赵越
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠骨髓来源未成熟树突状细胞诱导同种幼稚T淋巴细胞分化的研究被引量：1
- 2014年
- 目的研究小鼠骨髓来源未成熟树突状细胞（imDC）诱导同种幼稚T淋巴细胞分化为调节性T淋巴细胞（Treg细胞）及辅助性T淋巴细胞（TH）1、TH2和TH17的能力。方法培养Balb／c小鼠骨髓来源树突状细胞（DC），加入脂多糖刺激DC成熟。分别将inff）C与成熟DC（mDC）与同种C57BL／6小鼠幼稚T淋巴细胞共同培养，用酶联免疫斑点法检测Tn1类细胞因子[γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素（IL）-2]、TH2类细胞因子（IL-4和IL-10）、TH17类细胞因子（IL-17）的分泌情况。imDC和miX；分别与同种幼稚T淋巴细胞在加入IL-2及转化生长因子B，的条件下共同培养，用流式细胞术检测T淋巴细胞中Treg细胞比例。结果分别与imDC或mDC共同培养后，T淋巴细胞中分泌IFN-γ细胞的数量分别为（11．67±2．18）／2×105个细胞和（182．00±23．71）／2×105个细胞（P〈0．01），分泌．IL-2细胞的数量分别为（26．67±2．96）／2×105个细胞和（318．30±18．62）／2×105个细胞（P〈0．01），分泌IL-4细胞的数量分别为（17．00±3．78）／2×105个细胞和（45．33±3．48）／2×105个细胞（P〈0．01），分泌IL-10细胞的数量分别为（7．00±1．00）／2×105个细胞和（158．70±10．90）／2×105个细胞和（P〈0．001），分泌IL-17细胞的数量为（0．66±0．33）／2×105个细胞和（238．30±24．39）／2×105个细胞（P〈0．001）。imDC诱导产生的Treg细胞占（22．70±1．53）％，高于mDC诱导产生的（5．42±1．27）％（P〈O．001）。结论imDC诱导同种幼稚T淋巴细胞较多分化为Treg细胞，而较少分化为TH1、TH2和TH17细胞。
- 赵越王璐阮永乐王筱啸向莹王军祥陈刚
- 关键词：树突细胞移植耐受
- 抗人胸腺细胞免疫球蛋白与抗人T淋巴细胞免疫球蛋白体外淋巴细胞杀伤效价的比较被引量：3
- 2014年
- 目的探讨相同浓度下抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）与抗人T淋巴细胞免疫球蛋白（ALG）杀伤淋巴细胞的效价。方法将相同浓度的ATG和ALG倍比稀释,对正常受试者外周血淋巴细胞进行淋巴细胞毒试验（CDC）,用流式细胞仪进行相关检测。结果体外淋巴毒试验中,ATG和ALG对6名健康志愿者外周血淋巴细胞的杀伤作用随着稀释滴度的增加逐渐下降。ATG及ALG滴度为1∶1时对淋巴细胞杀伤比率分别为54.06%～82.49%和38.06%～70.38%;ATG在1∶128时杀伤比率〈10%,ALG在1∶64时杀伤比率〈10%。ATG和ALG对外周血T淋巴细胞杀伤差异无统计学意义（P〉0.05）,对B淋巴细胞杀伤差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 ATG和ALG均可显著清除正常人外周血淋巴细胞。相同浓度下,ATG的效价大约是ALG的2倍。ATG较ALG有更强的清除B细胞的作用。
- 王筱啸王军祥赵越李迎坤陈刚
- 小鼠骨髓源性树突状细胞的体外诱导扩增和鉴定被引量：3
- 2013年
- 目的体外诱导扩增获取大量高纯度的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC),并研究不同生长状态的DC成熟情况及进行生物学特性鉴定。方法以重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4),体外诱导小鼠骨髓细胞分化为DC,脂多糖(LPS)刺激24h,倒置显微镜动态观察细胞形态学变化,并分别收集悬浮细胞、贴壁细胞,流式细胞术(FACS)分析DC细胞表面分子CD11c、MHCⅡ类分子、CD80和CD86的表达水平,并应用混合淋巴细胞反应(MLR)检测其刺激异基因淋巴细胞增殖的能力。结果经体外诱导培养第3天即可见大量细胞集落形成;培养至第9天,细胞形态不规则,具有典型DC形态。同组悬浮DC表面MHCⅡ类分子和共刺激分子CD80、CD86的表达水平高于贴壁DC。LPS刺激24h后,DC表面MHCⅡ类分子、CD80、CD86的表达水平显著升高,同时可以显著刺激同种异基因淋巴细胞增殖。结论体外简易诱导培养可以获得高纯度小鼠骨髓来源的各具特性的DC,为开展DC的相关实验研究提供大量稳定的细胞来源。
- 马东霞赵越向莹刘斌
- 关键词：树突状细胞
- 大鼠脂肪来源干细胞抵抗人血清介导的异种体液免疫杀伤作用及其机制被引量：1
- 2014年
