刘音
- 作品数：52 被引量：192H指数：6
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 6A8 α-甘露糖苷酶基因的mRNA表达与染色体定位被引量：4
- 2001年
- 目的 对 6A8α 甘露糖苷酶基因作染色体定位 ,比较 6A8α 甘露糖苷酶mRNA在人多种免疫细胞株的表达。方法 用Fish原位杂交作染色体定位 ,用RT PCR检测mRNA表达。结果 6A8α 甘露糖苷酶基因定位于人第 13号染色体长臂的 31～ 32区。 6A8α 甘露糖苷酶mRNA在B细胞株SKW 6高表达 ,在B细胞株 3D5、BJAB、CESS、Daudi、Nalm 6中度表达 ,在B细胞株Navalm ,T细胞株GM、Jurkat,组织细胞瘤细胞株U937弱表达 ,在T细胞株Peer,慢性髓性白血病细胞株K5 6 2极弱表达。结论 6A8α 甘露糖苷酶基因定位于人第 13号染色体长臂的 31～ 32区 ,其mRNA表达水平在各种人免疫细胞株不同。
- 刘音史耕先王壮志曾瑄马凤蓉李波赵方萄朱立平
- 关键词：染色体定位MRNA表达
- 分化抗原gp42在人免疫细胞的表达被引量：1
- 2003年
- 目的 明确gp4 2蛋白为分化抗原 ,检测它在人免疫细胞的表达。方法 用gp4 2蛋白免疫小鼠 ,制备抗gp4 2蛋白的单抗。用反义技术制备gp4 2蛋白表达抑制的 3D5细胞。用免疫荧光染色和Western印迹确定gp4 2单抗的特异性。用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定gp4 2蛋白为分化抗原。用双色免疫荧光染色流式细胞术检测gp4 2分化抗原在多种人免疫细胞的表达。结果 制备了抗gp4 2蛋白的特异性单抗。用gp4 2单抗作探针 ,从 3D5细胞膜免疫沉淀到相对分子质量 (Mr)为4 2 0 0 0的一条蛋白带 ,并在活 3D5细胞见阳性免疫荧光染色。gp4 2分化抗原在人外周围血CD19+ 、CD14 + 、CD4 + 、CD8+ 和CD5 6 + 细胞的表达率分别为 5 9.71%± 11.36 %、89.0 8%± 4 .87%、2 6 .0 3%±9.75 %、2 4 .2 4 %± 15 .2 9%和 2 4 .2 0 %± 15 .72 % ,在人免疫细胞株的表达率分别为 5 8.0 % (Nalm6 )、72 .7% (3D5 )、5 3.6 % (BJAB)、6 1.0 % (Daudi)、6 .9% (SKW6 )、6 .3% (Jurkat)、5 .8% (Peer)、2 1.3% (K5 6 2 )和 39.1% (U937)。结论 gp4 2蛋白为一个分化抗原 ,在人外周围血CD14 + 细胞的表达率最高 ,其次为CD19+ 细胞 ,CD4 + 、CD8+ 和CD5 6 + 细胞的表达率较低。
- 汪燚刘音马凤蓉史耕先赵方萄朱立平
- 关键词：免疫细胞单克隆抗体免疫荧光染色法WESTERN印迹
- 马兜铃酸I诱导的LLC-PK1细胞凋亡及其意义被引量：70
- 1999年
- 目的探讨在体外条件下马兜铃酸Ｉ（ＡＡＩ）能否诱导肾小管上皮细胞发生凋亡及发生凋亡的条件。方法应用光镜、琼脂糖凝胶电泳、ＡｎｎｅｘｉｎＶＦｌｏｕｓ凋亡检测试剂盒鉴定细胞凋亡，应用流式细胞仪测定凋亡细胞比例。结果００２ｇ／Ｌ，００４ｇ／Ｌ，００８ｇ／Ｌ的ＡＡＩ作用２４小时可明显诱导ＬＬＣＰＫ１细胞凋亡，００１ｇ／Ｌ的ＡＡＩ无此作用。随ＡＡＩ浓度的增高，凋亡细胞比例增加。结论在体外条件下一定浓度的ＡＡＩ能诱导ＬＬＣＰＫ１细胞发生凋亡，其作用与浓度有关。
- 高瑞通郑法雷刘彦信郑德先李雪梅薄玉红薄玉红
- 关键词：细胞凋亡马兜铃酸肾间质纤维化
- 高和低恶性行为鼻咽癌细胞的蛋白质组学分析及CD44与细胞恶性行为的关系
- ＜正＞本实验室用反义技术抑制人鼻咽癌细胞株CNE-2L2中Man2c1基因的表达,导致细胞的恶性生物学行为减弱。鉴于肿瘤的生长转移受很多因素影响,本研究用蛋白质组学方法分析野生型CNE-2L2细胞（W）和Man2c1基因...
