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候云德: 作品数：23 被引量：29H指数：3; 供职机构：郴州市第一人民医院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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rAAV-2-HBsAg和rAAV-2-GM-CSF共感染增强人外周血单核细胞来源树突状细胞免疫刺激功能: 2004年; 目的　探讨rAAV 2 HBsAg(表达乙肝表面抗原的重组腺相关病毒 )和rAAV 2 GM CSF(表达粒细胞 /巨嗜细胞-集落刺激因子的重组腺相关病毒 )共感染对人外周血单核细胞来源树突状细胞 (DC)免疫刺激功能的影响。方法　用rAAV 2 HBsAg和rAAV 2 GM CSF同时感染新分离的树突状细胞 ;CytoTox 96 Non RadioactiveCtoxicityAssay试剂盒检测细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)反应 ;混合白细胞反应 (MLR)检测DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力 ;流式细胞仪检测DC表面分子CD80、CD83、CD86和HLA DR。结果　rAAV 2 HBsAg和rAAV 2 CM CSF共感染的DC刺激同种异体淋巴细胞增值的能力和激发的自身淋巴细胞的CTL效应增强 ,CD83表达水平提高。结论　内源性表达的GM CSF能促进DC成熟。; 胡贵方俞守义吴小兵尹芳陈清候云德; 关键词：树突状细胞

我国人博卡病毒的发现及相关研究: 刘巧突段招军熊波肖斌梅刘劲松瞿小旺漆正宇何吉娟谭金亮陈亚光候云德; 该研究在湖南郴州市展开，共采集2005年10月至2006年2月间因急性呼吸道感染住院的儿童鼻咽抽吸物标本148例，经核酸扩增博卡病毒HBoVNS1基因，检测到11例博卡病毒感染，阳性率为7.4﹪，略高于国外报道的3.4﹪...; 关键词：; 关键词：人博卡病毒呼吸道

狂犬病毒aG株糖蛋白膜外区基因克隆和序列分析被引量：5: 1995年; 本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术获得了狂犬病毒ａｃ株（ＲＶａＧ）糖蛋白膜外区基因克隆并进行了序列分析。测出其核苷酸序列与其他株相应区序列的同源性在９０．１２％（ＣＶＳ／ａＧ）到９３．０３％（ＳＡＤＢ１９／ａＧ）之间，推导氨基酸序列的同源性在９１．４１％（ＣＶＳ／ａＧ）到９３％，２３％（ＰＶ／ａＧ）之间，经分析发现成熟肽推导氨基酸第１８２位和１８３位的替代，导致了乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）结合序列的构象改变，可能是造成ＲＶａＧ毒力减弱的分子基础。; 明文玉黎孟枫朱家鸿候云德; 关键词：狂犬病毒糖蛋白基因聚合酶链反应基因克隆

人骨形成蛋白1全基因cDNA的克隆与序列分析被引量：4: 1999年; 目的　克隆人骨形成蛋白１（ＯＰ１）全基因ｃＤＮＡ，研究其结构与功能。方法　取新鲜胎盘组织提取总ＲＮＡ，分别以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）、随机引物及特异引物ＲＴ ＰＣＲ。以Ｓａｎｇｅｒ双脱氧链终止法作序列测定。结果　以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）引导的ＲＴ ＰＣＲ仅扩增出ＯＰ１基因３′端５６０ｂｐ片段，以随机引物及特异引物引导的ＲＴ ＰＣＲ扩增出５′端７５０ｂｐ片段，重组连接两片段得到ＯＰ１全基因ｃＤＮＡ；序列测定显示５个核苷酸变异，但编码的氨基酸相同。结论　首次从中国人胎盘组织克隆到ＯＰ１全基因ｃＤＮＡ。与Ｇｅｎ Ｂａｎｋ中的ＯＰ１序列比较，中国人ＯＰ１基因之中存在５个简并密码子。; 刘礼初杜靖远梁国栋付士红陈飞肖宝筠郑启新候云德; 关键词：克隆

锤头状核酶RCP对HBV的P基因体外转录物的作用: 1995年; 本文根据Ｈａｓｅｌｏｆｆ和Ｇｅｒｌａｃｈ发表的锤头状核酶结构，设计合成了针对ＨＢＶａｙｗ株Ｐ基因５＇－端２３６０位点（ＧＵＣ）的核酶ＲＣＰ，其作用底物为ＨＰＶａｙｗＰ基因的翻译起始区（２１４０－２４２２区段），运用基因克隆结合体外转录的方法，评价了ＲＣＰ的切割活性，结果表明，ＲＣＰ在体外成功地切割了长为３４０个核苷酸的靶ＲＮＡ分子，这一工作为我们进一步在细胞内评价ＲＣＰ抑制ＨＢＶ全基因组复制及其基因表达的研究创造了条件。; 甘立霞王平朱锡华董燕麟候云德; 关键词：锤头状核酶基因核糖核酸转录物

