李治纲
- 作品数：19 被引量：62H指数：4
- 供职机构：昆明医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省教育厅科学研究基金云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 虚拟实验技术在分子生物学实验教学中的应用被引量：9
- 2013年
- 目的建立医学分子生物学虚拟实验教学平台,探索出有效的虚拟实验教学运行机制.方法将昆明医科大学2011级临床专业学生随机分为2组,虚拟实验技术教学组195人,传统实验教学组205人,采用问卷调查了解学生对教学效果的评价,并统计学分析2组期末考试成绩.结果同学对虚拟实验的教学方式接受程度较高,有助于同学对实验实际操作及理论知识的理解和掌握.2组期末考试成绩无统计学差异(P>0.05).结论虚拟实验技术作为一种新的教学手段,具备许多传统实验所不具备的优点,但其不能完全代替传统实验,在医学分子生物学实验教学中,应合理运用虚拟实验与传统实验两种教学手段.
- 杨银峰朱月春王昕童淑芬李治纲李小洁
- 关键词：分子生物学教学方法虚拟实验
- 昆明地区大学生日常消费状况调查与分析被引量：2
- 2009年
- 大学生作为一个特殊的消费群体,其消费具有自身的特点.一方面,他们具有旺盛的消费需求,另一方面,却未获得经济上的独立,其花费基本由家庭提供.
- 李振辉刘霞谢瑜廖芳李治纲
- 关键词：大学生消费结构消费教育
- G6PD通过细胞周期蛋白D1/D2调控人黑色素瘤细胞周期的进程被引量：4
- 2011年
- 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在人皮肤黑色素瘤A375细胞中处于高表达与高活性状态,但G6PD在黑色素瘤发生发展过程中的作用及其具体机制尚不明确.本文在前期运用siRNA方法构建G6PD敲减的黑色素瘤A375稳转细胞(A375-G6PDΔ)基础上,构建表达载体pBabe-puro-G6PDWT在A375-G6PDΔ细胞中过表达野生型的G6PD基因,从而构建G6PD表达恢复的稳转细胞(A375-G6PDΔ-G6PDWT).3株细胞A375-WT、A375-G6PDΔ和A375-G6PDΔ-G6PDWT经G6PD酶活性测定、MTT测定、克隆形成实验、流式细胞仪分析细胞周期和Western印迹检测.结果显示,A375-G6PDΔ-G6PDWT细胞的G6PD蛋白表达量(0.847±0.080)及其活性(0.394±0.029)分别是A375-G6PDΔ的3.28倍(P<0.01)和7.34倍(P<0.01),分别是A375-WT细胞的91.57%和2.12倍(P<0.05).与A375-WT细胞相比,A375-G6PDΔ细胞G0/G1期细胞数增加,S期细胞数减少,增殖指数PI降低了25.70%(P<0.05),细胞周期蛋白D1/D2、细胞周期蛋白E表达分别下降37.4%、54.3%(P<0.01)和17.3%;而A375-G6PDΔ-G6PDWT细胞呈现G1/S期阻滞解除,细胞周期蛋白D1/D2蛋白分别恢复到A375-WT细胞的89.5%和87.6%,细胞周期蛋白E表达未见恢复,呈现生长增殖和克隆形成率的恢复并接近于A375-WT细胞.结果提示,G6PD通过细胞周期蛋白D1/D2调控人皮肤黑色素瘤A375细胞G1期向S期转换的进程,这为黑色素瘤发病机制的研究提供了新的思路.
- 唐琼玲张春华胡滔陈龙杨银峰李治纲朱月春
- 关键词：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶黑色素瘤细胞周期细胞周期蛋白
- 蛋白激酶C介导磷脂酶C-γ1参与高温诱导热休克蛋白70表达被引量：1
- 2009年
- 目的研究蛋白激酶C(PKC)是否介导磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)参与高温诱导成纤维细胞热休克蛋白70(HSP70)表达的信号转导通路.方法以基因敲除方法建立的缺失PLC-γ1基因(plcg1-/)-及野生型PLC-γ1基因(plcg1+/)+小鼠胚胎成纤维细胞为模型,Western免疫印迹-增强化学发光法检测高温诱导时PLC-γ1的磷酸化激活,PKC激酶检测试剂盒测定PKC激活程度,并以酶联免疫吸附(ELISA)法及MTT法测定PKC抑制剂白屈莱红碱(chelerthrine chloride,CH)和激活剂佛波醇-12-豆蔻酰-13乙酸(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)对HSP70表达及细胞热耐力的影响.结果plcg1+/+细胞经高温处理,PLC-γ1出现磷酸化激活、PKC活性显著增强(P<0.01);plcg1-/-细胞PKC活性也有所增强,但明显低于plcg1+/+细胞(P<0.01).PKC抑制剂或激活剂能增强或降低两种细胞热耐力,对高温引起的两种细胞HSP70合成都有明显抑制或促进作用.结论蛋白激酶C可介导磷脂酶C-γ1参与高温诱导成纤维细胞热休克蛋白70表达的信号传递.
