杨翔云
- 作品数：14 被引量：36H指数：4
- 供职机构：解放军第202医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人ClC-2基因小分子干扰RNA真核表达载体的构建和鉴定被引量：4
- 2006年
- 目的:构建靶向人C lC-2基因小分子干扰RNA(siRNA)真核细胞表达载体。方法:根据DEQOR提供的siRNA设计原则和程序,设计两个靶向C lC-2基因的发夹状siRNA;通过化学合成的方法合成两对分别互补的寡核苷酸链,退火后得到编码该siRNA的C lC-2基因片段。将该片段连接至经BglⅡ和HindⅢ双酶切的真核细胞表达载体pSUPER.puro的多克隆位点,转化扩增提取质粒;对重组质粒进行EcoRⅠ和HindⅢ双酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定。脂质体L ipofectam ineTM2000介导瞬时转染,通过RT-PCR检测人胶质瘤细胞系BT-325细胞中C lC-2mRNA表达。结果:经酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定,目的片段与真核细胞表达载体pSUPER.puro连接正确。转染两重组质粒细胞的C lC-2 mRNA表达明显降低。结论:成功构建人C lC-2基因干扰真核表达载体2个,分别命名为pSUPER.puro-siC lC-21和pSUPER.puro-siC lC-22,可用于进一步研究C lC-2基因对人胶质瘤侵袭和迁移活动的影响。
- 杨翔云张勇赖小刚裴建明杨安钢胡玉珍周士胜
- 关键词：人胶质瘤RNA干扰
- 多索茶碱联合布地奈德治疗支气管哮喘的临床分析被引量：7
- 2017年
- 目的研究多索茶碱联合布地奈德治疗支气管哮喘患者的临床价值。方法选取89例支气管哮喘患者,随机分成对照组(43例)和研究组(46例),对照组应用氨茶碱治疗,研究组应用多索茶碱联合布地奈德治疗。结果研究组:咳嗽消失时间(4.07±0.76)d,气喘消失时间(3.12±1.14)d,哮鸣音消失时间(4.10±0.91)d;对照组:咳嗽消失时间(6.09±1.39)d,气喘消失时间(4.90±1.78)d,哮鸣音消失时间(5.28±1.79)d。研究组咳嗽、气喘以及哮鸣音等临床症状消失时间均短于对照组(P<0.05)。治疗后研究组FEV1、FVC、FEV1%以及PEF指标分别为(2.92±0.63)L、(3.45±0.81)L、(84.31±0.76)%、(4.73±0.94)L/s;对照组分别为(2.02±0.57)L、(2.71±0.66)L、(74.06±0.59)%、(4.23±0.70)L/s;治疗后,研究组FEV1、FVC、FEV1%以及PEF等指标明显高于对照组(P<0.05)。研究组血清ESR为(7.86±0.75)mm/h,血清CRP为(2.16±0.43)mg/L;对照组血清ESR为(9.15±1.26)mm/h,血清CRP为(3.49±0.69)mg/L。研究组患者血清ESR与血清CRP指标明显低于对照组(P<0.05);研究组患者不良反应发生率为6.5%,对照组为27.9%,研究组不良反应率明显低于对照组(P<0.05)。结论应用多索茶碱联合布地奈德治疗支气管哮喘患者,可显著缩短患者的临床症状消失时间,改善肺功能,并提高治疗安全性,可推广。
- 杨翔云叶燕湘刘颖吴炎郑晓华
- 关键词：支气管哮喘多索茶碱布地奈德安全性
- 心脑血管病血液流变学与血脂关系的观察被引量：7
- 1993年
- 杨翔云
- 关键词：血脂关系心脑血管病血液流变学全血还原粘度血球压积血浆粘度
- 干扰ClC-2基因表达对胶质瘤BT-325细胞生长的影响被引量：5
- 2006年