- 目的研究大鼠脂肪来源干细胞（rASC）抵抗人血清介导的异种体液性杀伤的作用及其主要机制。方法分离培养SD大鼠ASC，将2～8代的rASC作为实验材料，以大鼠淋巴细胞（rLC）作为对照。采用流式细胞技术，检测两种细胞异种抗原”Gal的表达情况，体积分数20％正常人血清对两种细胞的杀伤作用、两种细胞分别与正常人血清中天然抗体IgM和IgG的结合情况，以及与正常人血清作用后补体C3c、CAc,CSb-9在两种细胞上的沉积情况。结果成功分离和培养rASC，rASC表面标志检测呈CD44阳性、CD45阴性、CD90阳性及主要组织相容性抗原Ⅱ阴性，并成功诱导rASC向成脂细胞和成骨细胞分化。相对于rLC，rASC对人血清介导的异种体液性杀伤具有明显的抵抗作用，其几何平均荧光强度（Gmean）值为（20．42±2．80）％，低于rLC的（51．84±6．70）Vo（P〈0．01）；rASC上α-Gal的表达量为13．97±0．33，显著低于rLC的24．47±3．03（P〈0．05）；rASC与人血清中IgG和IgM的结合量分别为9．4±2．0和5．73±1．0，显著低于rLC的107．2±4．8和27．49±3．9（P〈0．01）；与正常人血清作用后，rLC可见显著的C3c、CAc和C5b-9沉积（Gmean值分别为1924±509．4、177．3±37．17和37．05±7．4），但rASC仅有较少C3c和CAc沉积（Gmean值分别为294．6±38．02和35．23±3．1），C5b-9沉积几乎为阴性（Gmean值为5．63±1．74），两种细胞间比较，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论rASC能明显抵抗人血清介导的异种体液免疫杀伤作用，其机制可能与rASC低表达异种抗原α-Gal及抑制了补体攻膜复合物形成有关。
- 赵越王璐阮永乐王筱啸贾钰向莹陈刚
- 关键词：脂肪干细胞体液免疫异种抗原
- OX40信号调节抑制小鼠CD4＋CD25＋调节性T淋巴细胞Foxp3的表达被引量：4
- 2013年
- 目的探讨共刺激信号OX40对体外诱导的小鼠CD4＋CD25＋适应性调节性T淋巴细胞（iTreg）的Foxp3表达的影响。方法制备C57BL／6小鼠淋巴细胞悬液，经免疫磁珠法分选，获得CD4＋CD25一静息T淋巴细胞，与抗CD3单克隆抗体、抗CD28单克隆抗体、转化生长因子B1、白细胞介素2共孵育，诱导产生Foxp3＋iTreg。在此基础上，于培养体系中加入OX40激动型抗体及其对照抗体，利用流式细胞仪分析研究OX40信号刺激对iTregFoxp3表达的影响。结果C57BL／6小鼠淋巴结中CD4＋CD25＋天然调节性T淋巴细胞（Treg）比例为（5．0±0．4）％，体外诱导培养的CD4＋CD25＋Treg比例为（71．8±13．4）％，其中Foxp3阳性表达占（74．9±1．9）％。OX40激动型抗体组CD4＋CD25＋Treg细胞比例为（80．0±1．6）%，其中Foxp3表达水平为（59．2±0．7）％；OX40激动型抗体对照抗体组CD4＋CD25＋Treg细胞比例为（86．0±1．4）％，其中Foxp3表达水平为（70．0±0．8）％，两组问差异有统计学意义（P〈0．05）。结论静息T淋巴细胞可以在体外诱导培养获得高纯度iTreg；OX40信号刺激可以显著抑制CD25＋iTreg细胞Foxp3的表达。
- 马东霞王璐赵越向莹刘斌
- 关键词：T淋巴细胞CD4共刺激
- 一氧化碳释放分子2减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤被引量：4
- 2013年
- 目的探讨一氧化碳释放分子2（CORM-2）对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用及其效应。方法制备Balb／c小鼠原位肾脏缺血再灌注模型：在32℃下完全阻断小鼠左肾血流40min，然后恢复血流灌注，同时切除小鼠对侧肾脏。小鼠分别于术前1h经尾静脉注射CORM-2溶液（CoRM-2组）或失活CORM-2溶液（iCORM-2组），另设假手术组作为对照。再灌注24h后，检测各组小鼠肾功能，取肾脏组织行HE和原位末端转移酶标记染色检查，评价其肾脏组织损伤程度。再灌注1、3、7d后，取小鼠肾脏组织进行免疫组织化学和免疫荧光检测，观察小鼠肾缺血再灌注损伤过程中炎症反应的情况。结果IRI组出现明显肾功能损害，其小鼠血肌酐和尿素氮水平与假手术组相比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；CORM-2组肾功能损害程度减轻，其小鼠血肌酐和尿素氮水平低于IRI组和iCORM-2组（P〈0．05）。常规病理学检查发现，IRI小鼠肾脏组织中肾小管上皮细胞发生凋亡坏死；CORM-2组肾小管上皮细胞的凋亡减轻。IRI组小鼠缺血再灌注损伤早期（再灌注1d和3d），肾脏组织中出现大量MPO阳性中心粒细胞和肿瘤坏死因子α，介导急性炎症反应。CORM-2组MPO阳性中性粒细胞浸润和肿瘤坏死因子α产生明显减少。结论CORM-2可以减轻小鼠肾缺血再灌注中的炎症反应，发挥保护作用。
- 阮永乐王璐赵越王军祥陈松明长生陈刚
- 关键词：缺血再灌注损伤一氧化碳
