及其体外表达被引量：4
- 2004年
- 目的:发展壳聚糖-卵透明带口服DNA粘膜免疫避孕疫苗.方法:首先利用基因工程技术构建含卵透明带特异抗原pZP3αDNA的真核质粒表达载体pVAX1-pZP3α,然后用壳聚糖C390包被pVAX1-pZP3α重组质粒制备免疫微囊,测定免疫微囊对质粒DNA的包裹率,用原子力显微镜(AFM)观察壳聚糖-DNA微囊的形态结构,并体外转染HeLa细胞,用间接免疫荧光法(IIF)检测pZP3α的瞬时表达.结果:pZP3αDNA正确插入到载体pVAX1中并与壳聚糖C390形成纳米免疫微囊,对重组质粒pVAX1-pZP3α的包裹率达90%以上.AFM成像技术显示这些微囊的直径为100nm到300nm不等,平均为224 6nm,形状为球形、椭圆形等.体外转染HeLa细胞用IIF法检测到了抗原pZP3α在细胞内的表达.结论:壳聚糖-卵透明带口服DNA纳米免疫微囊制备成功,为进一步发展更安全、方便、有效的卵透明带DNA避孕疫苗打下了基础.
- 孙彩军潘善培王彬谢琪璇肖銮娟唐键蔡继业
- 关键词：卵透明带DNA疫苗壳聚糖纳米微囊免疫避孕
- 猪卵透明带ZP3α真核表达载体的构建及体外瞬时表达被引量：3
- 2004年
- 目的 :构建猪卵透明带ZP3α真核表达载体 ,为探讨卵透明带DNA疫苗避孕疫苗奠定基础。方法 :采用PCR法获得了去除N端信号肽序列和C端跨膜区序列的猪卵透明带ZP3α的cDNA序列片段 ,以专门用于发展DNA疫苗的质粒pVAX1为载体构建了真核细胞表达质粒pVAX1-pZP3α。通过脂质体转染将之导入HeLa细胞进行体外瞬时表达 ,然后采用RT -PCR和间接免疫荧光技术 (IIF)检测pZP3α在mRNA水平的转录和蛋白质水平上的表达。结果 :真核细胞表达质粒pVAX1-pZP3α构建成功 ,用RT -PCR和IIF技术检测到了pZP3α在HeLa细胞中的转录与表达。结论 :真核表达载体pVAX1-pZP3α的成功构建和表达为研制开发有效的人用卵透明带DNA避孕疫苗奠定了基础。
- 孙彩军潘善培谢琪璇肖銮娟唐键
- 关键词：猪卵透明带DNA疫苗免疫避孕
- 小鼠口服猪卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α的抗生育研究被引量：4
- 2004年
- 目的:评价口服卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒诱发的黏膜免疫反应、抗生育作用和对卵巢结构的影响,探讨用黏膜免疫避免卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的可行性。方法:制备pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒,10只昆明系小鼠口服免疫,第3周和第6周分别加强免疫一次,剂量为0 5mL/只,含pVAX1-pZP3αDNA50μg;对照组10只雌小鼠口服相同剂量不含pVAX1-pZP3α的壳聚糖。免疫前和免疫后隔周取小鼠血清、阴道冲洗液,用ELISA法检测抗pZP3IgA和IgG。首次免疫后第12周雌雄合笼交配,统计雌鼠怀孕情况;解剖取出双侧卵巢,制作石蜡切片,光镜观察卵巢病理学变化。结果:免疫组80%小鼠的血清和50%小鼠的阴道冲洗液可检测到抗pZP3IgA,反应强度与持续时间有明显的个体差异;免疫组5只小鼠未怀孕,对照组全部怀孕,抗生育效果与合笼时抗pZP3IgA反应有关;免疫组未怀孕小鼠卵巢组织结构与免疫组怀孕小鼠及对照组小鼠无差别。结论:口服pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒免疫小鼠能诱发生殖道黏膜免疫反应,发挥抗生育作用,对卵巢组织结构没有影响。黏膜免疫是克服卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的一种值得深入研究的方法。
- 董志炜潘善培谢琪璇肖銮娟孙彩军余巍何柳媚
- 关键词：卵透明带避孕疫苗
- 壳聚糖/卵透明带DNA口服避孕疫苗的研究
- 为探讨卵透明带DNA疫苗诱发输卵管局部粘膜免疫以阻断受精从而避免全身性免疫引起卵巢功能紊乱的可行性,本研究首先采用PCR法获得了去除N端信号肽序列和C端跨膜区序列的猪卵透明带ZP3 α(pZP3 α)的cDNA序列片段,...
- 孙彩军
- 关键词：卵透明带免疫避孕粘膜免疫壳聚糖纳米微球
- 文献传递
- 重组人卵透明带ZP3蛋白在毕赤酵母中的表达被引量：16
- 2003年
- 利用P .pastoris表达人卵透明带ZP3蛋白。设计特定引物从全长hZP3cDNA上扩增含跨膜区序列的人卵透明带ZP3基因片段 ,并在N末端接上串联组氨酸编码序列的重组基因序列 ;扩增片段插入表达载体pPIC9K中 ;线性化后的重组质粒转入P .pastoris中 ,用高浓度G4 18筛选高拷贝菌株 ,然后甲醇诱导目的蛋白表达。用SDS PAGE和Westernblot分析表达产物。结果发现P .pastoris表达的人ZP3蛋白可以分泌到培养液中 ,并且可溶性好。纯化前后的重组人ZP3蛋白均能与兔抗猪ZP3蛋白抗体发生交叉反应 ,证实表达的目的蛋白具有反应原性。
- 唐键谢琪璇潘善培肖銮娟董鲁张春雪孙彩军
- 关键词：毕赤酵母
- 中国猕猴预存抗腺病毒中和抗体滴度对腺病毒体外感染单核细胞效率的影响被引量：1
- 2008年
- 为了探索通过血液系统利用重组腺病毒载体的方法,以中国猕猴为动物模型,以复制缺陷型人5型腺病毒(human adenovirus serotype 5,HAd 5)为载体携带报告基因在体外直接感染外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)。首先对HAd5在体外感染PBMC的条件进行优化,证实离心力可提高HAd5的感染效率;细胞分群结果表明HAd5特异感染PBMC中的CD14+单核细胞,仅感染小部分自然杀伤细胞,但几乎不感染T淋巴细胞和B淋巴细胞。首次发现:猕猴体内预先存在的抗HAd5中和抗体滴度越高,其单核细胞在体外对HAd5的易感性越强。这种现象将拓宽基于腺病毒载体的基因治疗和疫苗的临床应用范围,尤其是对预先存在腺病毒中和抗体的人群更具意义,为探索更方便有效的基因治疗和疫苗研究带来新的思考。
- 庄秋传孙彩军李锋冯立强刘宜楚陈凌
- 关键词：单核细胞腺病毒中和抗体体外感染离心
