邓若冰
- 作品数:6 被引量:9H指数:2
- 供职机构:南京林业大学化学工程学院更多>>
- 发文基金:江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域:生物学石油与天然气工程更多>>
- 一种极耐热β-甘露糖苷酶基因及其表达蛋白与应用
- 本发明公开了一种极耐热β-甘露糖苷酶基因及其表达蛋白与应用,该极耐热甘露糖苷酶基因的DNA序列如SEQNO:1所示。极耐热甘露糖苷酶基因表达的极耐热甘露糖苷酶的氨基酸序列如SEQNO:2所示。该极耐热甘露糖苷酶具有极强的...
- 王飞时号黄颖娟李迅邓若冰
- 文献传递
- 复合脂肪酶协同催化制备生物柴油的研究被引量:2
- 2016年
- 【目的】探讨复合酶协同催化体系在含水量较高的体系中催化油脂制备生物柴油的工艺条件。【方法】通过基因工程手段在毕赤酵母中分别高效分泌表达南极假丝酵母脂肪酶(CALB)和米根霉脂肪酶(ROL),构建CALB和ROL复合酶协同催化体系制备生物柴油,利用单因素实验优化工艺条件,以甲酯化得率作为复合酶协同催化体系效能的评价标准。【结果】优化工艺条件为:CALB?ROL最佳复合酶配比为7?3,每克大豆油中加入16 U的复合脂肪酶,甲醇与大豆油摩尔比为4?1,并按0 h时2?1醇油摩尔比,12 h和24 h时以1?1醇油摩尔比分批加入甲醇,含水量为30%-60%之间,40°C反应29-34 h,甲酯得率达到93%。【结论】该复合酶协同催化体系对环境友好,与常规酶法制备生物柴油工艺相比对酶的使用量和催化时间减少幅度都在50%以上,本复合酶协同催化体系能有效降低生物柴油制备成本,具有较好的工业化应用前景。
- 李迅邓若冰段成元王亮亮王飞
- 关键词:生物柴油米根霉脂肪酶
- 南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母中的分泌型表达及酶学性质初探被引量:5
- 2014年
- 将南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA(含pAOX1启动子)和pGAPZαA(含pGAP启动子)中,转入毕赤酵母表达宿主KM71H,经三丁酸甘油酯平板活性筛选获得高效表达的酵母工程菌株.分泌型表达CLAB酵母工程菌的酶活较高,经摇瓶发酵96 h后,CLAB活力达到11.1 U/mL.经发酵罐高密度发酵84h后,CLAB活力达到179.2 U/mL,蛋白质量浓度为1.36 mg/mL.体积分数12%SDS-PAGE凝胶电泳显示重组CALB相对分子量为36 kDa.该酶最适温度为40℃,最适pH值为8.0.在pH7.5 -9.5较稳定,经55℃保温1h,残余酶活还有48.5%.5 mmol/L Mg^2+、Ni^+、Co^2+和体积分数0.10% SDS对CALB酶活影响很小,而Zn2强烈抑制酶催化反应,体积分数0.05% Triton X-100对CALB稍有激活作用。
- 李迅邓若冰王飞
- 关键词:毕赤酵母分泌表达酶学性质
- 南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母中的诱导表达
- 南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)是一种重要的脂肪酶,具有许多优良的特性,它对非水溶性和水溶性物质都有很强的催化活性,在水解和有机合成反应中具有高度的立体选择性。毕赤酵母表达系统因能高效表达外源蛋白以及蛋白易于纯化等优点而...
- 邓若冰李迅王飞
- 关键词:基因克隆毕赤酵母
- 腾冲菌脂肪酶的表达纯化及酶学性质的表征被引量:2
- 2014年
- 将来自腾冲菌的脂肪酶(LipA)基因(lipA)克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(含T7启动子)和pTrc99A (含Trc启动子)中,转入大肠杆菌表达,发现Trc启动子更适合LipA的表达。通过热处理和DEAE-Sepharose阴离子柱纯化过程,重组LipA得到纯化,比酶活达到1.9U/mg,重组LipA分子量为42kDa。重组LipA在80℃、pH 4.5时酶活最高,经85℃保温2h,酶活保持60%以上;在pH值4.0~6.0之间,LipA具有较好的稳定性;Cu^2+和Zn^2+对酶活力分别有38.9%和69.2%的抑制作用,Mn^2+、Co^2+和Tween-20对该酶有较大的激活作用;以p-nitrophenyl-laurate (p-NP-C12)为底物时,该酶的Km值为1.5mmol/L,kcat为34.5s-1。
- 李迅仲惠王亮亮邓若冰高红王飞
- 关键词:脂肪酶酶学性质
- 一种制备生物柴油的方法及其使用的复合酶
- 本发明公开了一种制备生物柴油的方法及其使用的复合酶,该方法:在反应容器中,加入短链醇、油脂、水和复合酶,控温30-50℃,反应48-72h,制得生物柴油;其中,短链醇与油脂摩尔比为3~5:1,水的用量为油脂重量的40~1...
- 李迅邓若冰王飞李治林时号
- 文献传递