郑伟达
- 作品数：30 被引量：127H指数：6
- 供职机构：福建医科大学附属协和医院更多>>
- 发文基金：福建省科技计划项目福建省自然科学基金福建省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ERK信号通路与肝纤维化被引量：6
- 2007年
- 细胞外信号调节激酶是丝裂原激活蛋白激酶家族的重要成员。近年来发现其与肝纤维化的关系密切,可从多方面影响肝纤维化的形成。通过干预细胞外信号调节激酶通路,研究肝纤维化的发病机制和药物治疗是有希望的途径。
- 陈达凡李建英郑伟达王小众
- 关键词：细胞外信号调节激酶肝纤维化肝星状细胞
- 白介素-10基因修饰抑制了肝细胞对大鼠肝星状细胞的活化作用
- 目的 肝星状细胞的活化在肝纤维化的进程中扮演关键角色.白介素-10是重要的抗肝纤维化因子,但其半衰期短,作用广泛,基因治疗可能是其发展方向.本研究以肝细胞作为IL-10基因的表达细胞,观察其对体外原代培养的肝星状细胞的作...
- 陈运新黄月红郑伟达陈治新张莉娟王小众
- 关键词：白细胞介素-10肝星状细胞肝细胞
- 分离肝星形细胞的简便方法被引量：15
- 2004年
- 目的 建立一种简便而可靠的肝星形细胞 (HSC)的分离方法。 方法 雄性 SD大鼠 ,常规门脉穿刺插管 ,蠕动泵灌注不含钙 D- Hanks液后游离肝脏 ,先后用含链霉蛋白酶 E、 型胶原酶消化液 37℃体外灌注消化和振荡消化 ,细胞悬液过滤后 ,经 1 1 % Nycodenz密度梯度离心 (2 730 r/ min× 1 5 m in)分离 HSC,锥虫蓝染色排斥法鉴定细胞活率 ,以 1× 1 0 6 m L- 1 密度混悬后接种在培养瓶。结蛋白免疫细胞化学染色鉴定 HSC纯度。 结果 成功分离 HSC,细胞得率 (1 .2～ 2 .3)× 1 0 6 g- 1 肝组织 ,活率 >90 % ,纯度 >90 % ,可用于实验研究。 结论 链霉蛋白酶E和 型胶原酶体外灌注消化及 1 1 % Nycodenz密度梯度离心是分离大鼠 HSC简便。
- 郑伟达王小众张莉娟史美娜
- 关键词：星形细胞细胞分离细胞
- 大鼠肝纤维化过程星形细胞MMP-2的表达及白细胞介素10的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的意义及外源性白细胞介素 10 (IL 10 )抗肝纤维化作用的机制。 方法 6 0只SD雄性大鼠随机分为生理盐水对照组 (N组 ) 8只、四氯化碳(CCl4)组 2 8只和IL 10干预组 2 4只 ,建立正常对照、CCl4诱导肝纤维化模型及IL 10干预模型。造模第 7周和第11周 ,采用链霉蛋白酶E、Ⅳ型胶原酶经门静脉体外灌流消化 ,11%Nycodenz密度梯度离心分离肝星形细胞(HSC)。半定量RT PCR法检测各组HSC的MMP 2mRNA表达水平 ;免疫细胞化学法检测培养 72h时HSC的MMP 2蛋白表达情况。 结果 各组均检出MMP 2的mRNA表达 ;造模第 7周 ,CCl4组与IL 10组的MMP 2mRNA表达均高于N组 (P <0 0 1) ,IL 10组低于CCl4组 (P <0 0 1) ;造模第 11周 ,CCl4组与IL 10组的表达水平较第 7周均有下降 (P <0 0 1) ,IL 10组低于CCl4组 (P <0 0 1)。SP免疫细胞化学法检测各组MMP 2的蛋白表达情况与mRNA一致。 结论 MMP 2在实验性大鼠肝纤维化早期表达升高 ,后期下降是肝纤维化发生发展的重要机制之一 ;外源性IL 10可能通过抑制早期MMP 2的表达发挥抗肝纤维化作用。
- 郑伟达王小众张莉娟史美娜陈治新陈运新黄月红
- 关键词：星形细胞金属蛋白酶类
