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耻垢分枝杆菌调节蛋白TrpD的原核表达及纯化: 2015年; 目的克隆编码耻垢分枝杆菌调节蛋白TrpD的基因并在大肠杆菌中进行蛋白表达及纯化。方法利用PCR技术从耻垢分枝杆菌中扩增TrpD基因,构建重组表达质粒pET-32a(+)-TrpD;以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性重组菌株,IPTG诱导目的蛋白表达,在变性条件下对目的蛋白进行镍离子亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Westem blot鉴定目的蛋白的表达及反应原性。结果扩增了TrpD基因,克隆于表达载体pET-32a(+)中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确。经诱导在大肠杆菌中表达出相对分子质量(Mr)为56000的目的蛋白。结论已成功构建TrpD基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高效蛋白表达及纯化,为进一步研究TrpD蛋白在结核病中的致病机制提供了依据。; 刘艳伊正君付玉荣刘丹毕艳; 关键词：耻垢分枝杆菌原核表达多克隆抗体

T-SPOT.TB技术在潜伏结核感染者免疫抑制剂治疗中的临床应用被引量：3: 2015年; 目的探讨T-SPOT.TB技术在潜伏结核感染(LTBI)者免疫抑制剂治疗中的筛查效果,为预防和控制LTBI提供新的依据。方法应用T-SPOT.TB试剂盒对162例需要应用免疫抑制的患者进行结核分枝杆菌特异性T细胞的检测;同时对所有病例做结核菌素皮肤试验(TST);对其中28例T-SPOT.TB技术筛查阳性患者应用抗TNF-α生物制剂治疗前均给予预防性抗结核药物治疗4个月并随访1年。结果 T-SPOT.TB阳性率为36.4%,确诊率为94.9%;TST阳性率为28.4%,确诊率为69.6%。T-SPOT.TB阳性率和确诊率与TST相比,差异有统计学意义(P<0.05);通过对28例T-SPOT.TB技术筛查阳性,给予预防性抗结核药物治疗4个月的患者1年的随访,结果无一例结核病发生。结论 T-SPOT.TB技术在检测LTBI敏感性强、特异性高,是快速诊断结核感染的有效手段;在应用免疫抑制剂对LTBI的筛查诊断中具有重要临床价值。; 毕艳伊正君付玉荣; 关键词：结核病毒潜伏期 T-SPOT.TB 结核菌素皮肤试验免疫抑制剂

TLR4在结核感染中的作用研究进展: TLR4的基因定位于9号染色体,主要分布于单核巨噬细胞,可以识别细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、细菌磷壁酸和宿主坏死细胞释放的热休克蛋白(heat-shock proteins,HSP)等.许...; 伊正君付玉荣毕艳; 关键词：结核巨噬细胞免疫应答信号通路基因多态性

TLRs在结核杆菌感染中的作用的研究进展被引量：5: 2015年; 结核病是全球范围内最严重的感染性疾病之一,其防治形势日趋严峻。Toll样受体(Toll like receptors,TLRs)是一类重要的天然模式识别受体,在机体抵御微生物的固有免疫反应中发挥重要作用。研究表明,TLRs是介导宿主对结核杆菌识别及抗结核免疫反应的关键分子。现对TLRs在结核杆菌感染中的研究进展进行综述,有助于阐明结核病的发病机制并为其治疗提供新的策略。; 毕艳伊正君付玉荣; 关键词：结核分枝杆菌 TOLL样受体免疫

TLR4在结核感染中的作用研究进展: TLR4的基因定位于9号染色体,主要分布于单核巨噬细胞,可以识别细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、细菌磷壁酸和宿主坏死细胞释放的热休克蛋白(heat-shock proteins,HSP)等。许...; 伊正君付玉荣毕艳; 关键词：结核巨噬细胞免疫应答信号通路基因多态性; 文献传递

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毕艳