中国庚型肝炎病毒NS3区部分基因的克隆与基因特点的分析被引量：3: 1996年; 利用逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ），从我国一输血后丙型肝炎病人血清中克隆到了庚型肝炎病毒ＮＳ３区的部分基因。经序列分析表明：我国庚型肝炎病毒ＮＳ３区与已知的ＧＢＶ－Ｃ及ＨＧＶ的核苷酸同源性在８１．７—８８．０％之间，而氨基酸同源性均大于９６％，氨基酸序列与ＨＣＶ、ＧＢＶ－Ａ、ＢＧＶ－Ｂ具有一定的结构相似性及数个共有的保守位点。; 谭文杰夏宁邵王海林候云德曾定詹美云; 关键词：庚型肝炎病毒 CDNA克隆病毒

脊髓灰质炎病毒与痘苗病毒重组体的构建及表达: 1991年; 含脊髓灰质炎病毒1型(简称 PV1)全基因7.4Kb cDNA 和编码 PV1外壳蛋白 VP12.5Kb 的 cDNA 片段的两株重组痘苗病毒(RV-1和 RV-2)表达了 PV1抗原。经荧光标记的抗 PV1型特异性单克隆抗体检测,感染了 RV-1和 RV-2的 Herp-2细胞呈阳性荧光反应。免疫印迹实验证实两株重组痘苗病毒分别表达 PV1抗原三条和两条特异性蛋白带。免疫家兔后能诱导产生抗 PV1中和抗体。本文对重组病毒表达 PV1抗原的效率进行了初步讨论。; 戴长柏李奇涵袁天喜胡凝珠苏晔郭仁候云德; 关键词：脊髓灰质炎病毒

GM－CSF与IFN－r联合刺激人PBMC产生TNF－α被引量：3: 1994年; ＧＭ－ＣＳＰ本身并不能诱导人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）产生ＴＮＰ－α对ＬＰＳ的刺激作用也不具有协同性，但与ＩＦＮ－ｒ联合刺激ＰＢＭＣ可以产生ＴＮＦ－α，最大效应出现于刺激后１８～２４ｈ，且呈明显的时间和剂量依赖关系，消炎痛和多粘菌素Ｂ对此效应无影响，排除了ＰＧＥ２和ＬＢＳ存在影响的可能性。; 丁传林姚堃周瑶玺张智清候云德; 关键词：GM-CSF PBMC 肿瘤坏死因子

成骨蛋白-1成熟蛋白编码区cDNA克隆与序列分析被引量：1: 1997年; 目的：克隆成骨蛋白－１（ＯＰ－１）成熟蛋白编码区基因。方法：用一步酸酚法从中国健康人胎盘组织中提取总ＲＮＡ，用Ｏｌｉｇｏ（ｄｔ）作引物逆转录合成胎盘ｃＤＮＡ文库，然后利用ＰＣＲ的方法，从ｃＤＮＡ文库中扩增出编码人ＯＰ－１成熟区的基因片段，将所得基因片段插入ｐＧＥＭ－３ｚｆ（＋）载体，转化大肠杆菌后挑选阳性克隆，提取双链ＤＮＡ模板，用ＡＢＩＤＮＡ自动测序仪进行序列测定分析。结果：克隆和测序结果与国外文献报道一致。结论：在国内第一次克隆到ＯＰ－１的成熟蛋白编码区基因。; 陈文付士红徐展梁国栋梁国栋史俊南; 关键词：成骨蛋白-1 基因克隆

我国单纯疱疹病毒Ⅰ型168株糖蛋白D基因的克隆及其在痘苗病毒天坛株中的表达被引量：4: 1996年; 将我国单纯疮疹病毒Ⅰ型１６８株基因组ＤＮＡ中扩增出的糖蛋白Ｄ基因，插入痘苗病毒ｐ７．５启动子下游，使其在痘苗病毒天坛株表达。免疫荧光分析表明，产生的重组病毒糖蛋白Ｄ能被运到被重组病毒感染的１４３细胞表面表达，表达的产物经Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ鉴定为分子量约５０ｋＤ的多肽。Ｓｏｕｔｈｅｍｂｌｏｔ证明重组病毒基因组中整合有ＨＳＶ－１１６８株糖蛋白基因片段，重组病毒免疫家兔后，产生了高滴度的ＨＳＶ特异性中和抗体。; 杨雄虎尚大庄杨新科段淑敏候云德阮力朱既明; 关键词：单纯疱疹病毒糖蛋白D 痘苗病毒基因克隆

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