- 李治纲桂莉郭家智李树德孙俊陆地
- 关键词：磷脂酶C-Γ1热休克蛋白70蛋白激酶C
- 同型半胱氨酸通过促进脂肪组织TRB3表达抑制PI3K/Akt信号通路被引量：4
- 2017年
- 目的建立高同型半胱氨酸血症的动物模型,检测脂肪组织TRB3的表达,探讨TRB3对PI3K/Akt信号通路的影响.方法 20只昆明小鼠分为正常对照组和高同型半胱氨酸血症组,每组10只.饮用含1.5%蛋氨酸3个月建立高同型半胱氨酸血症组模型.2组麻醉处死后取脂肪组织,逆转录PCR检测TRB3、Akt和GLUT4的m RNA表达水平,Western blot检测TRB3、Akt、p-Akt(473)和GLUT4的蛋白质表达水平.结果高同型半胱氨酸血症组的TRB3的m RNA表达较正常对照组增加(P<0.05),Akt和GLUT4的m RNA表达较正常对照组降低,但差异无统计学意义(P>0.05);高同型半胱氨酸血症组的TRB3的蛋白质表达较正常对照组增加(P<0.05),p-Akt(473)蛋白质的表达降低,Akt和GLUT4的蛋白质表达差异无统计学意义(P>0.05).结论同型半胱氨酸可能通过增加脂肪组织TRB3的表达,降低p-Akt(473)和GLUT4蛋白质含量,抑制PI3K/Akt信号通路,影响脂肪组织对葡萄糖的摄取和利用.
- 王雅楠李治纲张超李树德李涛彭建志
- 关键词：高同型半胱氨酸血症TRB3PI3K/AKT信号通路GLUT4脂肪组织
- 肺动脉高压大鼠心肌骨桥蛋白及其整合素β3受体表达的变化被引量：2
- 2014年
- 目的探讨肺动脉高压大鼠右心室心肌骨桥蛋白(OPN)及其整合素β3受体基因表达变化其与右心室重塑的关系。方法选取60只SD大鼠随机等分为1个对照组和4个肺动脉高压实验组(PAH组),每组12只,分别于注射MCT后第1,2,3,4周获取组织。测定平均肺动脉压(mPAP)和右心室肥厚指数;采用免疫组化、Western印迹和RT-PCR法测定不同时间点各组大鼠右心室心肌骨桥蛋白(OPN)及其整合素β3受体mRNA的表达水平。结果对照组大鼠右心室心肌OPN及其整合素β3受体mRNA表达水平低于肺动脉高压各组(PHA1-4组)(P<0.O5);肺高压各组左、右心室心肌OPN和整合素β3受体蛋白表达水平高于对照组,且随着产生的时间而逐渐增高(P<0.05);右心室心肌OPN mRNA及整合素β3 mRNA表达水平均与右心室肥厚指数呈正相关(P<0.05)。结论右心室心肌OPN及其受体整合素β3基因表达随着大鼠肺动脉高压及右室肥大形成逐渐增加,可能在右心室心肌重塑中起重要的作用。
- 王俊东杨达宽李治纲李树德
- 关键词：肺动脉高压骨桥蛋白整合素Β3逆转录-聚合酶链反应
- PBL结合摄像反馈在留学生分子生物学实验教学中的应用被引量：5
- 2017年
- 目的探索PBL结合摄像反馈法在留学生分子生物学实验教学中的应用.方法以2013~2014级5年制医学留学生为研究对象,采取PBL结合摄像法为实验组,传统实验教学法为对照组,比较2组测试成绩、英文口语表达能力、主动学习能力等的差异.结果实验平时成绩、实验理论测试成绩、实验操作测试成绩实验组均高于对照组(P=0.001).期末理论测试成绩实验组也高于对照组(P=0.01);英文口语表达能力、主动学习能力等实验组均高于对照组(P=0.001).结论 PBL结合摄像反馈教学法在留学生分子生物学实验教学中取得了显著的教学效果.
