苏兴文
- 作品数：58 被引量：236H指数：8
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 3β,5α,6β-三羟基胆甾烷诱导恶性胶质瘤细胞的凋亡被引量：6
- 2013年
- 目的:研究3β,5α,6β-三羟基胆甾烷(Triol)诱导恶性胶质瘤细胞凋亡的作用及其机制。方法:以不同浓度的Triol作用于C6细胞和A172细胞不同时间。采用MTT法检测细胞存活率,Hoechst 33342染色和TUNEL法检测细胞凋亡,试剂盒检测caspase活性变化,蛋白免疫印记方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2家族蛋白的变化。结果:Triol可呈剂量和时间依赖性降低C6细胞和A172细胞的存活率;Triol处理细胞48 h,C6细胞和A172细胞的IC50值分别为(17.8±0.6)μmol/L和(20.6±0.2)μmol/L。Hoechst 33342染色、TUNEL检测和凋亡执行酶caspase-3活性检测结果显示,给药组中2种细胞都出现明显凋亡核象、TUNEL阳性细胞数增多和caspase-3的激活。Triol作用于C6细胞12 h、24 h和48 h后,在凋亡外通路中激活的caspase-8和在凋亡内通路中激活的caspase-9活性均随时间升高,抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL的表达量随时间降低,而促凋亡蛋白Bak的表达量随时间升高。结论:Triol通过激活内、外凋亡通路引起恶性胶质瘤细胞的凋亡,且Bcl-2家族蛋白在此过程中起重要的调控作用。
- 谢珊珊朱文博颜敏林园张海鹏邱鹏新苏兴文颜光美胡海燕
- 关键词：神经胶质瘤细胞凋亡BCL-2家族蛋白
- KIAA0280的亚细胞定位及在缺血脑组织中的表达被引量：3
- 2006年
- 目的观察大鼠急性局灶性脑缺血时缺血组织与非缺血组织中KIAA0280蛋白的表达及亚细胞定位。方法应用免疫组织化学法测定KIAA0280在大鼠急性脑缺血后在缺血与非缺血区表达的差异,利用激光共聚焦扫描显微镜检测KIAA0280的亚细胞定位。结果免疫组织化学结果证实了KIAA0280在大鼠急性局灶性脑缺血后表达的差异,激光共聚焦扫描显微镜证实KIAA0280在大鼠皮层细胞。胶质细胞胞浆和细胞膜上均出现表达。KIAA0280在脑缺血后明显上调表达。结论KIAA0280与蛋白质合成和信号传递有密切关系,为新的脑缺血相关蛋白质,对其功能深入研究将对诊断和治疗脑缺血缺氧疾病奠定基础。
- 臧林泉苏兴文苏涛邱鹏新颜光美
- 关键词：激光共聚焦扫描显微镜亚细胞定位脑缺血免疫组化
- 米诺环素抑制MPP^+诱导的PC12细胞凋亡和线粒体功能损伤被引量：6
- 2011年
- 目的:探讨米诺环素(minocycline)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的PC12细胞凋亡和线粒体功能损伤的保护作用。方法:将MPP+加入体外培养的的PC12细胞中,建立多巴胺能神经元凋亡模型,实验过程中用minocycline进行预处理,四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞存活率,Hoechst染色检测细胞凋亡,DCFH-DA检测ROS聚集,JC-1检测细胞线粒体膜电位变化。结果:0.5 mmol/L MPP+处理PC12细胞24 h,能明显抑制细胞生长(抑制率80.8%),诱导细胞发生凋亡(凋亡率5.22%),同时ROS浓度提高230.0%,线粒体膜去极化(绿/红荧光强度比为11.95)。而加入10μmol/L minocycline预处理30 min可明显升高MPP+处理的PC12细胞活性,细胞凋亡率明显降低(P<0.01),ROS浓度明显下降,绿/红荧光强度比也明显降低(P<0.01)。结论:Minocycline抑制MPP+诱导的PC12细胞凋亡部分通过对抗其线粒体功能而发挥作用。
- 乐亮李晶洁黎仕锋朱文博束敏峰苏兴文邱鹏新颜光美
- 关键词：米诺环素PC12细胞线粒体功能损伤
- 尖吻蝮蛇蛇毒纤溶因子单克隆抗体的制备被引量：3
- 1999年
- 目的：制备从尖吻蝮蛇蛇毒中分离的纤溶因子的单克隆抗体，为克隆基因提供特异性的探针。方法：将纤溶因子免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，筛选稳定分泌抗体的细胞株。采用血纤维蛋白平板法，观察单克隆抗体能否抑制纤溶因子的纤溶作用。结果：获得２株稳定分泌单克隆抗体的细胞株。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹显示该单克隆抗体能特异地与纤溶因子结合，与其它蛋白无交叉反应，此外，这２株单克隆抗体具有抑制纤溶因子溶解人血纤维蛋白的作用。结论：这２株抗体不仅能特异地与纤溶因子结合，而且具有抑制纤溶的作用，为克隆纤溶因子基因及其功能表达提供了特异性的研究工具。
- 邱鹏新黎明涛苏兴文陈家树颜光美
- 关键词：提纯纤溶酶单克隆抗体
- T_4 DNA连接酶介导的5’RACE法克隆大鼠Nor 1全长cDNA被引量：3
- 2004年
- 目的:克隆75AEST全长cDNA序列。方法:抽提在25mmol/L KCl条件下培养7d的大鼠小脑颗粒神经元的总RNA后,用DNA连接酶介导的5’RACE法克隆75A表达序列标签(EST)cDNA5’端未知序列,其产物亚克隆到pGEM-Teasy后进行序列测定以及同源性分性。结果:首轮5’RACE扩增出2.5kb序列后,75A EST鉴定为神经来源孤儿受体1(Nor1)基因的部分序列;再经过二次轮5’RACE,我们首次克隆Nor-1的全长cDNA序列。结论:T_4DNA连接酶介导的5’RACE是一种效率较高的克隆mRNA5’端未知序列的好方法,为进一步研究Nor1在小脑颗粒神经元存活或分化过程中的作用奠定基础。
- 银巍黄奕俊苏兴文赵灵芝邱鹏新颜光美
- 关键词：小脑神经元
- 泛素结合酶E2抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
- 本发明首次公开了泛素结合酶E2抑制剂可以作为溶瘤病毒的抗瘤增效剂/耐药逆转剂。发明人通过抑制泛素结合酶E2可以显著增强溶瘤病毒的溶瘤效应。发明人采用了抑制泛素结合酶E2活性的化合物Bay11‑7082协同溶瘤病毒尤其是M...