- 转化生长因子β_1在白细胞介素10干预肝纤维化大鼠肝星形细胞的表达被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨转化生长因子 β1(TGF β1)在白细胞介素 10 (IL 10 )干预肝纤维化大鼠星形细胞中的表达 ,阐明外源性IL 10的抗纤维化作用及可能机制。 方法 6 0只雄性SD大鼠随机分为正常对照组 (N组 ,8只 )、肝纤维化模型组 (C组 ,2 8只 )和IL 10干预组 (I组 ,2 4只 ) ,分别于CCl4造模第 7周及 11周采用链霉蛋白酶E、Ⅳ型胶原酶经门静脉灌注分离肝星形细胞。半定量RT PCR法检测各组新分离肝星形细胞中TGF β1mRNA的表达水平 ;SP免疫细胞化学法检测各组原代培养 72h后肝星形细胞TGF β1蛋白的表达水平。并于上述两个时间段分别将各组肝组织行苏木精 伊红染色判断炎症和肝纤维化程度。 结果 成功建立大鼠肝纤维化模型及IL 10干预模型 ,并对大鼠肝星形细胞进行分离及原代培养。与正常组相比 ,纤维化模型组TGF β1的mRNA水平显著升高(P <0 0 1) ,经IL 10干预后则明显降低 (P <0 0 1)。纤维化模型组星形细胞TGF β1mRNA水平在第 11周时低于第 7周 (P <0 0 5 )。SP免疫细胞化学法检测各组TGF β1的蛋白表达情况与mRNA结果相平行。 结论 IL 10可抑制肝纤维化大鼠星形细胞中TGF β1表达 ,具有抗纤维化作用。
- 史美娜郑伟达张丽娟陈治新王小众
- 关键词：星形细胞白细胞介素10转化生长因子Β1
- 肝纤维化大鼠肝星状细胞白细胞介素10及其受体的表达
- 目的细胞因子在肝纤维化和肝硬化的发病的作用研究日益引人注目。在细胞因子中,诸如 TGF- β和 TNF-α等的作用已较肯定,而近年来 IL-10基因敲除小鼠模型的成功建立,加深了人们对内源性 IL-10特性的认识,对 I...
- 张莉娟郑伟达王小众
- 文献传递
- TIMP-1表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的作用被引量：7
- 2004年
- 目的 探讨TIMP 1表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的意义及外源性IL 10抗肝纤维化作用的可能机制。方法 60只SD雄性大鼠随机分为生理盐水对照组 (N组 ,8只 )、CCl4组 (C组 ,2 8只 )和IL 10干预组 (Ⅰ组 ,2 4只 ) ,建立下常对照、CCl4诱导肝纤维化模型及IL 10干预模型。造模第 7周和第 11周 ,采用链霉蛋白酶E、Ⅳ型胶原酶经门静脉原位灌流消化 ,11%Nycodenz密度梯度离心分离肝星状细胞 (HSC)。半定量RT PCR法检测各组HSC的TIMP 1mRNA表达水平 ;免疫细胞化学法检测培养贴壁后HSC的TIMP 1蛋白表达情况。结果 各组均检出TIMP 1的mRNA表达 ;造模第 7周 ,C组与I组的TIMP 1mRNA表达均高于N组 (P <0 .0 1) ,I组低于C组 (P <0 .0 1) ;造模第 11周 ,I组明显低于C组 (P <0 .0 1) ,C组TIMP 1的表达水平较第 7周进一步增加 (P <0 .0 1) ,而I组有所下降 (P <0 .0 5 )。免疫细胞化学法检测各组TIMP 1的蛋白表达变化与mRNA表达变化一致。结论 TIMP 1随着大鼠肝纤维化进展表达逐渐升高 ,IL 10通过抑制TIMP 1的表达 。
- 郑伟达王小众张莉娟史美娜陈治新陈运新黄月红
- 关键词：鼠肝实验性大鼠发病密度梯度离心CCL4
- 肝脏靶向表达大鼠白介素-10基因对猪血清诱导的大鼠肝纤维化的抑制被引量：6
- 2011年
