张妮
- 作品数：14 被引量：47H指数：4
- 供职机构：广东省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学金属学及工艺更多>>
- 应用16S rRNA基因序列分析与细菌生化反应鉴定湖生代夫特菌被引量：4
- 2013年
- 目的对某医院术后感染中分离到的4株不常见病原菌进行菌种鉴定。方法采用16SrRNA基因序列的测定、细菌形态学以及商品化的VITEK-2GN、API 20NE系统相结合的多相分类学方法。结果该4株菌均为需氧的革兰阴性非发酵菌,其氧化酶阳性,在血平板、巧克力平板、麦康凯平板等常用培养基上生长良好;采用VITEK-2GN与API 20NE系统,该4株菌均鉴定为食酸代夫特菌/食酸丛毛单胞菌,并显示为极好的鉴定度;但16SrRNA基因序列分析的结果显示,该4株菌与食酸代夫特菌的相似度仅为98.4%,而与鹤原代夫特菌、湖生代夫特菌的同源性更高,分别为99.9%和100.0%;其甘露醇同化试验与苹果酸同化试验阳性,与湖生代夫特菌一致而不同于鹤原代夫特菌。结论该术后感染的4株病原菌均为湖生代夫特菌,16SrRNA基因序列分析能提供有力的遗传学证据。
- 陈茶屈平华黄彬刘建平张妮袁慧
- 关键词：RNA核糖体RRNA
- K562细胞分泌exosomes的观察及膜表面标志分子CD63的克隆
- 2013年
- 目的观察K562细胞分泌的外泌体exosomes。构建CD63与绿色荧光蛋白融合蛋白载体,并在K562细胞中表达。方法采用梯度离心的方法分离K562细胞培养上清中的exosomes,并用扫描电镜观察。构建pEGFP-N1-CD63重组质粒,以不同方式转染至K562细胞,观察表达效率的差异。结果质粒pEGFP-N1-CD63经测序鉴定,通过激光共聚焦显微镜观察,能够在K562细胞中表达。Amaxa核转染的效率高于脂质体转染的方式。结论成功构建pEGFP-N1-CD63质粒并在K562细胞中表达,可对exosomes进行示踪,为后续实验奠定基础。
- 王丽娜曾建明张妮陈树林王前郑磊司徒博陈茶
- 关键词：EXOSOMESCD63
- 希瓦氏菌整合温和噬菌体片段编码的缺口酶及其应用
- 本发明涉及本发明涉及生物技术领域，具体涉及希瓦氏菌整合温和噬菌体片段编码的缺口酶及其应用。本发明提供了一种新的缺口酶，其来源于希瓦氏菌Shewaenlla oneidensis MR‑1(ATCC 700550)，氨基酸...
- 刘晓晓顾兵赵云虎张妮凌勇袁凯旋崔善钊
- 异基因造血干细胞移植术后肺部感染危险因素分析
- 目的 对异基因造血干细胞移植术后肺部感染的危险因素及预后进行分析。方法 选择2008 年1 月-2015 年1 月在广东省人民医院进行异基因造血干细胞移植的病例进行回顾性研究。将患者分为术后肺部感染组和非感染组。观察时间...
- 李正康张鑫强魏颖张妮张玉刘素玲侯铁英
- 关键词：异基因造血干细胞移植术肺部感染
- 接合转移质粒pUCP24T的构建与性能研究被引量：1
- 2013年
- 目的构建能在大肠埃希菌(E.coli)和铜绿假单胞菌(PA)间高效接合转移的质粒。方法通过NCBI blastn程序分析质粒pCVD442接合反应起始序列oriT,PCR扩增oriT后插入pMD18-T,再将pMD18-oriT转化E.coli DH5α,经酶切、测序验证后用SmaⅠ和HindIIII双酶切亚克隆至质粒pUCP24,获得质粒pUCP24T,将pUCP24T转化E.coli后研究pUCP24T从E.coli到PA的接合效率和质粒稳定性等。结果成功构建pUCP24T重组质粒,在E.coli和PA的接合实验中,E.coli(pUCP24T)-PA共培养2 h的接合效率平均为3.588×10-2,按12 h一代连续9代继代培养108 h,抗生素压力下质粒保存率为98.29%,无抗生素的培养基中质粒保存率为21.76%。结论成功构建高接合效率的接合转移质粒pUCP24T。
- 陈树林陈茶黄彬张妮鄂顺梅蔡壬辛袁慧曲平华林冬玲
- 关键词：铜绿假单胞菌基因水平转移
- 2008-2011年肠杆菌科细菌耐药性变迁及对碳青霉烯类抗生素的耐药机制被引量：7
- 2013年
- 目的研究临床分离的肠杆菌科细菌的耐药性变迁和对碳青霉烯类药物不敏感的肠杆菌科细菌(CNSE)的耐药机制,为抗感染治疗提供依据。方法应用VITEK-2型全自动微生物检测系统对细菌进行鉴定及药敏试验,用PCR法检测A、B、D类碳青霉烯酶基因和esbls基因,并用核酸测序法进行验证。结果 2008-2011年共分离肠杆菌科细菌4154株,四年间对碳青霉烯类药物的耐药率并未显著升高(P>0.05)。对于CNSE而言,氨基糖苷类抗生素特别是阿米卡星的敏感率最高,在90%以上。从338株CNSE中随机挑选出182株进行耐药基因的检测,esbls基因tem、ctx-M、shv和碳青霉烯酶基因kpc、imp的阳性率分别为36.8%、31.9%、19.8%、2.2%和3.3%。kpc和imp主要在肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌和大肠埃希菌中检出,未检出其他碳青霉烯酶耐药基因,包括ndm-1基因。结论肠杆菌科细菌对碳青霉烯类、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦仍保持高度敏感。CNSE对碳青霉烯类药物敏感性降低是多种耐药机制共同作用的结果,ndm-1不是导致肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物敏感性降低的原因。