- 李思熳李树德武静李治纲朱月春
- 关键词：留学生分子生物学实验问题式教学法摄像教学方法
- G6PD缺陷型A375稳转细胞株及其构建方法
- 本发明涉及到医学分子生物学技术，尤其是采用siRNA干扰技术构建研究细胞模型。本发明所述的G6PD缺陷型A375稳转细胞株是将A375细胞株经siRNA－慢病毒表达系统靶向沉默了内源性G6PD的表达量80％以上，并含有D...
- 朱月春李丹怡吕会茹杨银峰童淑芬李治纲
- 文献传递
- 中国西南阿昌族G6PD缺陷的特征及新单体型487G>A/IVS5-612(G>C)的鉴定被引量：4
- 2007年
- 探讨中国西南部疟疾高发区云南省梁河县阿昌族人群的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺陷的发生率及其分子特征. 四氮唑蓝纸片法和G6PD/6PGD活性测定筛查490阿昌族个体 （男260人, 女230人）, 发现男性G6PD缺陷的发生率为7.31% （19/260）; 女性为4.35 （10/230）. PCR-DHPLC-Sequencing 或PCR-Direct Sequencing分析19个阿昌族无关个体G6PD基因外显子2～13, G6PD Mahidol （487G＞A）的突变率为84.2% （16/19）; 所有G6PD Mahido均与新的多态性IVS5-612 （G＞C）连锁. G6PD 487G＞A/IVS5-612 （G＞C） 构成新的单体型成为这一阿昌族群体G6PD缺陷的分子特征之一, 已提交GenBank （登录号： EF190463）. 阿昌族G6PD Mahidol 的高发与缅甸人群G6PD Mahidol 突变率 （91.3%, 73/80） 极为相似, 这一结果提示阿昌族与缅甸人群之间有着广泛的基因交流 （gene flows）. 而中国其他少数民族最常见的突变G6PD Canton （1376G＞T） 和G6PD Kaiping （1388G＞A） 在这一阿昌族人群中没有找到, 提示阿昌族与其他少数民族的G6PD基因突变热点不同. 本研究数据是有关阿昌族G6PD遗传学的首次报道, 将为研究阿昌族起源、迁移提供线索并有助于上述地区疟疾的防治.
- 杨银峰朱月春李丹怡李治纲吕会茹吴静唐璟童淑芬
- 关键词：阿昌族G6PD基因突变
- 云南阿昌族G6PD基因突变G487A在DF213中的表达被引量：5
- 2007年
- 为获得阿昌族G6PDWT和G6PDG487A重组蛋白,研究G6PDG487A的结构和功能改变,从云南省德宏州梁河县杞木寨乡湾中村阿昌族聚集地的G6PD缺陷家系先证者和正常阿昌族个体全血提取RNA,经RT-巢式PCR得cDNA,将cDNA克隆至pMD18-Tsimple载体中并测序;错配碱基经定点突变修复后,目的基因亚克隆至pThioHis(A)载体,构建了阿昌族G6PD基因野生型和G487A突变型原核表达载体:pThioHis(A)-AChang-G6PDWT和pThioHis(A)-AChang-G6PDG487A。用重组质粒转化E.coli Competent Cells DF213(G6PD defeciency),经IPTG诱导G6PD表达、10%SDS-PAGE电泳检测表达蛋白和紫外340nm定量测定G6PD活性的分析表明,pThioHis(A)-AChang-G6PDWT和pThioHis(A)-AChang-G6PDG487A在DF213中成功表达,分子量约为59kDa。IPTG诱导0、3、6、9、和12h后,G6PD活性逐渐增高,G6PD基因WT表达的酶活性约是G487A的20-25倍。表达载体的构建以及G6PDcDNA在DF213中成功表达,为重组酶G6PDG487A的进一步研究奠定了基础。
- 杨银峰朱月春李鸿钧李治纲吕会茹李丹怡崔映波冯维杨余果宇黄尤光
- 关键词：阿昌族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因
