陈钢
- 作品数：28 被引量：50H指数：4
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：温州市科技局科研基金浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- Ephrin—Al／Fc融合蛋白对人肝癌细胞系Huh-7生物学特性的影响
- 2008年
- 目的探讨Ephrin-Al基因在肝细胞癌发生、发展以及血管生成中的作用。方法人肝癌细胞系Huh-7分别经Ephrin—Al／Fc融合蛋白和IgG／Fc作用后，MTT法绘制细胞生长曲线，细胞基质黏附实验检测对细胞黏附能力的影响，Transwell法检测细胞侵袭能力的改变。通过裸鼠移植瘤模型的建立检测Ephrin-Al／Fc融合蛋白对Huh一7细胞体内致瘤能力的影响，并计算瘤体的微血管密度（MVD），判断其对血管生成的影响。结果Huh7细胞的黏附率为（131．25±9．57）％，细胞侵袭实验显示Ephrin-Al／Fc融合蛋白作用后，穿过滤膜的细胞数，明显多于IgG／Fc组和空白对照组，其差异均有统计学意义（P〈O．05）；裸鼠成瘤实验结果显示，6周后Ephrin-Al／Fc组裸鼠体积为（186．35±16．24）mm^3，其差异均有统计学意义（P〈O．05）；而瘤体内的MVD值EphrinAl／Fc也明显高于IgG／Fc组和空白对照组，其差异均有统计学意义（P〈0．05）。Ephrin-Al／Fc融合蛋白对Huh-7细胞并无增殖促进作用（P〉O．05）。结论Ephrin—Al基因在肝细胞癌的侵袭及血管生成的过程中发挥重要的作用，因此有望成为肝细胞癌基因治疗新的靶点。
- 陈钢王怡沈文状李兴睿刘谨文金炜东易继林
- 关键词：肝细胞血管生成基因治疗
- 缺氧对HepG2细胞表达CD44v6 mRNA的影响
- 2008年
- 目的探讨缺氧环境对人肝癌细胞侵袭能力的影响。方法用Transwell小室筛选高侵袭能力的HepG2细胞株，用氯化钴（150μg／ml）对该高侵袭细胞株进行化学诱导缺氧培养，分别于培养24，48，72h后，用Western印迹法检测HIF-1α蛋白的表达，用RT—PCR方法检测CD44v6 mRNA的相对表达量，统计学分析两者的改变。结果随着缺氧培养时间的增加，HIF-1α蛋白和CD44v6 mRNA的表达量的改变具有显著性差异，并且两者呈同步改变。结论缺氧可以通过增加肝癌细胞的迁徙能力促进肿瘤的转移。
- 沈文状刘谨文易继林李兴睿陈钢刘峰
- 关键词：缺氧缺氧诱导因子-1ΑCD44V6肿瘤侵袭
- 野生型Parkin基因对肝癌细胞生长的影响
- 目的探讨野生型及突变型Parkin基因的表达对人肝癌细胞株Huh-7在体内外生长情况的影响。方法利用脂质体介导的基因转染法将野生型及突变型Parkin基因真核表达载体转染肝癌细胞株Huh-7,筛选稳定表达细胞株,通过逆转...
- 陈钢张启瑜施红旗余正平周蒙淘杨文军单云峰陶崇林金约朋
- 文献传递
- 抑制PI3K／Akt信号通路对Ephrin—A1介导的肝癌细胞运动和侵袭能力的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨PI3K／Akt信号传导通路在Ephrin—A1介导的肝癌细胞侵袭、转移过程中的作用。方法Western blot法检测Ephrin-A1／Fc融合蛋白作用人肝癌细胞系Huh-7细胞前后丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）和磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）信号分子的表达，利用LY294002特异性的阻断PI3K／Akt信号通路后，检测细胞运动能力、细胞侵袭能力的变化。结果Ephrin—A1／Fc融合蛋白作用后p-Akt磷酸化蛋白的表达与对照组比较明显上升（t=4．564，P〈0．05），PI3K／Akt信号通路可能为Ephrin—A1／EphA1作用的下游信号传导通路；LY294002明显抑制Ephrin—A1／Fc融合蛋白对Huh-7细胞中PI3K／Akt信号通路的激活，p-Akt磷酸化蛋白的含量与对照组比较明显减少（P〈0．05）；Ephrin-A1介导肝癌细胞的运动能力及侵袭能力明显受到抑制（P〈0．05）。结论PI3K／Akt信号通路在Ephrin—A1介导的肝癌细胞侵袭、转移过程中起重要的作用。
- 陈钢王怡周蒙滔施红旗余正平朱椰凡俞富祥单云峰
- 关键词：信号传导
- 重症急性胰腺炎大鼠肺组织Occludin的表达变化被引量：1
- 2012年
- 重症急性胰腺炎（SAP）引发局部和全身性过度炎性反应，导致远隔器官损害及多器官功能障碍是其死亡的主要原因。SAP多器官功能障碍最易累及肺脏，并且是其死亡的重要原因。目前认为多种因素参与其发展过程，可能与微循环、细胞凋亡、炎性介质以及免疫失衡等有关。
- 吴芳陈钢孟庆彬彭晶晶沈文状朱智余正平
- 关键词：重症急性胰腺炎OCCLUDIN大鼠肺组织多器官功能障碍器官损害细胞凋亡
- EphrinA1基因小干扰RNA的构建及其在Huh-7细胞中的沉默效应
- 2009年