- 周异群时岩鞠吉雨田云刘音朱立平
- 文献传递
- ER α-甘露糖苷酶表达降低引起大鼠肝脏上皮细胞微绒毛减少变短
- 2003年
- 目的观察蛋白质糖基化改变对大鼠肝脏上皮细胞WB-F344表面微绒毛及在培养中生长的影响。方法构建含正义或反义6A8DNA的重组pAGX(+)质粒,用脂质体法将重组质粒或空载质粒转染WB-F344细胞,作G418筛选,以有限稀释法作细胞克隆,进行PCR检测新霉素抗性(neoR)基因以确定转染DNA在细胞基因组中的整合;用P-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside作底物检测细胞匀浆上清中ERα-甘露糖苷酶的活性;采用扫描电镜观察细胞表面的微绒毛,并做生长曲线检测。结果转染反义6A8的各WB-F344克隆细胞株的匀浆上清中,ERα-甘露糖苷酶活性有不同程度降低,其中以克隆AS1与AS2的降低最明显。克隆AS1与ConA结合增强,表面微绒毛减少、变短,细胞增殖减慢。结论大鼠肝脏ERα-甘露糖苷酶表达抑制所致的蛋白质糖基化改变,可导致大鼠肝脏上皮细胞WB-F344微绒毛减少、变短,细胞生长速度减慢。
- 赵方萄李瞡史耕先刘音朱立平
- 关键词：糖基化
- 利用流式细胞术检测LPS刺激活化后小鼠腹腔巨噬细胞体积的变化被引量：1
- 2014年
- 目的探讨小鼠腹腔巨噬细胞经脂多糖(LPS)刺激活化后体积的变化。方法 LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞3和24 h后,用倒置显微镜观察细胞的形态,用ELISA法检测细胞上清中IL-6的含量,用流式细胞术定量检测细胞活化后的体积。结果小鼠腹腔巨噬细胞在正常状态下呈圆型,细胞边缘光滑无伪足,胞质内无空泡。经LPS刺激3 h后,小鼠腹腔巨噬细胞的表面积变大,伸出伪足,伪足的数量和长度随时间延长而逐渐增多和增长,胞质内的空泡也逐渐增加;24 h后,细胞表面积明显增大,伪足牵拉使细胞形状呈梭型。LPS处理后细胞上清中IL-6的含量较对照组显著增加(P<0.01)。流式细胞术检测发现细胞的前向角散射光(FSC)的数值(代表细胞大小)随LPS刺激时间的延长而增加,3和24 h分别增加了11.0%(P<0.05)和20.2%(P<0.01);侧向角散射光(SSC)的数值(代表表面颗粒数)也逐渐增加,3和24 h分别增加了21.6%(P<0.05)和68.0%(P<0.01)。结论流式细胞术可以定量检测小鼠腹腔巨噬细胞经LPS活化后的体积变化,为天然免疫细胞的活化研究提供了新的检测手段。
- 刘音刘硕王文蝶朱军陈朱波姜明红
- 关键词：LPS巨噬细胞活化流式细胞术
- 胞膜(Ecto)-6A8α-甘露糖苷酶
- 2003年
- 68Aα-甘露糖苷酶是本实验室克隆的cDNA(GenBank的登记号为AF044414)编码的一个新的人α-甘露糖苷酶[1].该cDNA长3300bp,其开放阅读框架编码1062个氨基酸的蛋白质.蛋白质的1028～1048aa为穿膜区.6A8α-甘露糖苷酶属工型穿膜蛋白.6A8基因定位于第15号染色体q11～13区.
