杜威威
- 作品数：6 被引量：9H指数：3
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鸡传染性支气管炎病毒HH06株膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能研究被引量：4
- 2014年
- 文章通过RT-PCR方法扩增传染性支气管炎病毒(IBV)HH06株M全长基因,经抗原性和亲水性分析,将M部分序列成功亚克隆于pET-30a(+)和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET30a-M转化E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞,诱导表达获得20 ku重组M蛋白。Western blot检测表明,重组蛋白能够与IBV参考阳性血清反应。以纯化重组M蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,其ELISA效价达到1:218;Western blot结果证实,其具有良好的反应性和特异性。间接免疫荧光试验表明,抗M蛋白多克隆抗体可检测到PVAX-M1转染BHK-21细胞表达的M蛋白,与IBV HH06毒株具有很好的特异性反应。病毒感染抑制试验表明,多抗血清对IBV Beaudette株的抑制率可达到25.9%。为IBV检测及M蛋白功能的研究奠定基础。
- 李广兴杜威威韩溪潘龙王新白妍洪琴马玲任晓峰杨贵君
- 关键词：膜蛋白多克隆抗体间接免疫荧光试验免疫印迹试验
- IBV HH06株N基因原核表达及间接ELISA方法的建立被引量：3
- 2014年
- 鸡传染性支气管炎(Avian infectious bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病。试验根据NCBI发表的IBV基因序列设计引物,利用RT-PCR方法扩增病毒的N基因,并将其导入pET-30a(+)载体中,构建原核表达质粒。SDS-PAGE及Western-blot检测结果表明,重组蛋白得到表达并能与IBV阳性血清有很好的反应性。以纯化后的重组蛋白作为包被抗原,在包被量为2.5μg·mL-1、血清1??40倍稀释条件下,建立并优化间接ELISA检测方法。临床样品检测表明,该方法可高效检测出IBV抗体,并与IBV病毒作为包被抗原ELISA检测结果一致,为IB的快速诊断及流行病学研究奠定基础。
- 李广兴王新潘龙杜威威黄小丹孙刚杨贵君任晓峰
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒N基因原核表达间接ELISA
- 鸡传染性支气管炎病毒HH06株全基因序列测定分析
- <正>鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种高度接触性、急性呼吸道传染病。目前该病在全世界...
- 白妍杜威威赵蕾黄小丹杨贵君李广兴
- 文献传递
- 鸡传染性支气管炎病毒HH06株全基因序列测定分析
- 鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitisvirus,IBV)引起的一种高度接触性、急性呼吸道传染病.目前该病在全世界传播流行...
- 白妍杜威威赵蕾黄小丹杨贵君李广兴
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒全基因序列生物信息学
- 文献传递
- 鸡传染性支气管炎病毒HH06株囊膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能检测被引量：3
- 2016年
- 采用RT-PCR方法扩增鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV）HH06株E基因全长,经抗原性和亲水性分析,将E基因部分序列（193~327bp）亚克隆于pET-32a（＋）和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET-32a-E1转化E.coli Rosetta（DE3）感受态细胞,诱导表达获得大小约为23ku的重组截短E1蛋白,Western blotting检测重组蛋白与IBV全病毒多克隆抗体能特异性反应。以纯化后的E1蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,ELISA检测抗体效价达到220;Western blotting分析表明,E1多克隆抗体与重组表达蛋白具有良好的反应性;间接免疫荧光试验显示,多克隆抗体可检测到PVAX-E1转染Hela细胞表达的E1蛋白和感染鸡胚肾细胞（CEK）中的HH06株IBV,抗E蛋白多克隆抗体的制备为E蛋白功能的深入研究奠定了基础。
- 白妍赵蕾杜威威潘龙黄小丹杨贵君李广兴
- 关键词：囊膜蛋白多克隆抗体免疫印迹试验间接免疫荧光试验
- 鸡传染性支气管炎病毒HH06株全基因序列测定分析及M蛋白多克隆抗体制备
- 鸡传染性支气管炎（Infectious bronchitis, IB）是由鸡传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus, IBV）引起的一种高度接触性、急性呼吸道传染病。目前该病在全世界传...
- 杜威威
- 关键词：传染性支气管炎病毒膜蛋白
- 文献传递
