徐健
- 作品数：39 被引量：111H指数：7
- 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：贵州省高层次人才科研条件特助经费项目贵州省省长基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生经济管理化学工程更多>>
- 猪沙门氏菌病的诊断方法及防制研究进展被引量：7
- 2010年
- 据世界卫生组织报告,世界各国沙门氏菌食物污染日益增多,造成巨大经济损失,严重威胁着人们的身体健康和生命安全,因而沙门氏菌已被列为食品中致病菌检测的一个重要对象和一项重要指标,社会各检疫部门也加大了对沙门氏菌的防制及监控力度。1985年以来,在世界范围内,由沙门氏菌引起的已确诊的患病人数显著增加,在一些欧洲国家已增加五倍以上。在我国,由沙门氏菌引起的食物中毒屡居首位。据资料统计,在我国细菌性食物中毒中,70%～80%是由沙门氏菌引起,而在引起沙门氏菌中毒的食品中,90%以上是肉类等动物性产品。本文主要从猪沙门氏菌的临床诊断中的病理变化、临床症状、流行病学调查和实验室常用的涂片检查、细菌的分离鉴定、凝集试验、ELISA和PCR技术诊断等几方面阐述猪沙门氏菌的诊断方法和猪沙门氏菌与其它症状相似疾病的鉴别诊断。同时,总结了猪沙门氏菌病的防制研究进展。为以后生产中对猪沙门氏菌的预防、诊断和治疗这一体系的建立提供参考。
- 黄伟汤德元杨泽平黄涛徐健王彬
- 关键词：猪沙门氏菌病防制技术
- 乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达及其免疫原性的研究被引量：8
- 2012年
- 收集某猪场1例发病种公猪的睾丸病料,处理后采用细胞培养与乳鼠脑内接毒相结合的方法盲传并结合RT-PCR方法分离鉴定,命名为乙型脑炎病毒(JEV)贵州分离株(GZ株),然后根据GenBank登录的日本乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株全基因序列设计并合成1对扩增E基因的特异性引物,用RT-PCR方法扩增出JEV贵州分离株E基因,并将E基因克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-T-E,经双酶切鉴定、测序及序列分析鉴定后,再将E基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建乙脑病毒E基因原核表达质粒pET-32a-E,将构建好的原核表达质粒pET-32a-E转化至宿主菌BL21(DH3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳和Western blot分析,得到了约59ku条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化和浓缩目的蛋白,并将其加入弗氏佐剂后免疫小鼠,免疫后采血检测抗体。结果显示:乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达目的蛋白能诱导小鼠产生一定抗体水平,该研究为乙型脑炎亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 汤德元王凤马萍罗险峰李春燕曾智勇徐健刘建
- 关键词：乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达免疫原性
- 乙型脑炎的发病机理及毒力致病机理的研究进展被引量：7
- 2008年
- 主要介绍了乙型脑炎的病毒基因组成、发病机理和毒力致病机理的研究,从乙脑病毒的基因组结构及其所编码的蛋白质的功能上分析乙脑病毒的毒力致病机理与基因结构的关系及其研究进展,为进一步掌握乙脑病毒强弱毒株基因结构的差异及研究其基因工程疫苗提供了理论基础。
- 李春燕汤德元徐健刘玉攻黄涛
- 关键词：乙型脑炎发病机理
- 猪繁殖与呼吸综合征RT-PCR诊断及ORF5基因原核表达载体的构建
- 2009年
- 参照GenBank上发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒核苷酸序列,利用生物软件,设计1对ORF5基因的特异性引物,用Trizol法提取病料的总RNA,进行RT-PCR扩增后获得目的基因,将其连接到PMD18-T载体后转入大肠杆菌Top10细胞中,抽提质粒并双酶切,回收目的基因,然后克隆于原核表达载体PET-32a(+)中,通过抗性筛选、酶切鉴定和序列测定,证实得到含有目的基因的阳性克隆,本实验成功构建了猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株ORF5基因原核表达载体PET-ORF5,为进一步研究ORF5基因的原核表达及猪繁殖与呼吸综合征的基因工程疫苗的研究奠定了基础。
- 袁东波汤德元黄涛徐健王彬
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒原核表达载体构建
- 乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达的研究
- 根据乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株序列，设计并合成1对针对E基因的特异性引物，用RT-PCR方法扩增出JEV GZ株E基因片段，将其与pMD19-T载体连接，并转入Top10感受态细胞中，通过抽提阳性质粒酶切...
