陈萦晅
- 作品数：17 被引量：212H指数：6
- 供职机构：上海第二医科大学附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金上海市医学发展基金重点研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 氧化苦参碱抗乙型肝炎病毒的体外实验研究被引量：107
- 2001年
- 目的 观察氧化苦参碱体外抗乙型肝炎病毒 (HBV)的活性。方法 以HepG2 2 .2 .15细胞株为模型 ,用微粒酶免疫测定技术 (MEIA)检测细胞培养上清液中HBsAg、HBeAg含量 ,用bDNA信号扩增法定量检测细胞内核心颗粒HBVDNA的变化 ,以MTT比色法观察药物的细胞毒性。结果 氧化苦参碱 2 0 0 0 μg/ml时对HBsAg、HBeAg的抑制率分别达 40 .5 7%、48.2 7% ;浓度为 10 0～ 2 0 0 0 μg/ml时 ,能明显降低 2 .2 .15细胞胞浆核心颗粒HBVDNA水平 ;无明显细胞毒性作用。结论 体外细胞培养表明 。
- 李继强陈萦晅曾民德陆伦根邱德凯茅益民范竹萍华静
- 关键词：氧化苦参碱抗乙型肝炎病毒抗病毒药
- 人结肠癌中凋亡抑制基因survivin的表达被引量：3
- 2004年
- 背景:细胞增殖和凋亡失衡将导致肿瘤的发生,并直接影响肿瘤的生物学行为。survivin是一种新的凋亡抑制基因,在大多数肿瘤中显著高表达。目的:探讨survivin基因在人结肠癌发生、发展中的作用,及其与p53基因的表达和结肠癌生物学行为的关系。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测33例结肠癌组织及其相应癌旁组织和正常结肠黏膜中survivinmRNA和p53mRNA的表达,分析survivinmRNA的表达与p53mRNA的表达和结肠癌生物学行为的相关性。结果:69.7%的结肠癌组织中有survivinmRNA表达,表达率显著高于癌旁组织和正常结肠黏膜(42.4%和21.2%,P<0.01);survivin表达阴性癌组织的相应癌旁组织和正常结肠黏膜无一例有survivinmRNA表达。结肠癌组织中survivinmRNA的表达值显著高于癌旁组织和正常结肠黏膜(P<0.01)。33例结肠癌组织中仅2例p53mRNA表达缺失,癌旁组织和正常结肠黏膜中均有p53mRNA表达。结肠癌组织中p53mRNA的表达值与癌旁组织和正常结肠黏膜无显著差异;survivin表达阳性癌组织中p53mRNA的阳性表达率和表达值与survivin表达阴性组无显著差异。survivinmRNA和p53mRNA的表达与结肠癌的生物学行为无显著相关性。结论:survivin基因在人结肠癌组织中表达上调,提示其可能通过抑制结肠癌细胞凋亡,在结肠癌的发生、
- 王少华陈萦晅房静远邱德凯
- 关键词：结肠癌SURVIVIN结肠肿瘤P53
- 重组DNA甲基化酶1表达质粒对结肠癌细胞相关基因表达的影响被引量：13
- 2004年
- 目的 分析DNA甲基化酶 1(DNMT1)基因的真核表达质粒对人结肠癌细胞肿瘤相关基因的表达影响。方法 分别构建并转染含有人正义和反义DNMT1的真核表达质粒入结肠癌SW 1116细胞 ,PCR和限制性内切酶证实转染结果 ,以Western印迹法分析各组细胞DNMT1蛋白的表达情况。定量PCR检测hMLH1、hMSH2及c myc、p16 INK4A 基因的表达。结果 经G4 18筛选得到稳定转染DNMT1基因的结肠癌细胞系 ,且分别在该转染有正义和反义质粒的细胞系中 ,DNMT1蛋白表达上调和下调。同时发现转染正义DNMT1的细胞中hMLH1、hMSH2及c myc的表达降低 ,而转染反义DNMT1的细胞中hMSH2的表达明显增强。各组细胞p16 INK4A基因的表达差异不明显。