- 目的观察抑制容积调控氯通道ClC-2基因的表达对胶质瘤BT-325细胞生长的影响。方法设计和构建两个针对ClC2基因的小干扰RNA(siRNA)重组表达载体,用脂质体LipofectamineTM2000介导转染,将空载体质粒和两个重组质粒分别转染入BT-325细胞(依次为对照组、PP1组和PP2组);通过RTPCR检测ClC2基因mRNA表达变化;MTT分析检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞周期。结果与对照组相比较,干扰组ClC2基因的mRNA水平明显降低,细胞生长速度明显减慢,细胞周期进程被阻滞在G1期。结论干扰胶质瘤细胞系BT-325细胞的ClC-2基因表达可以抑制细胞的生长,提示ClC2基因可能成为控制胶质瘤恶性生长的新靶点。
- 杨翔云赖小刚张勇裴建明杨安钢周士胜
- 关键词：胶质瘤RNA干扰(RNAI)
- 胸腺肽对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者T淋巴细胞亚群的影响被引量：1
- 2018年
- 目的研究胸腺肽对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者T淋巴细胞亚群的影响。方法选取2016年1月至2017年12月在某院进行慢性阻塞性肺疾病急性加重期治疗的患者80例。按照单双号法随机分为观察组和对照组,对照组采用常规药物治疗,观察组在此基础上加入胸腺肽治疗,对比治疗效果以及T淋巴细胞亚群水平。结果观察组治疗总有效率为97.5%,对照组治疗总有效率80.0%,观察组高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组T淋巴细胞亚群各项指标水平改善较好,优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论胸腺肽治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者可改善临床症状,促进肺功能恢复及T淋巴细胞亚群各项指标趋于正常,增强机体免疫能力,效果确切。
- 杨翔云刘云赖小刚
- 关键词：胸腺肽慢性阻塞性肺疾病急性加重期T淋巴细胞亚群
- 干扰ClC-2基因表达抑制人胶质瘤BT-325细胞的生长
- 离子通道是细胞膜蛋白，参与细胞的各种生理过程如细胞电活动、信号转导、增殖、分化、凋亡等。肿瘤细胞膜上也存在离子通道，肿瘤细胞上的离子通道与正常细胞上的离子通道有质或量的不同，并与肿瘤的各种生物学特性如增殖、转移、凋亡、耐...
- 杨翔云
- 关键词：RNA干扰人胶质瘤细胞生长
- 文献传递
- 黏蛋白1(MUC1)致敏的树突状细胞疫苗体外抗肿瘤实验研究被引量：1
- 2016年
- 目的研究以Cp G作为免疫佐剂,应用黏蛋白1(MUC1)致敏树突状细胞(DC)制备疫苗在体外诱导的特异性抗肿瘤作用。方法健康人外周血采用密度梯度离心法,分离外周血单核细胞(PBMC),应用GM-CSF、IL-4、TNF-α等细胞因子体外培养诱导DC,观察细胞形态,并通过流式细胞术检测成熟DC细胞标志物CD80、CD86。再应用Cp G作为免疫佐剂,MUC1作为抗原致敏DC制备疫苗,致敏的DC与T细胞混合培养,观察其诱导T淋巴细胞增殖能力。诱导产生的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)与肿瘤靶细胞以5∶1、10∶1、20∶1的效靶比共孵育,MTT法检测CTL杀伤活性。结果 DC表型检测结果为CD80+细胞占70.4%,CD86+细胞占72.0%,呈现成熟DC表型。MUC1致敏的DC疫苗与淋巴细胞混合培养显示,DC疫苗具有刺激T细胞增殖活化的作用,其中DC+Cp G+MUC1组明显高于MUC1+DC或Cp G+DC组,差异有统计学意义(P<0.01)。DC疫苗诱导产生的特异性CTL对肿瘤细胞的杀伤作用较单独T细胞组或DC组明显增强,差异有统计学意义(P<0.01)。并随着效靶比增大,其杀伤作用呈逐渐增强。结论经Cp G和MUC1致敏的DC疫苗在体外可诱导产生特异性抗肿瘤免疫效应。