- 朱立平王壮志史耕先刘音王汛赵方萄
- 关键词：单克隆抗体糖基化
- BJAB细胞在转导6A8 α-甘露糖苷酶的反义DNA后发生oncosis样死亡被引量：5
- 2001年
- 目的 采用形态学和分子生物学方法 ,分析转导 6A8α 甘露糖苷酶的反义DNA导致的B细胞株BJAB死亡的性质。方法 用Giemsa染色、annexin Ⅴ荧光染色、梯形DNA电泳以及透射电子显微镜等方法 ,分析细胞死亡的性质 ;应用ConA结合试验 ,检测转基因细胞 6A8α 甘露糖苷酶活性的改变 ;应用Fluo 3探针测定细胞胞浆 [Ca2 +]i。结果 用重组腺相关病毒 (rAAV)颗粒成功地将反义 6A8DNA转导入了EB病毒转化的B细胞株BJAB。在克隆中 ,转导反义 6A8DNA的BJAB细胞在生长到 3～ 1 0个细胞时死亡 ,而野生型、转导空载或转导正义 6A8DNA的BJAB细胞生长良好。转导反义 6A8DNA的BJAB细胞呈聚集状生长 ,且有大量细胞肿胀 ,最终死亡。Giemsa染色光镜观察、an nexin Ⅴ荧光染色、梯形DNA电泳及透射电镜观察结果表明 ,这种死亡是一种oncosis(肿胀死 )样死亡。ConA结合试验表明 ,BJAB细胞在转导反义 6A8DNA后的结合率升高 ,而转导正义 6A8DNA后的结合率则下降。另外 ,转导反义 6A8DNA的细胞胞浆 [Ca2 +]i升高。结论 转导反义 6A8DNA引起BJAB细胞发生oncosis样死亡 ,这种死亡可能与 6A8α 甘露糖苷酶表达被抑制有关。
- 史耕先刘音赵方萄朱立平
- 6A8 cDNA编码一种α-甘露糖苷酶被引量：7
- 1999年
- 目的 探讨6A8cDNA编码的蛋白质的性质。方法 依据ConA的配体是甘露糖,而α-甘露糖苷酶的作用是修剪细胞糖蛋白聚糖中甘露糖的原理,采用细胞免疫荧光染色法以及激光共聚焦显微镜观察经转染6A8cDNA正义或反义重组表达载体后,细胞结合ConA的强弱,验证6A8cDNA编码的蛋白质是否为一种α-甘露糖苷酶。结果 COS-7细胞和人鼻咽癌细胞株CNE-2L2转染pRc/CMV-正义6A8cDNA后与ConA结合减弱,而与单抗6A8染色增强;CNE-2L2细胞转染pRc/CMV-反义6A8cDNA后,与ConA结合增强,而与单抗6A8染色减弱。结论 6A8cDNA编码的蛋白质可能为一种α-甘露糖苷酶,它可被单抗6A8识别。
- 史耕先马凤蓉朱立平张立新赵方萄刘音王讯
- 编码人分化抗原5C5全长cDNA的克隆及功能初探被引量：4
- 2000年
- 目的 编码 5C5分化抗原全长cDNA的克隆及功能探索。方法 构建人活化B细胞株3D5细胞的λgt11cDNA文库 ,以核苷酸杂交法从cDNA文库中筛选阳性克隆 ,作核苷酸序列分析 ,编码蛋白质氨基酸序列的亲疏水分析 ,Northernblot测 5C5mRNA转录本长度 ,用RT PCR检测 5C5mRNA在不同细胞株的表达 ,观察单抗 5C5 G1对 3D5细胞增殖的影响。结果 从人活化B细胞株 3D5的λgt11cDNA文库筛选到长 90 5bp的 5C5 1cDNA及 75 4bp的 5C5 2cDNA。 5C5 1cDNA序列内有 1个开放阅读框架 (19～ 5 37bp) ,编码 179个aa的蛋白质。此蛋白质内有一穿膜螺旋结构 (94～ 114aa) ,其N端在胞内。 5C5 2cDNA从 16 3到 45 9为开放阅读框架 ,编码 99个aa的蛋白质。从Northernblot见0 9kb左右和 0 7kb左右 2条杂交带。由RT PCR见 5C5mRNA在 3D5细胞强表达 ,在Daudi细胞表达次之 ,在Jurkat细胞表达最弱。单抗 5C5 G1有增强cpBCGF诱导 3D5细胞增殖的作用。结论 长90 5bp的 5C5 1cDNA为 1个全长cDNA。编码 1个膜蛋白 ,可能参与 3D5细胞的增殖反应。
- 马凤蓉阎民孟晓燕赵方萄汪燚史耕先刘音王讯朱立平
- 关键词：CDNAB细胞分化抗原