- 陆嵘房静远朱红音陈萦晅程中华李恩灵
- 关键词：结肠癌细胞系肿瘤相关基因WESTERN印迹法
- 甲基化修饰对人胃癌细胞系中多种基因的调控被引量：3
- 2003年
- 甲基化紊乱与胃癌的发生有关,近年来甲基化已成为肿瘤研究的热点。目的:探讨在DNA甲基转移酶抑制剂5-氮脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-aza-dC)的化学干预下,不同分化胃癌细胞系的抑癌基因、癌基因和与凋亡相关的基因与甲基化调控的关系,并辅以流式细胞仪检测细胞周期的变化。方法:培养高分化、中分化和未分化胃癌细胞系MKN-45、MKN-28和:HGC-27,分别以不同浓度的5-aza-dC干预细胞。提取细胞的RNA,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测p16INK4A、p21WAF1、p73、c-myc、c-Ha-ras、survivin和死亡相关蛋白激酶(DAP-ki-nase)等多种基因的表达情况;同时以流式细胞仪分析细胞周期的变化。结果:抑癌基因中,MKN-45和HGC-27细胞中有p16INK4A表达,用5-aza-dC干预后其表达增强,MKN-45细胞的p16INK4A在5-aza-dC 10μmcl/L 24 h、2 μmol/L72 h和5μmol/L 72 h组表达增强,HGC-27细胞的p16INK4A在5 μmol/L 24 h和10 μmol/L 24 h组表达也有明显增强;p21WAF1、p73无明显变化。癌基因中c-myc、c-Ha-ras变化不明显。与凋亡相关的基因中,MKN-45细胞的survivin在5-aza-dC处理后表达增强,但HGC-27细胞的DAP-kinase无明显变化。结论:在不同分化的人胃癌细胞系中,甲基化修饰对抑癌基因。
- 杨丽房静远陈萦晅陆娟朱红音沈冠凤罗鸿仔
- 关键词：MKN-45细胞P16^INK4AMKN-45人胃癌细胞基因
- 甲基转移酶1表达质粒对结肠癌细胞错配修复基因甲基化及其表达的影响被引量：6
- 2004年
- 目的 分析DNA甲基转移酶 1(Dnmt1)基因的真核表达质粒对人结肠癌细胞错配修复基因甲基化及其转录水平和微卫星不稳定性 (MSI)的影响。方法 分别构建含有人的正义Dnmt1(HMT)和反义Dnmt1(THM)的真核表达质粒 ,将其转染入结肠癌SW1116细胞 ,以Western印迹实验分析各组细胞Dnmt1蛋白的表达情况。定量PCR检测hMLH1、hMSH2基因的表达。甲基化特异性PCR分析hMLH1、hMSH2启动子区甲基化情况 ,银染法研究其对微卫星不稳定性的影响。结果 转染正义Dnmt1质粒的细胞hMLH1、hMSH2的启动子甲基化水平升高 ,基因mRNA表达降低。转染反义Dnmt1质粒可使细胞中hMSH2启动子呈非甲基化状态 ,基因表达增强。未发现转染正义和反义Dnmt1基因的SW1116细胞存在MSI的变化。结论 重组Dnmt1表达质粒可通过调控人结肠癌细胞中错配修复基因的甲基化影响基因的表达。
- 陆嵘房静远朱红音陈萦晅程中华李恩灵
- 关键词：基因表达质粒结肠癌甲基化基因成分
- 乙型肝炎病毒感染基因治疗的进展被引量：1
- 1999年
- 利用基因技术治疗慢性乙型肝炎病毒感染的研究进展迅速,如反义寡核苷酸、核糖核酸酶及显性失活突变体等。本文就这些技术近年来在抗HBV方面的研究进展进行综述。
- 陈萦晅李继强
- 关键词：乙型肝炎病毒感染基因治疗
- 癌相关基因在结肠癌中的表达及其甲基化调控被引量：6
- 2003年
