廖佩
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：南华大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：湖南省医药卫生科研计划课题湖南省自然科学基金湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 携带TFPI-2基因的真核表达载体对SHI-1细胞生长的抑制作用被引量：1
- 2019年
- 目的:构建人组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)核表达载体,探讨TFPI-2基因对急性单核细胞白血病细胞株(SHI-1)生长的影响。方法:通过基因化学合成的方式得到TFPI-2的cDNA,将TFPI-2基因和线性载体片段进行连接,并插入载体PEGFP-N1多克隆位点处,再将真核表达载体PEGFP-N1-TFPI-2转染SHI-1细胞,在荧光显微镜下观察TFPI-2转染SHI-1细胞的情况;应用MTT法检测TFPI-2基因不同时间段对SHI-1细胞相对生长率的影响;RT-PCR检测TFPI-2转染前后每组细胞中TFPI-2 mRNA表达水平;采用Western blot法检测TFPI-2蛋白表达。将成功转染PEGFP-N1-TFPI-2载体的细胞命名为SHI-1-TFPI-2(实验组),转染空载体pEGFP-N1的细胞和未转染细胞设为对照组,分别命名为SHI-1-V和SHI-1-P。结果:成功构建了人TFPI-2基因真核表达载体PEGFP-N1-TFPI-2;将载体PEGFP-N1-TFPI-2转染SHI-1细胞,24 h后在荧光显微镜下可见荧光细胞,表明载体PEGFP-N1-TFPI-2成功转入SHI-1细胞;48和72 h后荧光细胞数目增多。RT-PCR结果显示:TFPI-2基因与内参β-actin条带灰度比值实验组高于对照组,灰度比值分别为:SHI-1-V组:0.51±0.04、SHI-1-P组:0.52±0.03、SHI-1-TFPI-2组:0.87±0.08;SHI-1-TFPI-2组与SHI-1-V和SHI-1-P组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PEGFP-N1-TFPI-2中TFPI-2基因的表达能抑制SHI-1细胞生长,此为未来白血病的基因治疗提供了研究方向。
- 李君君廖佩文锋罗泽宇曹翊雄
- 关键词：TFPI-2基因真核表达载体SHI-1细胞
- miR-328通过C/EBPα表达上调抑制K562细胞增殖被引量：3
- 2015年
- 目的:本研究旨在探讨miR-328(microRNA-328)对慢性髓系白血病(CML)急变期细胞株K562增殖的影响及C/EBPα的介导作用。方法:构建miR-328靶向基因及抑制基因的真核表达载体hsa-miR-328及hsa-miR-328-inhibitor,并分别通过脂质体lipofectamineTM2000介导转染至K562细胞;通过荧光显微镜观察细胞转染情况;通过实时荧光定量RT-PCR检测miR-328、C/EBP mRNA的表达水平;Western-Blot方法测定C/EBPα蛋白的表达;CCK-8检测细胞增殖的情况。结果:本研究通过成功构建重组真核表达载体hsa-miR-328、hsa-miR-328-inhibitor;将载体转染K562细胞,24 h后在荧光显微镜下可见荧光细胞,表明载体成功转入K562细胞,48 h和72 h后可见荧光细胞数逐渐增多。实时荧光定量RT-PCR证实miR-328在K562细胞中成功表达,而miR-328对细胞C/EBPαmRNA表达无明显影响;通过Western blot检测发现miR-328恢复C/EBPα蛋白表达;细胞活力检测提示miR-328抑制K562细胞的增殖。结论:成功构建并转染miR-328基因至K562细胞,miR-328通过恢复C/EBPα的表达抑制K562细胞的增殖。
- 曹锦霞文锋王浩廖佩李君君
- 关键词：C/EBPΑK562细胞细胞增殖
- miR-328在恶性肿瘤中的研究进展被引量：1
- 2014年
- MicroRNAs（miRNAs）是一类广泛存在于真核细胞中的非蛋白编码的小分子RNA[1]，平均由22个核苷酸组成，不但具有转录后基因调控的功能，而且在人血清中具有极强的稳定性，参与调节细胞增殖、凋亡以及分化等多种生物学过程。目前发现的 hs-miRNAs有一千多种，miR-328是其中的一种，本研究回顾相关文献，综述miR-328与部分肿瘤的关系。
- 廖佩李君君文锋曹锦霞
- 关键词：恶性肿瘤MICRORNASMIRNAS生物学过程真核细胞基因调控