- 目的:构建针对EphrinA1基因的发夹状RNA(ShRNA)表达载体pSilencer2.1-EphrinA1-SiRNA,观察其对人肝癌细胞Huh-7中EphrinA1基因表达的特异性抑制效应。方法:设计合成针对EphrinA1 mRNA的RNAi核苷酸片段,并定向克隆到pSilencer2.1-U6载体中,构建重组质粒pSilencer2.1-EphrinA1-SiRNA,同时构建不针对任何序列的重组质粒pSilencer2.1-EphrinA1-ScrRNA,通过脂质体介导转染入Huh-7细胞,应用逆转录聚合酶链反应检测小干扰RNA的沉默效应。结果:酶切鉴定证实pSilencer2.1-EphrinA1-SiRNA和pSilencer2.1-EphrinA1-ScrRNA重组质粒构建成功,转染Huh-7细胞后,pSilencer2.1-EphrinA1-SiRNA组EphrinA1 mRNA表达较pSilencer2.1-EphrinA1-ScrRNA组和空白对照组明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:pSilencer2.1-EphrinA1-SiRNA载体的成功构建为下一步研究以EphrinA1基因为靶位点的肝细胞癌基因治疗奠定了重要的实验基础。
- 王怡陈钢陈必成刘佳明黄陈平
- 关键词：EPHRINA1小干扰RNA
- 肝细胞癌中Lumican的表达及意义被引量：1
- 2011年
- 目的探讨肝细胞癌组织中Lumican蛋白的表达及意义。方法应用免疫组化SP法检测62例肝细胞癌患者癌组织及癌旁正常组织Lumican蛋白的表达并分析其与临床病理因素之间的关系。结果肝细胞癌组织中Lumican阳性表达率为35.48%,癌旁正常组织的阳性表达率66.13%,两者具有统计学差异(P<0.05);Lumican蛋白的表达与Edmondson分级及是否伴有门静脉癌栓相关(P<0.05),与性别、肿瘤大小、HBsAg、肝硬化和AFP无关(P>0.05)。结论 Lumican蛋白在肝细胞癌组织中表达率均较低,可能与肝细胞癌的发生发展有关,检测该蛋白对肝细胞癌的诊断和预后有着重要意义。
- 徐迈宇陈钢陈雷金肖丹陈峰
- 关键词：肝细胞癌LUMICAN免疫组化
- 45例胆囊癌的临床诊治分析被引量：12
- 2011年
- 胆囊癌是胆道系统中常见的一种恶性肿瘤，男女发病率比例大约为1：3，发病年龄大多为50岁以上。由于CT以及MRI等在临床上的广泛运用，明显提高了胆囊癌的早期诊断率，使胆囊癌的诊治也取得了一些进展。但是，胆囊癌仍是一种早期诊断困难、根治切除率低、预后差的恶性疾病，且近年来该病的发病率有逐渐增高的趋势，成为严重威胁人类健康的生命杀手。
- 陈宗静施红旗宋其同陈钢金约朋张启瑜
- 关键词：胆囊肿瘤外科手术
- Glut1和HIF-1α在原发性肝细胞癌中的表达和意义被引量：5
- 2007年
- 目的探讨葡萄糖转运蛋白1（Glut1）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在原发性肝细胞癌中的表达,以及在肝细胞癌发生发展过程中相互关系。方法应用免疫组织化学方法（SP法）,检测108例肝细胞癌及其癌旁组织、15例正常肝组织中Glutl,HIF-1α的表达。结果Glutl和HIF-1α在108例肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为74.1%和78.7%,明显高于其在癌旁组织（χ^2=15.27,χ^2=8.727）和正常肝组织（χ^2=31.78,χ^2=27.19）中的表达率（P〈0.05）。Glutl的表达强度与HCC的分化程度（χ^2=27.80）,Edmondson分级（χ^2=6.260）,有无转移（χ^2=11.54）等显著相关（P〈0.05）。HIF-1α在原发性肝癌中的表达强度与HCC分化程度（χ^2=13.05）和肿瘤大小（χ^2=11.74）相关（P〈0.05）。统计学分析显示Glutl和HIF-1α在HCC中的表达呈正相关（χ^2=18.81）。结论Glutl和HIF-1α的异常高表达在原发性肝细胞癌的发生发展中起重要作用,可能促进肝细胞癌的增殖和侵袭转移。Glutl和HIF-1α的表达强度对肝癌的诊断具有临床应用价值。
- 刘峰易继林李兴睿刘谨文陈钢沈文状
- 关键词：肝细胞单糖转运蛋白质类缺氧诱导因子1Α
- 脆性组氨酸三联体基因蛋白在原发性胆囊癌中的表达及意义被引量：3
- 2005年
- 目的 探讨胆囊癌中脆性组氨酸三联体(FHIT)基因蛋白表达状况及其与临床病理指标的可能关系。方法 采用兔抗人FHIT蛋白抗体和枸橼酸微波SP免疫组化方法检测53 例原发性胆囊癌、18 例胆囊腺瘤性息肉和25 例慢性胆囊炎中FHIT表达状况,并结合临床病理指标进行分析。结果 FHIT基因蛋白在原发性胆囊癌中的阳性表达率为28.3%(15/53),而在胆囊腺瘤性息肉和慢性胆囊炎中的表达分别为55.6%(10/18)和88.0%(22/25),其差异有统计学意义(P<0.05)。胆囊癌组织中FHIT基因蛋白表达与肿瘤分化程度有关,在低分化癌中表达低,与高中分化癌比较有显著性差异(P<0.05);同时研究表明其表达与预后有关(P<0.01)。结论 FHIT基因可能参与了胆囊癌的发生、发展过程,可作为判断原发性胆囊癌分化程度和预后的指标。
- 陈钢易继林蒋进发
- 关键词：原发性胆囊癌
