阮永乐
- 作品数：7 被引量：18H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠脂肪来源干细胞抵抗人血清介导的异种体液免疫杀伤作用及其机制被引量：1
- 2014年
- 目的研究大鼠脂肪来源干细胞（rASC）抵抗人血清介导的异种体液性杀伤的作用及其主要机制。方法分离培养SD大鼠ASC，将2～8代的rASC作为实验材料，以大鼠淋巴细胞（rLC）作为对照。采用流式细胞技术，检测两种细胞异种抗原”Gal的表达情况，体积分数20％正常人血清对两种细胞的杀伤作用、两种细胞分别与正常人血清中天然抗体IgM和IgG的结合情况，以及与正常人血清作用后补体C3c、CAc,CSb-9在两种细胞上的沉积情况。结果成功分离和培养rASC，rASC表面标志检测呈CD44阳性、CD45阴性、CD90阳性及主要组织相容性抗原Ⅱ阴性，并成功诱导rASC向成脂细胞和成骨细胞分化。相对于rLC，rASC对人血清介导的异种体液性杀伤具有明显的抵抗作用，其几何平均荧光强度（Gmean）值为（20．42±2．80）％，低于rLC的（51．84±6．70）Vo（P〈0．01）；rASC上α-Gal的表达量为13．97±0．33，显著低于rLC的24．47±3．03（P〈0．05）；rASC与人血清中IgG和IgM的结合量分别为9．4±2．0和5．73±1．0，显著低于rLC的107．2±4．8和27．49±3．9（P〈0．01）；与正常人血清作用后，rLC可见显著的C3c、CAc和C5b-9沉积（Gmean值分别为1924±509．4、177．3±37．17和37．05±7．4），但rASC仅有较少C3c和CAc沉积（Gmean值分别为294．6±38．02和35．23±3．1），C5b-9沉积几乎为阴性（Gmean值为5．63±1．74），两种细胞间比较，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论rASC能明显抵抗人血清介导的异种体液免疫杀伤作用，其机制可能与rASC低表达异种抗原α-Gal及抑制了补体攻膜复合物形成有关。
- 赵越王璐阮永乐王筱啸贾钰向莹陈刚
- 关键词：脂肪干细胞体液免疫异种抗原
- 小鼠骨髓来源未成熟树突状细胞诱导同种幼稚T淋巴细胞分化的研究被引量：1
- 2014年
- 目的研究小鼠骨髓来源未成熟树突状细胞（imDC）诱导同种幼稚T淋巴细胞分化为调节性T淋巴细胞（Treg细胞）及辅助性T淋巴细胞（TH）1、TH2和TH17的能力。方法培养Balb／c小鼠骨髓来源树突状细胞（DC），加入脂多糖刺激DC成熟。分别将inff）C与成熟DC（mDC）与同种C57BL／6小鼠幼稚T淋巴细胞共同培养，用酶联免疫斑点法检测Tn1类细胞因子[γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素（IL）-2]、TH2类细胞因子（IL-4和IL-10）、TH17类细胞因子（IL-17）的分泌情况。imDC和miX；分别与同种幼稚T淋巴细胞在加入IL-2及转化生长因子B，的条件下共同培养，用流式细胞术检测T淋巴细胞中Treg细胞比例。结果分别与imDC或mDC共同培养后，T淋巴细胞中分泌IFN-γ细胞的数量分别为（11．67±2．18）／2×105个细胞和（182．00±23．71）／2×105个细胞（P〈0．01），分泌．IL-2细胞的数量分别为（26．67±2．96）／2×105个细胞和（318．30±18．62）／2×105个细胞（P〈0．01），分泌IL-4细胞的数量分别为（17．00±3．78）／2×105个细胞和（45．33±3．48）／2×105个细胞（P〈0．01），分泌IL-10细胞的数量分别为（7．00±1．00）／2×105个细胞和（158．70±10．90）／2×105个细胞和（P〈0．001），分泌IL-17细胞的数量为（0．66±0．33）／2×105个细胞和（238．30±24．39）／2×105个细胞（P〈0．001）。imDC诱导产生的Treg细胞占（22．70±1．53）％，高于mDC诱导产生的（5．42±1．27）％（P〈O．001）。结论imDC诱导同种幼稚T淋巴细胞较多分化为Treg细胞，而较少分化为TH1、TH2和TH17细胞。
- 赵越王璐阮永乐王筱啸向莹王军祥陈刚
- 关键词：树突细胞移植耐受
- 一氧化碳对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其新机制研究
- 本文主要从以下四个方面展开论述： 第一部分 一氧化碳释放分子对小鼠可逆性肾缺血再灌注损伤的保护作用 目的：探讨一化碳释放氧分子CORM-2对小鼠可逆性肾缺血再灌注损伤的保护作用。 方法：建立小鼠原位肾缺血再灌注损伤...
- 阮永乐
- 关键词：肾脏缺血再灌注损伤病理机制一氧化碳
- 大鼠到小鼠异种胰岛移植模型建立及其免疫学特点研究
- 【目的】建立大鼠到小鼠异种胰岛移植模型，并探讨这种协调性异种胰岛移植排斥反应发生的机制及病理学特点。
【方法】使用Ⅴ型胶原酶，采用内消化法分离培养SD大鼠胰岛。采用0.5％四氧嘧啶建立C57BL/6小鼠糖尿病模型。...