- Xu-jian徐健汤德元Tang-deyuanLi-chunyan李春燕Zeng-zhiyong曾智勇Huang-tao黄涛Wang-bing王彬张晓杰Zhang-xiaojieWang-feng王凤
- 关键词：乙型脑炎病毒分离株E基因基因工程疫苗
- 猪沙门氏菌病与常见疾病的鉴别诊断被引量：3
- 2009年
- 猪沙门氏菌病目前仍是世界养猪业的一大威胁,常常引起大批猪的生长不良或死亡,给养猪业造成了严重的经济损失,也是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一。随着集约化养殖业的发展,猪场沙门氏菌病的发病率愈来愈高。因此,猪场中沙门氏菌病的有效控制已成为关注的焦点。然而,在现实生产中,人们往往将猪沙门氏菌病与猪肺疫、猪丹毒、猪瘟、猪痢疾、猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻等几种常见疾病混为一谈,影响临床诊断而延迟治疗时间。本文主要从流行特点、临床症状、病理变化、病原、实验室诊断及分子生物学方面对沙门氏菌病和其他几种疾病作鉴别诊断而进行较为全面的阐述,以为临床诊断提供参考。
- 李波汤德元杨泽平王彬徐健黄涛
- 关键词：猪沙门氏菌病几种常见疾病
- 猪瘟病毒E2基因原核表达的研究
- 根据GenBank已发表的猪瘟E2基因序列,设计合成1对特异性引物,通过RT-PCR技术从病料中扩增出E2基因片段,并将其克隆到pMD18-T载体上。经测序正确后,并将目的基因亚克隆到pET-32a(+)载体后,经双酶切...
- 黄涛汤德元李春燕曾智勇徐健王彬张晓杰王凤
- 关键词：猪瘟病毒E2基因原核表达
- 文献传递
- 目前我国猪瘟的流行现状及防控策略
- 国家对猪瘟的预防和控制一直都十分重视，尽管我国很早就研制成功了猪瘟兔化弱毒疫苗，并在预防猪瘟的发生中起到了重要作用，但由于近年来猪瘟的流行和发病特点发生了很大的变化，其流行形式从频发的大流行转变为周期性、波浪形的地区性散...
- 陶玉顺黄涛袁东波徐健
- 关键词：猪瘟免疫监测防控体系弱毒疫苗
- 文献传递
- 乙型脑炎核酸疫苗的研究进展被引量：1
- 2013年
- 乙型脑炎是一种严重威胁人畜健康的急性中枢神经系统传染病,也是重要的人畜共患的虫媒病毒病,被国际兽医局(OIE)列为B类传染病。该病对猪的致死率不高,但能引起怀孕母猪发生流产、死胎、木乃伊胎,公猪发生睾丸炎,育肥猪引起持续高热,仔猪常呈脑炎症状,直接影响猪群数量的扩大,对养猪业造成严重危害,也影响人类的健康。目前本病尚无特效疗法,主要依靠疫苗预防,世界卫生组织已把研究和开发防治乙型脑炎疫苗列为优先研究和开发的项目之一。本文主要对乙型脑炎病毒核酸疫苗目前的研究现状进行了综述,为乙型脑炎核酸疫苗的深入研究提供参考。
- 王凤汤德元曾智勇马萍李春燕刘霞徐健
- 关键词：乙型脑炎核酸疫苗
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的变异及其基因工程疫苗研究进展被引量：3
- 2009年
- ORF5基因编码的E蛋白是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的主要结构蛋白,糖基化的囊膜蛋白E蛋白具有良好的免疫原性,能够代替PRRSV诱导机体产生免疫应答,产生保护性中和抗体,是研发基因工程疫苗的优良候选基因之一,在防控PRRS方面有着重要的意义。目前PRRS的流行毒株存在着广泛的变异,尤其是稳定性较差的ORF5基因的变异给PRRSV的检测和防控带来很大的困难。本文就国内外学者对ORF5基因的变异情况以及基于PRRSV ORF5基因在基因工程疫苗方面的研究进展作了综述。
- 刘霞汤德元曾智勇徐健黄涛
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒基因工程疫苗