- 蔡壬辛黄彬陈树林陈茶林冬玲何秋莹袁慧张妮房承才
- 关键词：肠杆菌科细菌耐药性NDM-1
- 铜绿假单胞菌耐药性及质粒介导的耐环丙沙星分子机制研究被引量：3
- 2012年
- 目的研究临床分离铜绿假单胞菌的耐药性和质粒介导铜绿假单胞菌对环丙沙星耐药的分子机制。方法采用VITEK-2型全自动微生物检测系统鉴定细菌,用K-B法测定铜绿假单胞菌对24种常用抗菌药物的药敏率,用聚合酶链反应检测喹诺酮类耐药基因,包括qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、qepA和aac(6′)-Ib-cr。结果 423株铜绿假单胞菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均为23.2%,对第一、三代头孢菌素类药物的耐药率>49.2%(除头孢他啶为22.7%),对氨基糖苷类药物庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星的耐药率分别为17.5%、17.5%和13.0%,对青霉素类药物的耐药率>40.4%(除哌拉西林为26.2%),对含β-内酰胺酶抑制剂复合物的耐药率差异较大,哌拉西林/他唑巴坦为17.0%,而氨苄西林/舒巴坦为98.6%;对碳青霉烯类药物亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为24.6%和26.0%;127株耐环丙沙星铜绿假单胞菌的耐药性明显升高,对左氧氟沙星的耐药率为86.6%,对第三代头孢菌素的耐药率上升至>61.4%,对第四代头孢菌素头孢吡肟的耐药率由20.3%上升至62.2%,对含β-内酰胺酶抑制剂复合物的耐药率从17.0%上升至>49.6%,对氨基糖苷类药物庆大霉素、妥布霉素的耐药率上升至>64.6%,对阿米卡星的耐药率由13.0%上升至48.8%;耐环丙沙星铜绿假单胞菌中未检出qnrS基因和qnrC基因,qnrA、qnrB、qnrD、qepA和aac(6′)-Ib-cr的阳性率分别为31.2%、87.5%、15.6%、10.9%、39.1%。结论临床分离的耐环丙沙星铜绿假单胞菌携带qnrA、qnrB、qnrD、qepA和aac(6′)-Ib-cr基因,未检出qnrS、qnrC基因;qnr、qepA和aac(6′)-Ib-cr基因是质粒介导的铜绿假单胞菌耐环丙沙星的主要机制。
- 陈茶黄彬陈利达吴强贵陈树林李有强林冬玲张妮
- 关键词：铜绿假单胞菌环丙沙星耐药
- 多重耐药铜绿假单胞菌分子流行病学的研究被引量：3
- 2011年
- 目的探讨广东省中医院72株多重耐药铜绿假单胞菌分子流行病学情况。方法采用纸片扩散法检测72株多重耐药铜绿假单胞菌对12种抗菌药物的敏感性,并用脉冲场凝胶电泳进行分子分型和同源性分析。结果 72株多重耐药铜绿假单胞菌均对3类或3类以上抗菌药物同时耐药,脉冲场凝胶电泳图谱可分成17基因型(A～Q),其中A型40株。结论本地区虽未发生暴发流行,但仍存在流行优势克隆株,应积极配合医院感染管理部门进行耐药性监测,防止医院感染和暴发流行。
- 陈茶林冬玲李有强张妮袁慧曾建明张伟铮黄彬
- 富西亚分枝杆菌从血液与静脉插管中的分离与鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的对从同一患者血液和静脉插管中分离的两株抗酸阳性细菌B0793、V1948进行菌种鉴定。方法广谱PCR扩增细菌的16S核糖体核糖核酸(16SrRNA)基因与核糖核酸(RNA)聚合酶β亚单位(rpoB)基因,测序其核苷酸序列并与相关菌种进行同源性比对及系统发育分析,以传统的表型实验对基因鉴定的结果进行验证,并参考CLSI M24-A的方法和解释标准进行分离株抗菌药物的药物敏感性试验。结果该2株细菌均为血平板上生长缓慢的革兰染色着色较淡的抗酸阳性杆菌,但2株细菌的菌落形态差别较大,B793在血平板培养4d形成直径1cm、米黄色、圆形、突起、不溶血、易乳化的光滑型菌落,V948则为直径约2cm、米黄色、豆腐渣样、边缘不规则的粗糙型菌落。16SrRNA基因和rpoB基因序列与富西亚分枝杆菌(mycobacterium phocaicum)的同源性均在99%以上,其半定量触酶、68℃触酶试验、5%NaCl耐受试验与脲酶试验阴性,亦符合富亚分枝杆菌的特征。结论该2株抗酸阳性细菌在分类学上属于富西亚分枝杆菌,其光滑型/粗糙型菌落变异为国际上首次发现。
- 鄂顺梅屈平华黄彬陈茶张妮袁慧吴河森
- 关键词：分枝杆菌
- 真菌培养标本架
- 本实用新型涉及生物器械技术领域，且公开了真菌培养标本架，包括壳体，所述壳体的内壁开设有滑槽，所述滑槽的内部滑动连接有滑块，所述滑块的内部滑动套接有限位头，所述限位头与滑块的内壁之间设置有第一弹簧，所述滑槽的内壁开设有限位...
- 陈慧敏刘伟江陈晓丽张妮
