康丽娟
- 作品数：35 被引量：204H指数：10
- 供职机构：中国畜牧兽医学会更多>>
- 发文基金：国家攀登计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸡传染性支气管炎病毒中国流行株免疫原S1基因的分子克隆、序列分析及其DNA免疫的初步研究被引量：8
- 1999年
- 对来源于我国华东地区的鸡传染性支气管炎病毒流行株ＱＤ免疫原Ｓ１基因ｃＤＮＡ进行了克隆、序列分析和ＤＮＡ免疫的初步研究。ＲＴＰＣＲ扩增ＱＤ毒株的Ｓ１基因，将其５′和３′端分别进行分子修饰后插入克隆载体ｐＵＣ１８的ＢａｍＨⅠ／ＨｉｎｄⅢ位点，在大肠杆菌中实现了目的基因的克隆；利用英国ＩＢＶ毒株Ｓ１全基因核酸探针与ＱＤ毒株Ｓ１基因的重组克隆质粒分子杂交后，采用ＨａｅⅢ，ＰｖｕⅡ和ＸｂａⅠ等限制酶对此流行毒株Ｓ１基因ｃＤＮＡ进行了酶切分析；在测定ＱＤ毒株Ｓ１基因５′端高变区核苷酸序列并以此与ＩＢＶＭ４１，Ｈ１２０，６／８２及Ｂｅａｕｄ等参考毒株序列对比分析的基础上，构建了ＱＤ株Ｓ１基因ＤＮＡ免疫表达质粒，肌肉注射免疫小鼠后，鸡胚病毒中和试验的结果表明，ＩＢＶＳ１基因ＤＮＡ免疫表达质粒能诱导小鼠产生病毒特异的中和抗体，具有良好的免疫原性，初步显示基因疫苗在鸡传染性支气管炎防治上应用前景。
- 江国托步志高刘思国康丽娟祁贤卢景良
- 关键词：传染性支气管炎病毒分子克隆
- 鸡传染性支气管炎病毒核蛋白基因免疫的研究被引量：1
- 2000年
- 将已经序列测定的鸡传染性支气管炎病毒ＨＢ株的核蛋白基因亚克隆到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３的Ｋｐｎｌ酶切位点。快速筛选鉴定出含有ＨＢ核蛋白基因的重组质粒，经酶切、ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定为正向插入的重组ＨＢ核蛋白基因后，将其命名为ｐｃＤＮＡ－Ｎ。对重组质粒ｐｃＤＮＡ－Ｎ进行大量扩增，应用聚乙二醇方法进行纯化，将纯化后的 ｐｃＤＮＡ－Ｎ按 １００／只免疫１４日龄雏鸡，并以ＰＢＳ免疫作为空白艰照。免疫后的攻毒试验结果表明，在基因免疫组的１０只雏鸡中，有４只雏鸡存活，保护率为４０％（４／１０）；而空白对照组的１０只雏鸡则全部死亡，无保护率。本试验认为，ＩＢＶ核蛋白在抗感染和致死方面起着一定的免疫保护作用。
- 刘思国康丽娟江国托孔宪刚张宪刘忠贵卢景良
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒核蛋白基因基因免疫
- 鸡传染性支气管炎病毒SY毒株生物学特性及其S1基因分子遗传变异分析
- 2002年
- 通过生物学特性研究 ,验证了分离自沈阳地区的SY毒株确实为 1株鸡传染性支气管炎病毒。病毒中和试验表明 ,SY血清型不同于参考毒株T、H52 、M41及国内其他流行株如HD、XB、DB等 ;S1基因序列分析表明 ,SY核苷酸序列及推导的氨基酸序列与参考毒株Beau、M41、H12 0 、N1 62、Gray、6/ 82和Ark99等毒株的同源率都低于 80 % ,进化关系与各参考毒株也相距甚远 ,糖基化位点出现 3个新位点 ,氨基酸疏水性区域也存在差异。
- 刘明春江国托康丽娟刘思国赵玉军
- 关键词：分子遗传生物学特性S1基因
- 动物生物工程制剂在猪病防治中的应用
- 自从重组人胰岛素问世以来,基因工程制剂异军突起,目前国内外已研发成功约50多个品种广泛用于癌症、肝炎、糖尿病、发育不良、遗传性疾病,以及一些疑难病症的治疗上,起到了化学药品难以达到的治疗作用,因为这些生物工程药物的研发集...