- 阮永乐
- 关键词：异种胰岛移植排斥反应免疫学特征
- 新生猪Sertoli细胞与大鼠胰岛细胞联合移植延长大鼠移植胰岛的存活时间被引量：1
- 2009年
- 目的探讨新生猪Sertoli细胞（NPSCs）与大鼠胰岛细胞联合移植对延长大鼠同种异体胰岛移植物存活时间的作用及其主要的机制。方法将糖尿病Wistar大鼠随机分为3组。（1）单纯移植组（n=6）：单纯移植150（1个胰岛当量（IEQ）的SD大鼠胰岛细胞至糖尿病大鼠的左肾包膜下；（2）分侧移植组（n=4）：将1500个IEQ的SD大鼠胰岛细胞移植到糖尿病大鼠的左肾包膜下，同时将1×10^7个NPSCs移植到糖尿病大鼠的右肾包膜下；（3）混合移植组（n=6）：将1500个IEQ的SD大鼠胰岛细胞和1×10^7个NPSCs混合移植到糖尿病大鼠的左肾包膜下。移植后每天监测各组的血糖水平，以了解移植物的存活时间；移植后发生排斥反应时获取移植物标本，行HE和免疫组织化学染色，观察移植物中CD3^＋T淋巴细胞浸润情况及细胞凋亡调控基因（Bcl-2）和血红素氧合酶1（HO-1）基因的表达水平。结果单纯移植组、分侧移植组和混合移植组胰岛移植物存活时间分别为（5．7±1．0）d、（5．3±0．5）d和（16．3±1．4）d，混合移植组存活时间较其他两组显著延长（P〈0．05）。单纯移植组移植区可见大量淋巴细胞浸润，主要为CD3^＋T淋巴细胞；混合移植组移植区Bcl-2基因呈高表达；各组移植区HO-1基因均有表达，差异不明显。结论NPSCs与大鼠胰岛细胞联合移植可以延长大鼠同种异体胰岛移植物的存活时间，其机制可能与NPSCs抑制移植物淋巴细胞浸润、促进Bcl-2基因高表达的局部免疫调节作用有关。
- 阮永乐尹注增李俊华向莹郭晖钟山张炯郭晓伟陈实陈刚
- 关键词：塞尔托利细胞胰岛血红素氧化酶
- 一氧化碳释放分子2减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤被引量：4
- 2013年
- 目的探讨一氧化碳释放分子2（CORM-2）对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用及其效应。方法制备Balb／c小鼠原位肾脏缺血再灌注模型：在32℃下完全阻断小鼠左肾血流40min，然后恢复血流灌注，同时切除小鼠对侧肾脏。小鼠分别于术前1h经尾静脉注射CORM-2溶液（CoRM-2组）或失活CORM-2溶液（iCORM-2组），另设假手术组作为对照。再灌注24h后，检测各组小鼠肾功能，取肾脏组织行HE和原位末端转移酶标记染色检查，评价其肾脏组织损伤程度。再灌注1、3、7d后，取小鼠肾脏组织进行免疫组织化学和免疫荧光检测，观察小鼠肾缺血再灌注损伤过程中炎症反应的情况。结果IRI组出现明显肾功能损害，其小鼠血肌酐和尿素氮水平与假手术组相比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；CORM-2组肾功能损害程度减轻，其小鼠血肌酐和尿素氮水平低于IRI组和iCORM-2组（P〈0．05）。常规病理学检查发现，IRI小鼠肾脏组织中肾小管上皮细胞发生凋亡坏死；CORM-2组肾小管上皮细胞的凋亡减轻。IRI组小鼠缺血再灌注损伤早期（再灌注1d和3d），肾脏组织中出现大量MPO阳性中心粒细胞和肿瘤坏死因子α，介导急性炎症反应。CORM-2组MPO阳性中性粒细胞浸润和肿瘤坏死因子α产生明显减少。结论CORM-2可以减轻小鼠肾缺血再灌注中的炎症反应，发挥保护作用。
- 阮永乐王璐赵越王军祥陈松明长生陈刚
- 关键词：缺血再灌注损伤一氧化碳
- 肾脏缺血再灌注损伤过程中天然免疫分子高迁移率族蛋白B1释放变化被引量：11
- 2010年
- 目的 观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在小鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）中的表达变化.方法 建立小鼠IRI模型,再灌注0、3、6 h或24 h后取外周血及左肾,测定血肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）水平,免疫组织化学及Western blot检测肾组织全蛋白和胞质蛋白HMGB1的表达,并观察病理学变化（HE）及细胞凋亡.结果与假手术组比较,再灌注0 h时小鼠血清Cr和BUN无明显升高,而再灌注3、6、24 h后呈阶梯性显著性升高.假手术组肾组织HMGB1几乎均表达于细胞核内,而肾脏缺血损伤后HMGB1即开始在（主要是肾小管上皮细胞）胞质或胞外表达,且HMGB1在细胞核外的表达量在再灌注3 h时最强,之后缓慢减弱,而24 h内细胞总蛋白HMGB1表达量未见明显变化.再灌注0、24 h病理损伤渐进性加重,而凋亡细胞显著性增加.结论 HMGB1在肾IRI早期表达总量恒定而表达部位发生改变,且表达部位的改变先于肾功能的变化,HMGB1可能作为重要早期炎症因子在IRI启动中发挥作用.
- 李俊华钟山郭晖王璐阮永乐张炯向莹陈实陈刚
- 关键词：高迁移率族蛋白B1缺血再灌注损伤