- 目的 探讨癌相关基因APC、p16 INK4A、p2 1WAF1和c myc等在结肠癌中的表达及其受甲基化的调控。 方法 培养结肠癌细胞SW 1116、Colo 32 0、HT2 9,分别用不同浓度的 5 aza dC干预细胞。提取细胞的RNA ,用RT PCR的方法检测p16 INK4A、p2 1WAF1、APC和c myc等多种基因的表达情况 ;同时以流式细胞仪分析SW1116和Colo 32 0的细胞周期。结果 (1)三种细胞在干预前有较弱的 p16 INK4A和APC的表达 ,而在用 5 aza dC干预后表达增强 ,且在不同的结肠癌细胞株 5 aza dC作用发挥最佳的时间与浓度不同。 (2 ) p2 1WAF1在干预前后均不表达 ,c myc在干预前后表达无明显变化。 结论 三株人结肠癌细胞中 ,5 aza dC均可诱导 p16 INK4A和APC的表达 ,但对 p2 1WAF1和c myc无明显影响。
- 陆娟房静远陈萦晅朱红音朱红音杨丽
- 关键词：结肠癌APC基因P16^INK4A基因P21^WAF1基因
- 人胃癌细胞肿瘤相关基因的表达与甲基化调控被引量：3
- 2005年
- 目的:旨在阐明胃癌的发生中多种抑癌基因和癌基因的甲基化情况,以期为进一步深入探索通过改变抑癌基因的甲基化而为胃癌治疗提供新方法. 方法:培养人胃癌细胞株MKN-45和HGC-27两种细胞,在MTT确定去甲基化制剂5-氮脱氧胞苷(5-aza- 2’-deoxycytidine,5-aza-dC)浓度和时间对细胞生长活力没有影响后,分别以2,5,和10μmol/L,浓度分别干预24和72 h,然后提取其DNA和RNA,用RT-PCR的方法检测p16INK4A,p21WAF1,p53,c-Ha-ras和c- myc等多种基因的表达情况;同时以流式细胞仪分析药物干预后的MKN-45和HGC-27的细胞周期变化; DNA分析则通过亚硫酸氢盐修饰和测序和甲基化特异性PCR(MSP)的方法检测p16INK4A基因及c-myc启动子区甲基化的情况. 结果:我们所采用的5-aza-dC的浓度和时间对细胞的生长无显著性影响.5-aza-dC干预前,MKN-45和HGC-27两种胃癌细胞系中均有p16INK4A表达,5-aza- dC干预后在MKN-45和HGC-27两种胃癌细胞系中p16INK4A的表达增强,且不同的胃癌细胞株表达增强最明显时的时间与浓度不同.-p53,p21WAF1,c-myc,c-Ha-ras 等多种基因在干预前后均有表达,且在干预前后无明显变化.在5-aza-dC干预后,HGC-27细胞周期阻滞在G1期,而MKN-45细胞的周期无明显改变.p16INK4A启动子区存在甲基化使得该基因的表达减少,在去甲基化试剂处理后使其表达增强. 结论:人胃癌细胞系MKN-45和HGC-27中,p16INK4A 启动子甲基化是其在表达减弱的主要原因,其去甲基化程度取决于5-aza-dC干预的时间和浓度.
- 杨丽朱红音程中华陆嵘陈萦晅房静远
- 关键词：5-AZA-DCP16^INK4A基因P21^WAF1C-HA-RASHGC-27MKN-45细胞
- 氧化苦参碱抗丙型肝炎病毒的体外实验研究被引量：33
- 2001年
- 目的观察氧化苦参碱体外抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的活性。方法借助脂质体将重组ＨＣＶ基因（ｐＢＫ－ＨＣＶ）转染ＳＭＭＣ－７７２１细胞，并以此为模型，通过ｂＤＮＡ信号扩增法定量检测细胞内ＨＣＶ ＲＮＡ的变化，观察氧化苦参碱对ＨＣＶ ＲＮＡ的抑制作用； ＭＴＴ比色法观察药物的细胞毒性。结果建立了重组ＨＣＶ基因转染的稳定表达细胞模型，可作为药物研究的工具。氧化苦参碱浓度为１００— １０００μｇ／ｍｌ时能明显降低细胞内ＨＣＶＲＮＡ水平，有效浓度范围内无明显细胞毒性作用。结论氧化苦参碱能够在细胞水平有效地抑制ＨＣＶ ＲＮＡ，具有直接抗ＨＣＶ作用。
- 陈萦晅李继强曾民德陆伦根邱德凯茅益民范竹萍华静
- 关键词：肝炎病毒丙型氧化苦参碱抗丙型肝炎病毒
- 腹腔镜辅助切除术治疗结肠癌是安全有效的被引量：2
- 2005年
- 陈萦晅
- 关键词：腹腔镜辅助结肠癌LANCET伤口并发症短期疗效长期疗效
