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周泉: 作品数：16 被引量：20H指数：3; 供职机构：青岛大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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Wiskoot-Aldrich综合征蛋白家族成员3对乳腺癌细胞增殖、迁移侵袭及伪足形成的影响被引量：2: 2021年; 目的观察Wiskoot-Aldrich综合征蛋白家族成员3(WASF3)对乳腺癌细胞增殖、迁移侵袭及伪足形成的影响。方法利用免疫蛋白印迹(Western blot)法检测乳腺癌细胞(BT-549、HCC-1937、BT-474、MDA-MB-231、MCF-7、T-47D)及乳腺正常细胞(MCF-10A)中WASF3蛋白的表达量;获取WASF3互补脱氧核糖核苷酸(cDNA),构建过表达及干扰的重组载体SB-16-WASF3和pHB-U6-MCS-PGK-PURO-shWASF3(pHB-shWASF3)。重组干扰质粒经慢病毒包装,感染MDA-MB-231细胞,经抗性筛选建立WASF3基因静默的稳转细胞株。经实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot法验证WASF3的静默及过表达效率;通过克隆形成实验和迁移侵袭实验分别验证细胞克隆形成能力和迁移侵袭能力的变化;过表达载体SB-16-WASF3转染MDA-MB-231细胞,经WASF3抗体和鬼笔环肽(Phalloidin)双染色,观察WASF3过表达对细胞伪足形成的影响。采用单因素方差分析,组内进一步两两比较采用LSD-t检验,两两比较采用t检验。结果Western blot结果显示,不同乳腺癌细胞WASF3蛋白的相对表达量分别为1.07±0.00、0.54±0.11、0.60±0.14、1.36±0.02、0.65±0.05和0.79±0.18,均高于乳腺正常细胞(0.38±0.01,t=134.864、21.289、24.883、55.397、8.892、37.363,P值均<0.05),差异均有统计学意义;且MDA-MB-231和BT-549细胞的表达量相对较高。细胞增殖实验显示WASF3静默组(pHB-shWASF3-1)在24、48、72、96、120 h的增值率均低于对照组pHB-shNegetive Control组(pHB-shNC)及空白对照(Control)(0.92±0.06比1.18±0.05比1.14±0.03、1.42±0.05比1.90±0.12比1.77±0.14、2.02±0.03比2.83±0.08比2.70±0.10、2.78±0.02比3.78±0.03比3.70±0.17、3.22±0.04比4.10±0.12比4.02±0.10,t_(24 h)=7.983、t_(48 h)=9.024、t_(72 h)=23.491、t_(96 h)=66.348、t120 h=17.114;t_(24 h)=8.453、t_(48 h)=5.843、t_(72 h)=15.813、t_(96 h)=13.479、t120 h=19.142,P值均<0.01),差异均有统计学意义,但后两组间差异无统计学意义。pHB-shWASF3-1组克隆形�; 聂卫红刘相萍衣俊羽周泉刘加秀韩亚斐隋爱华王圆媛王海波; 关键词：乳腺癌迁移

黑曲霉与泡盛曲霉固态共发酵麦麸的工艺优化: 2023年; 为提高黑曲霉与泡盛曲霉固态共发酵麦麸释放酚类活性物质的能力,以培养基总酚含量为评价发酵效果的指标,应用Plackett-Burman实验设计与响应面分析法优化共发酵条件,通过光吸收法测定酚类产物的DPPH自由基清除率及总还原能力。实验结果表明,黑曲霉与泡盛曲霉固态共发酵麦麸的最佳工艺参数为:麦麸10.0 g、(NH_(4))_(2)SO_(4)含量17.0 mg/g麦麸、KH_(2)PO_(4)含量1.8 mg/g麦麸、含水量79.05%、黑曲霉与泡盛曲霉接种比例1∶2、接种量为1.1 mL(约1×10^(7)个孢子/mL)、发酵温度29℃、发酵时间6 d。此条件下,发酵产物总酚含量达到2498.34μg/g,比优化前提高了37.32%。发酵产物的DPPH自由基清除率、总还原力较优化前亦显著提高(P<0.05)。该工艺优化既提高麦麸释放酚类含量,又增强了产物的抗氧化能力,为麦麸的充分利用提供了实验依据。; 韩亚斐周泉隋爱华尤红娟姚如永; 关键词：黑曲霉泡盛曲霉响应面法