- 梁剑开蔡静林园苏兴文
- 文献传递
- 尖吻蝮毒腺cDNA文库的构建、金属蛋白酶基因克隆和序列分析(英文)被引量：1
- 2006年
- 目的 构建非标准化尖吻蝮（五步蛇，Agkistrodon acutus）毒腺cDNA文库，随机挑取克隆测序，分析金属蛋白酶基因。方法 以Tnzd试剂提取新鲜尖吻蝮毒腺总RNA，以superscript Ⅱ反转录酶合成cDNA第一链并以DNA聚合酶Ⅰ连续合成第二链。双链DNA经过含EcoRⅠ酶切位点接头加接，末端磷酸化并以XhoⅠ内切酶酶切，按照〈0．25kb，0．25-0．5kb，0．5-1kb，1-2kb和〉2kb5个片段大小分别回收，随后与pBluescriptⅡSK（＋）载体相连转化E.coli DH10B，构建成尖吻蝮毒腺cDNA文库。随机挑取克隆5’端测序，共获得8696条高质量表达序列标签，经过序列拼接和聚类，这些序列在经过功能注释后最终被聚类成2855个基因聚类。其中，发现一个由74个克隆组成的基因聚类（Agkihagin）为新的金属蛋白酶基因。经反转录和巢式PCR扩增该基因并对其进行结构分析。结果 构建好的文库含有2．048×10^6个重组子，新的金属蛋白酶开框读码序列全长1827个核苷酸，编码608个氨基酸，属于PⅢ型金属蛋白酶。其Zn^2＋结合模序HEMGHNLGIDH和去整合素模序DECD在进化上高度保守。结论 该文库符合建库标准库容要求，为构建尖吻蝮毒腺基因表达谱和筛选新的目的基因提供了有效平台；克隆的金属蛋白酶基因与GenBank中其他蛇毒金属蛋白酶氨基酸序列同源性最高达87％，为研究蛇毒金属蛋白酶结构与功能的关系奠定了良好基础。
- 刘清华胡松年银巍苏兴文张晓伟李晨吉邱鹏新颜光美
- 关键词：基因文库
- 普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡的抑制作用(英文)被引量：1
- 2006年
- 目的 观察普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡的保护作用。方法 建立大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡模型，采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记，Hoeehst 33258核染色，琼脂糖凝胶电泳以及醋酸荧光素染色等方法，根据细胞凋亡的形态学及生物化学等特征，分析普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡的影响。结果大鼠小脑颗粒神经元与普卡霉素预孵育1h及持续作用下，普卡霉素浓度依赖性地抑制低钾诱导24h所致的大鼠小脑颗粒神经元凋亡，其有效浓度在50～200nmol·L^-1之间，普卡霉素浓度为200nmol·L^-1时达到的最大凋亡抑制率约为80％。结论 普卡霉素对大鼠小脑颗粒神经元低钾性凋亡具有较强的抑制作用。
- 孙林光黄奕俊苏兴文孔天翰邱鹏新颜光美
- 关键词：小脑神经元钾
- 5-脂氧合酶抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用
- 本发明首次公开了5‑脂氧合酶抑制剂可以作为溶瘤病毒的抗瘤增效剂/耐药逆转剂。提供了一种低毒、对正常细胞没有毒性的溶瘤病毒增效剂，其可以使得溶瘤病毒发挥更好的抗瘤效果，在发挥抗肿瘤药物效用的同时，能尽量小化药物组合物的毒性...
- 蔡静林园梁剑开苏兴文
- 文献传递
- 应用mRNA差异显示技术筛选大鼠小脑颗粒神经元凋亡模型中差异表达基因被引量：2
- 2007年
- 目的:应用mRNA差异显示技术对大鼠小脑颗粒神经元凋亡模型中差异表达基因进行筛选,克隆以及鉴定。方法:大鼠小脑颗粒神经元的分离和原代培养;对大鼠小脑颗粒神经元凋亡逆转模型进行荧光mRNA差异显示逆转录PCR(FDDRT-PCR,fluorescent differential display RT-PCR);EST片段亚克隆入pGEM-T Ea-syTM,克隆后测序并进行序列同源性检索;反Northern杂交重鉴定与筛选。结果:通过DDRT-PCR获得164个在小脑颗粒神经元凋亡模型中差异表达的ESTs;对其中的17个ESTs进行了克隆并测序;通过反Northern杂交的初步筛选初步鉴定出5个阳性片段。结论:阳性差异表达EST的筛选、克隆以及鉴定为神经元凋亡与保护分子机制研究奠定基础。
- 银巍黄奕俊皮荣标苏兴文赵灵芝邱鹏新颜光美
- 关键词：细胞凋亡差异表达基因小脑神经元
