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猪流行性腹泻病毒流行毒株S基因截短表达与抗原性分析被引量：2: 2015年; 临床分离获得1株猪流行性腹泻病毒(PEDV),对其纤突(S)基因5'端序列分析比较表明,该分离株(NB2011)与目前国内流行的猪流行性腹泻病毒毒株同源性为99%以上,与经典毒株(CV777)的同源性仅为82.6%。经氨基酸分析比较,PEDV纤突蛋白发生明显变异,在抗原位点35-55aa以及100-145aa区间存在很大差异。本试验对CV777株与临床分离的NB2011株的S基因N端差异较大的区段(CV777-S661,NB-S673)进行原核表达,分别获得经典株和流行株S基因N端表达蛋白。Western blotting结果表明,S661和S673重组蛋白均能与PEDV阳性血清产生特异性反应,且不与PEDV阴性血清反应。对两种蛋白进行交叉斑点试验,结果表明两者在反应原性上存在差异。研究结果为进一步阐明PEDV流行毒株抗原表位的变异及研究PEDV免疫保护机制打下基础。; 闵智宇王一成姜平袁秀芳徐丽华李军星康磊; 关键词：猪流行性腹泻病毒 S蛋白抗原性

副猪嗜血杆菌四环素耐药基因TetB的PCR检测方法建立被引量：1: 2014年; 在本实验室前期研究的基础上,选取与四环素耐药表型相关性较好的Tet B基因,建立PCR方法,以探索副猪嗜血杆菌耐药性的快速检测方法。本研究利用四环素主要耐药基因Tet B的引物,对PCR反应条件进行优化,以副猪嗜血杆菌基因组DNA为模板,未出现非特异性扩增条带,PCR扩增条带单一。将Tet B基因克隆至p MD 19T载体,以重组质粒为标准品,确定了最低检测拷贝数,经测定,最低检测拷贝数为1.54×103。以不同稀释度的21A7菌株基因组DNA为模板,确定了最低细菌检出量,经测定,最低检测细菌数量为4.6×103个。该方法为建立临床快速检测副猪嗜血杆菌耐药性奠定了基础。; 江军李军星康磊袁秀芳徐丽华王一成; 关键词：副猪嗜血杆菌 PCR检测

副猪嗜血杆菌Wza基因缺失株的构建及生物学特性研究: 引言副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPs)在我国已成为最流行的继发感染细菌和引起仔猪保育期死亡的主要原因之一.随着华中农业大学对HPs全基因组测序工作的完成[1],荚膜合成基因亦被鉴定出来,其中...; 康磊李军星王一成袁秀芳徐丽华江军

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康磊