一种鉴别中药材何首乌及其混伪品的环介导等温扩增引物组及方法、试剂盒与应用: 本发明公开了一种鉴别中药材何首乌及其混伪品的环介导等温扩增引物组及方法、试剂盒与应用，本发明首次使用LAMP检测方法鉴别何首乌及其混伪品，克服了现有技术中因为何首乌与其他何首乌属的基因序列非常相似，如trnL‑trnF的...; 韩亚斐隋爱华刘相萍姚如永王姝涵周泉刘晓风刘加秀; 文献传递

N‑乙酰葡萄糖胺在制备用于诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的制剂中的用途: 本发明提供了N‑乙酰葡萄糖胺在制备用于诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的制剂中的用途，本发明从动物水平、细胞水平和分子水平的实验明确了N‑乙酰葡萄糖胺能够与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体协同作用，从而增强TRAIL对非小细胞肺癌的...; 梁晔徐文华周泉王丽萍刘世海迟静薇隋爱华王哲颖; 文献传递

一种鉴别巴戟天及其混伪品的LAMP检测引物组、试剂盒及其应用: 本发明公开了一种鉴别巴戟天及其混伪品的LAMP检测引物组、试剂盒及其应用，所述引物组包括外引物ITS2‑22‑F3，外引物ITS2‑22‑B3，内引物ITS2‑22‑FIP，内引物ITS2‑22‑BIP，使用本发明的试剂...; 隋爱华姚如永刘相萍王姝涵韩亚斐周泉刘加秀刘晓风; 文献传递

N-乙酰葡萄糖胺在制备用于诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的制剂中的用途: 本发明提供了N-乙酰葡萄糖胺在制备用于诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的制剂中的用途，本发明从动物水平、细胞水平和分子水平的实验明确了N-乙酰葡萄糖胺能够与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体协同作用，从而增强TRAIL对非小细胞肺癌的...; 梁晔徐文华周泉王丽萍刘世海迟静薇隋爱华王哲颖

Ⅹ型胶原蛋白α1对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移、血管形成的影响: 2024年; 目的探讨三阴性乳腺癌(TNBC)细胞中Ⅹ型胶原蛋白α1(COL10A1)的表达及其潜在的生物学作用及机制。方法利用Ualcan在线分析工具探索COL10A1在TNBC中的表达并在乳腺癌细胞中应用蛋白质印迹法(Western blot)验证。利用小干扰RNA(siRNA)与重组过表达质粒GV703-COL10A1转染三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和BT-549,获得COL10A1敲低实验组(Si-COL10A1)和对照组(Si-NC)、过表达实验组(OE-COL10A1)和对照组(NC)的细胞。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)法细胞活力测定、平板克隆、划痕实验、细胞迁移实验检测TNBC细胞的增殖、迁移能力;采用体外小管形成实验检测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的体外血管形成能力。两组之间比较采用独立样本t检验。结果生信分析及Western blot结果显示TNBC中COL10A1高表达,且与更差的总生存期(OS)、无复发生存期(RFS)相关。细胞克隆形成实验显示COL10A1敲降组MDA-MB-231、BT-549细胞克隆形成率[(10.47±0.91)、(11.10±1.35)%]明显低于其对照组[(16.77±2.33)%、(18.43±2.40)%,t=4.373、4.609,P<0.05);COL10A1过表达后两细胞克隆形成率[(21.50±0.62)%、(27.83±3.72)%]明显高于其对照组[(15.23±2.79)%、(19.40±1.47)%,t=3.792、3.648,P<0.05]。划痕实验结果显示COL10A1敲降组MDA-MB-231、BT-549细胞的划痕愈合率[(17.00±1.07)%、(15.38±0.89)%]明显低于其对照组[(30.58±1.88)%、(23.78±1.58)%,t=6.284、4.636,P<0.01];COL10A1过表达后两细胞划痕愈合率[(47.40±3.09)%、(41.26±4.33)%]高于其对照组[(34.48±2.03)%、(21.80±1.03)%,t=3.491、4.737,P<0.01]。在细胞迁移实验中,COL10A1敲降组MDA-MB-231、BT-549细胞进入下室的数量[(151.70±33.25)、(76.67±10.41)个]低于对照组[(378.00±26.51)、(303.70±15.50)个,t=9.219、21.060,P<0.01];COL10A1过表达后两细胞进入下室的数量[(1519.00±144.10)、(551.00±61.65)个]高于对照组[(426.30±46.07)、(288.30±27.57)个,t=12.510、6.736,P<0.01]。COL10A1过表达细胞的条件培养基培养�; 彭景刘相萍宋洪明毛艳刘加秀周泉王海波; 关键词：三阴性乳腺癌增殖迁移血管形成