- 康丽娟万遂如
- 关键词：猪病防治
- 文献传递
- 传染性支气管炎病毒S_1基因DNA免疫质粒的构建及其免疫原性被引量：26
- 1998年
- 为探讨ＤＮＡ免疫防制传染性支气管炎（ＩＢ）的可能性，以克隆的Ｍａｓｓｃｈｕｓｅｔｅ型类Ｍ４１地方分离ＱＤ株Ｓ１基因为免疫原基因，引入终止密码后插入ＳＶ４０启动子、增强子下游和ＳＶ４０ｐｏｌｙＡ信号上游，构建了Ｓ１基因ＤＮＡ免疫表达质粒ｐＳＶＱＤＳ１。将大量扩增并经聚乙二醇纯化的ｐＳＶＱＤＳ１溶于ＰＢＳ，以３００μｇ／只的剂量肌肉注射免疫小鼠，于４周后采集分离免疫小鼠血清进行鸡胚病毒中和试验。结果表明，ｐＳＶＱＤＳ１能够诱导产生针对传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｍ４１株的中和抗体，具有良好的免疫原性。
- 步志高江国托王秀荣康丽娟祁贤陈万芳卢景良
- 关键词：传染性支气管炎病毒S1基因
- 国外鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展被引量：6
- 1995年
- 国外鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展江国托，卢景良，康丽娟（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，哈尔滨）鸡传染性支气管炎（ＡｖｉａｎＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓｓｒｏｎｃｈｉｔｉｓ，ＩＢ）是由鸡传染性支气管炎病毒（ＡｖｌａｎＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＢｒｏｎｃｈ...
- 江国托卢景良康丽娟
- 关键词：传染性支气管炎病毒IBV分子生物学
- 动物生物工程制剂在猪病防治中的应用
- 2006年
- 康丽娟万遂如
- 关键词：生物工程猪病防治动物药品制剂重组人胰岛素遗传性疾病
- 鸡传染性支气管炎病毒中国分离株核蛋白基因的分子克隆被引量：11
- 2000年
- 为了给鸡传染性支气管炎病毒 ( IBV)核蛋白基因的遗传变异以及主要功能区的定位研究奠定基础 ,应用特异性引物扩增了 1 0株 IBV中国分离株的核蛋白基因 ,PCR产物全长为 1 .5kb。用 Eco RV和 Kpn 限制性内切酶进行酶切修饰后 ,连接到经过同样处理的载体 p UC1 1 9上。经 PCR、酶切、斑点杂交及 Southernblotting杂交鉴定 ,证实获得了含有
- 刘思国江国托康丽娟刘忠贵卢景良刘明春
- 关键词：IBV核蛋白基因分子克隆免疫预防
- PCR方法快速检测鸡传染性支气管炎病毒被引量：1
- 2000年
- 本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性ＰＣＲ方法。通过对纯化后ＩＢＶ核蛋白基因进行直接ＰＣＲ及套式ＰＣＲ扩增表明，两次ＰＣＲ产物的大小为０．７ｋｂ和０．５ｋｂ，与实际设计相符。而对照的ＮＤＶ及ＩＢＤＶ的ＰＣＲ扩增产物均为阴性。用 ＩＢＶ ＨＢ株感染 ＳＰＦ鸡后，应用我们所建立的 ＰＣＲ方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的 ＩＢＶ，在 ＳＰＦ鸡感染 ＩＢＶ后的２１天仍然能够检测到 ＩＢＶ的基因组，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ杂交试验证明了我们获得的 ＰＣＲ产物为ＩＢＶ的核蛋白基因。该ＰＣＲ检测方法比免疫荧光抗体（ＦＡ）法更具敏感、特异、快速等特点，完全适用于不同来源及不同血清型ＩＢＶ的检测。
- 刘思国康丽娟江国托孔宪刚刘忠贵韩业超卢景良
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒反转录-聚合酶链反应
- 鸡传染性支气管炎病毒SY毒株生物学特性及其S1基因分子遗传变异分析
- 本文通过生物学特性研究,验证了分离自沈阳地区的SY毒株确实为一株鸡传染性支气管炎病毒,病毒中和试验表明其血清型不同于参考毒株T、H52、M41及国内其他流行株如HD、HB、DB等.S1基因序列分析表明,其核苷酸序列段推导...
- 刘明春江国托康丽娟刘思国赵玉军
- 关键词：支气管炎病毒生物学特性S1基因