- 徐富谢映红杨翔云刘云郑晓华吴炎张昊徐路
- 关键词：肿瘤疫苗
- CpG联合MUC1增强人外周血树突状细胞功能的实验研究
- 2017年
- 目的:观察Cp G联合黏蛋白1(MUC1)应用对树突状细胞(DC)刺激T细胞增殖作用的影响。方法:应用淋巴细胞分离液分离人外周血单核细胞,体外培养应用GM-CSF、IL-4、TNF-α等细胞因子诱导DC,观察细胞形态,并通过流式细胞术检测细胞标志物CD80、CD86。收获DC按如下分组:A:DC;B:DC+Cp G;C:DC+MUC1;D:DC+Cp G+MUC1;E:Cp G+MUC1,分别与T淋巴细胞混合培养,通过MTT法检测T细胞增殖情况。结果:DC表型检测结果为:CD80^+细胞占70.4%,CD86^+细胞占72.0%,呈现成熟DC表型。MUC1与DC联合疫苗与淋巴细胞混合培养显示:DC具有刺激T细胞增殖的作用,Cp G+DC组和MUC1+DC组,分别较单纯DC组对T细胞的刺激增殖作用明显增强(P<0.01),DC+Cp G+MUC1组又明显高于单用MUC1或Cp G+DC组,差别显著(P<0.01),单纯加Cp G和MUC1(无DC组)则基本无明显刺激T细胞增殖作用。结论:Cp G联合MUC1能明显提高DC促T细胞增殖的功能。
- 徐富谢映红杨翔云刘云郑晓华吴炎张昊徐路
- 关键词：CPG
- siRNA干扰ClC-2表达对人胶质瘤U-87细胞增殖的抑制作用被引量：9
- 2006年
- 背景与目的:利用小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)抑制哺乳动物基因表达已成为研究基因功能的一种有效方法。本研究采用siRNA抑制人神经胶质瘤细胞系U-87细胞上容积调控氯通道ClC-2基因的表达,观察其受抑制后对细胞增殖能力的影响。方法:设计和构建两个针对人ClC-2基因的siRNA真核表达载体,并给予酶切鉴定和DNA序列分析鉴定;用脂质体LipofectamineTM2000介导转染,将空载体质粒pSUPER.puro-shRNA和两个重组质粒pSUPER.puro-shRNA-ClC-21、pSUPER.puro-shRNA-ClC-22分别转染入U-87细胞(依次为PP0组、PP1组和PP2组);采用RT-PCR检测ClC-2mRNA表达变化;MTT分析检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞周期;平板克隆形成实验检测克隆形成率。结果:目的片段成功地连接到真核细胞表达载体pSUPER.puro上。PP1组、PP2组与对照组、PP0组相比较,ClC-2基因的mRNA水平明显降低,细胞生长速度明显减慢,细胞周期进程被阻滞在G1期:细胞的G1期百分含量分别增加了约30.24%、18.04%(P<0.05)。平板克隆形成试验发现,克隆形成率PP1组[(11.0±1.0)%]、PP2组[(20±3.1)%]明显低于对照组[(46.5±1.6)%]和PP0组[(47.5±2.8)%](P<0.01)。结论:干扰人神经胶质瘤细胞系U-87细胞的ClC-2基因表达可以抑制细胞的增殖,提示ClC-2基因可能成为控制人恶性胶质瘤生长的新靶点。
- 杨翔云赖小刚张勇裴建明杨安钢周士胜
- 关键词：胶质瘤RNA干扰增殖
- siRNA干扰C1C-2转录对人神经胶质瘤细胞系U-87增殖和侵袭的抑制作用
- 本研究利用RNA干扰技术探讨容积激活性Cl-通道C1C-2对人神经胶质瘤增殖和侵袭的影响。构建针对人容积激活性Cl-通道C1C-12的mRNA干扰质粒pSp-C1C-2,以及对照质粒pSp-O,并将其分别转染U-87人神...
- 杨翔云赖小刚张勇周士胜裴建明
- 文献传递