一种小粒径壳聚糖纳米粒作为基因载体的研究被引量：1: 2017年; 系统比较了不同分子量的壳聚糖与TPP离子交联制备的纳米粒,用于基因转运载体,评价其对质粒和siRNA的转运效果。通过粒度仪测定壳聚糖纳米粒(CSNPs)的粒径、多分散系数以及Zeta电位;透射电镜观察CSNPs的形态;MTT法测定其细胞毒性;通过CSNPs在小鼠肌肉内的组织切片观察其生物相容性。CSNPs分别包载质粒和siRNA,凝胶电泳和分光光度法测定其包载能力,荧光显微镜、激光共聚焦或流式细胞术分析其对肿瘤细胞的转染效果;溶血实验和血凝实验分析其血液相容性。结果表明,1 mg/mL的CS(160 k Da)和TPP(质量比为10∶1)制备的CSNPs粒径约100 nm,且分布均一、稳定,透射电镜下为形态规则的类球型粒子;其细胞毒性均在0~1级,符合生物医用材料毒性标准;组织切片没有发现明显的炎症反应,生物相容性良好;CSNPs对质粒和siRNA的包载率较高,并能成功将其转运至细胞内,但小粒径的纳米粒转染质粒后荧光较弱,而携带siRNA的CSNPs转染后荧光较强,且流式细胞术结果表明其与商品化转染试剂相比转染率较高;溶血及血凝实验也发现材料具有良好的血液相容性。所以,制备的小粒径CSNPs更适合作为一种安全高效的siRNA转运载体,后续可以加以修饰应用于肿瘤的基因靶向治疗中。; 张文华张文华梁晔周泉李明钰苗玉徐文华王丽萍; 关键词：壳聚糖 TPP 纳米粒

一种鉴别中药材黄芪混伪品的环介导等温扩增引物组、试剂盒、方法及应用: 本发明公开了一种鉴别中药材黄芪混伪品的环介导等温扩增引物组、试剂盒、方法及应用，本发明结合植物DNA条形码技术，创造性的从rDNA ITS、ITS2、trnL‑trnF、matK等序列中选择了序列分歧度最小、遗传变异系数...; 周泉隋爱华刘相萍姚如永韩亚斐王姝涵刘加秀刘晓风; 文献传递

USP4通过去泛素化转化生长因子-βⅠ型受体调控乳腺癌细胞的生物学活性被引量：4: 2018年; 目的观察泛素特异性蛋白酶USP4对转化生长因子-βⅠ型受体（TGFβRI）的去泛素化调节及其对乳腺癌细胞生物学活性的调控。方法通过慢病毒感染构建过表达USP4的稳定乳腺癌细胞株BT-549。在乳腺癌细胞中表达外源性泛素，通过泛素化实验验证USP4对TGFβRI的泛素化修饰。采用克隆形成实验和划痕实验检测USP4对乳腺癌细胞克隆形成能力、迁移能力的影响。结果过表达USP4的稳定乳腺癌细胞株中USP4mRNA的表达量（△Ct=3．43±0．05）是空白对照细胞（△Ct=7．26±0．03）的14．22倍，差异有统计学意义（t=69．350，P=0，000）；USP4蛋白的表达量是空白对照细胞的4．99倍，差异有统计学意义（t=28．440，P=0．000）。过表达USP4后TGFβ3RI的体外泛素化水平明显降低。在克隆形成实验中，稳定过表达USP4、病毒对照及空白对照的BT-549细胞克隆形成率分别为（25．83±1．01）％、（11．83±0．60）％、（7．17±0．60）％，分别t=11．880、15．840，差异有统计学意义（P=0．000）。在划痕试验中，放大200倍视野下观察稳定过表达USP4、病毒对照及空白对照的BT-549细胞，每个视野可见发生迁移的细胞个数为（56．67±1．76）、（27．00±1．16）、（27．33±1．45）个，t=14．070、12．840，差异有统计学意义（P=0．000）。结论USP4可通过其去泛素化酶的活性解除TGFβRI耦联的泛素链稳定TGFβRI的表达，从而增强乳腺癌细胞的生物学活性。; 曾响李月云刘相萍迟静薇刘家秀周泉王海波; 关键词：乳腺癌泛素化

周泉

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