袁耀武
- 作品数：76 被引量：489H指数：12
- 供职机构：河北农业大学食品科技学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金“十五”国家科技攻关计划项目河北省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学医药卫生农业科学更多>>
- 实时荧光LAMP技术快速检测变形杆菌被引量：4
- 2016年
- 建立一种快速检测变形杆菌的方法。采用实时荧光LAMP(Real Amp)技术检测变形杆菌,分析Gen Bank中公布的变形杆菌atp D基因序列,针对其6个区域设计4条引物,利用实时荧光监测仪等温(62℃)扩增模板DNA,通过与电脑相连进行实时监测,对该方法检测变形杆菌的特异性、灵敏度、人工污染猪肉检出限等方面进行研究,并将该检测法的灵敏度与普通环介导等温扩增(LAMP)检测法进行比较。结果表明,Real Amp检测方法比普通LAMP检测方法更加方便快捷,20 min内即可判定结果;用于特异性试验的19株试验菌株中,6株变形杆菌呈阳性结果,其他13株非变形杆菌均呈阴性结果;检测纯菌的灵敏度为8.1CFU/m L,是普通LAMP检测方法的10倍;人工污染猪肉的检出限为81CFU/m L。本研究建立的Real Amp检测方法操作简单,耗时短,特异性强、灵敏度高,能够实现对变形杆菌的快速检测。
- 马桂芬张蕴哲付博宇袁耀武苑宁王鑫张伟
- 关键词：LAMP变形杆菌
- PCR检测乳品中金黄色葡萄球菌被引量：39
- 2006年
- 目的利用PCR技术,无需增菌,直接检测乳品中的金黄色葡萄球菌。方法通过溶剂提取的方法从人工样品中提取模板,以金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因(nuc)为靶基因,经过PCR扩增得到279bp的产物。经过DNA测序证实该产物为目的扩增产物。采用PCR方法实际检测了乳品中的金黄色葡萄球菌,同时,与国标GB4789.10—94方法及两种快速检测致病性金黄色葡萄球菌测试片PetrifilmRSA.CountPlate及Baird-parker+RPFAgar进行了比较。结果PCR方法的灵敏度高,全脂乳和脱脂乳检测的检出限为10CFU/ml,奶酪检测的检出限为55CFU/g,可在6h内完成对乳品中金黄色葡萄球菌的检测,比目前普遍采用的先增菌再进行PCR检测的方法缩短了12～24h。与国标方法相比,PCR方法的符合率为94.3%,敏感性为100%。结论采用溶剂提取制备模板的方法可有效的用于PCR直接检测(无需增菌)乳及乳制品中的金黄色葡萄球菌。
- 杨洋张伟袁耀武钟晓英马雯
- 关键词：PCR乳品金黄色葡萄球菌
- 利用DOT-ELISA筛选酵母融合子被引量：3
- 2004年
- 利用动物免疫方法制备了啤酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)和毕赤氏酵母 (Pichiapas toris)的免疫血清。将啤酒酵母和毕赤氏酵母单倍体化 ,通过原生质体融合技术促使其融合。融合后将再生菌落影印到硝酸纤维膜上分别和双亲免疫血清做Dot ELISA反应 ,呈现双阳性的即为双亲融合子。
- 袁耀武张伟李英军马雯林杨
- 关键词：免疫血清DOT-ELISA双亲毕赤氏酵母融合子单倍体
- 生活用纸微生物污染的检测被引量：3
- 2004年
- 袁耀武张伟钟晓英吴国江林杨
- 关键词：生活用纸微生物污染大肠菌群
- 用于PCR检测的乳品中金黄色葡萄球菌DNA提取方法比较研究被引量：12
- 2005年
- 比较了乳品中金黄色葡萄球菌DNA的6种提取方法的效果,确定了一种可有效从乳品中提取金黄色葡萄球菌DNA的方法。该方法无需对样品进行增菌,可直接从乳品中提取金黄色葡萄球菌DNA,作为模板进行PCR检测,检测效果良好,对UHT全脂乳、脱脂乳和奶酪的最低检出限分别为10、10CFU/mL和55CFU/g。
- 杨洋张伟袁耀武何俊萍马晓燕丁鑫王呸玉
- 关键词：乳品金黄色葡萄球菌DNA提取DNA提取方法PCR检测最低检出限UHT
- 普通微生物学教学方法的探讨
- 2004年
- 袁耀武张伟马雯李英军林杨
- 关键词：微生物学教学方法理论教学实验教学
- 免疫亲和层析技术协同酶联免疫吸附法检测赭曲霉毒素A
- 2024年
- 利用免疫亲和层析技术(immunoaffinity chromatography,IAC)对样品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)进行捕获与浓缩,利用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法对IAC捕获的目标物OTA进行测定。IAC与ELISA中的抗OTA单克隆抗体来自不同的克隆株,分属不同独特型,与OTA结合靶点的选择性存在差异,IAC与ELISA协同检测,可以有效过滤OTA结构类似物造成的干扰,提高免疫分析的特异性与灵敏度。该方法用于加标样品测定时,OTA的检出限为0.2 ng/g,定量限为0.4 ng/g,OTA的平均回收率为75.9%,与单一的ELISA法相比,该方法虽然回收率略低,但灵敏度可以显著提高,达到ELISA法的60倍。通过对49份样品的实际检测,该方法检出阳性样品与国标法的符合率达到100%,漏检率为0%,由此可见,该方法在准确性上表现出明显的优势。作为一种综合免疫分析技术,该方法不需要大型仪器设备,对操作环境没有严格要求,便于基层实验室对样品中OTA的分析。
- 张蕴哲张先舟袁耀武张伟
- 关键词：酶联免疫吸附法赭曲霉毒素A
- 燃料乙醇用高产酒精酵母的筛选及鉴定被引量：33
- 2003年
- 采用含有高浓度酒精选择性培养基从自然界中分离得到115株耐高酒精酵母,经过初筛、复筛,得到1株高产酒精酵母菌株SP-48,在料水比1:2,发酵72h的条件下,静止发酵,成熟醪酒精的体积分数可达16.2。经鉴定该酵母属(Saccharomyces)的酿酒酵母(Saccharomyces cervisiae)
- 毛志群张伟檀建新袁耀武李英军
- 关键词：燃料乙醇高产酒精酵母酵母菌种
- 耐高温活性干酵母(AADY)在白酒生产中的应用研究
- 1994年
- 我国是文明古国,有着几千年的酿酒历史,中国白酒以其独特的操作工艺及风味为世界文化史做出了卓越贡献。但由于在配料、制曲、酿造工艺上多沿袭传统方法,粮耗多,发酵期长,出酒率低,酒质也难以提高。 我国人均粮食产量仅400kg左右。
- 袁耀武唐朝晖张宾赵忠全
- 关键词：食品白酒AADY
- 新型Bt杀虫蛋白基因的克隆、表达及利用
- 王勤英檀建新陆秀君张伟宋萍苏旭东毛文杰吴会贤王永郝会海马晓燕耿硕袁淑杰袁耀武马雯
- 该项科技成果包括河北省自然科学基金（303213）、河北省科技厅博士资金（05547005D-5）和河北农业大学博士基金资助，起止年限为2003～2006年。该成果属于生物防治应用基础领域。该研究深入挖掘我国自然界的杀虫...
- 关键词：
- 关键词：工程菌基因克隆苏云金芽孢杆菌