- 目的探讨肝脏靶向表达rIL-10基因对猪血清诱导的大鼠肝纤维化的抑制作用。方法 rIL-10基因通过尾静脉快速大容量注射法转移至大鼠体内,RT-PCR法检测大鼠肝、肾、脾和肺组织rIL-10 mRNA的表达及S-P免疫组化法检测rIL-10蛋白在肝脏中表达。30只体质量100～120 g清洁级雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(n=6)、纤维化模型对照组(n=8)、rIL-10基因干预组(n=8)和空质粒对照组(n=8)。正常对照组与其余3组大鼠腹腔分别注射生理盐水和猪血清,0.5 ml/只,每周2次。第5周开始造模同时,rIL-10基因干预组和空质粒对照组大鼠分别从尾静脉注射pcDNA3-rIL-10和pcDNA3空质粒,每周1次。第8周末处死全部大鼠收集组织和血清备用。HE、天狼星红染色分别检测各组肝组织病理形态学和Ⅰ、Ⅲ胶原的改变,生化检测血清ALT和AST含量。结果 RT-PCR和免疫组化证实rIL-10基因经尾静脉快速大容量注射转染到大鼠体内后主要在肝组织中转录及表达;纤维化模型和空质粒对照组:HE染色显示大鼠肝细胞脂肪变性,炎性细胞浸润,大量胶原沉积形成粗细不等的纤维隔,部分假小叶形成;天狼星红染色显示肝组织中大量Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维沉积;血清中ALT和AST表达水平较正常对照组明显升高(P<0.01)。与对照组比较,rIL-10基因干预组大鼠HE染色显示肝细胞变性坏死程度减轻、炎细胞的浸润减少,胶原沉积明显减少,天狼星红染色显示Ⅰ、Ⅲ型胶沉积面积显著下降(P<0.01),血清中ALT和AST表达水平显著降低(P<0.01)。结论 尾静脉快速大容量注射法可使rIL-10基因在肝组织靶向表达,靶向表达的rIL-10有效抑制猪血清诱导的大鼠肝纤维化形成。
- 黄月红陈运新郑伟达张莉娟陈治新王小众
- 关键词：尾静脉注射基因干预肝纤维化
- IL-10对TGF-β/_1刺激的大鼠肝星状细胞活化和Smad通路的影响
- 目的:观察外源性白细胞介素-10/(IL-10/)对转化生长因子β1/(TGF-β1/)刺激的大鼠原代肝星状细胞/(HSC/)活化状态及其信号转导通路的影响,探讨外源性IL-10抗肝纤维化作用的可能机制。
方法:...
- 郑伟达
- 关键词：肝星状细胞白细胞介素-10
- 文献传递
- 白细胞介素-10对实验性肝纤维化大鼠Bax/Bcl-2表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的探讨白细胞介素-10(IL-10)对实验性肝纤维化大鼠Bax/Bcl-2表达的影响及外源性IL-10对肝纤维化的治疗及可能机制。方法47只SD大鼠随机分为生理盐水对照组(N组,6只)和CCl4组(Z组,41只)。至造模第9周,Z组随机分为模型组(M组,9只),自然恢复组(R组,9只)和IL-10治疗组(T组,9只);于12周末处死各组动物。免疫组织化学法和RT-PCR法检测各组大鼠肝脏Bax/Bcl-2的表达。结果成功建立肝纤维化模型。T组肝细胞变性及坏死程度较M组减轻;R组肝脏炎症活动度较M组有所缓解,但肝纤维化程度未见明显改善。免疫组织化学提示,Bax主要表达在肝细胞质内,Bcl-2主要表达在汇管区及纤维间隔区。组织蛋白及mRNA表达检测均显示,M组Bax较N组增高(P<0.01),Bcl-2表达亦显著增高;R组Bax表达较M组降低(P<0.01),但Bcl-2表达则较M组显著升高;T组Bax/Bcl-2均较R组显著降低。结论肝纤维化过程肝脏Bax/Bcl-2表达增强;外源性IL-10可以减轻CCl4诱导的肝脏纤维化,IL-10抗纤维化作用可能是通过减少肝细胞表达Bax、抑制肌成纤维细胞样细胞表达Bcl-2实现的。
- 林羡屏陈治新郑伟达陈运新张丽娟王小众
- 关键词：白细胞介素-10肝星状细胞Α-平滑肌动蛋白BAX
