李国燕
- 作品数：9 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国医学科学院基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 转染反义6A8cDNA对人鼻咽癌细胞肺转移的抑制被引量：2
- 1999年
- 人鼻咽癌高肺转移克隆株CNE 2L2转染编码人α 甘露糖苷酶的cDNA( 6A8cDNA ,GenBank接受号为U3 72 48)的重组反义表达载体 ( pRc/CMV 反义6A8cDNA)后 ,与转染空载质粒pRc/CMV及未作任何转染的细胞相比 ,其生长受一定程度抑制 .接种于无胸腺鼠皮下 2个月 ,野型CNE 2L2细胞组有肺转移的小鼠数为 9/10 ( 90 % ) ,其中Ⅲ级 8只 ,Ⅱ级 1只 ;转染空载质粒pRc/CMV ,有肺转移者为6/8( 75 % ) ,其中Ⅲ级 1只 ,Ⅱ级 2只 ,Ⅰ级 3只 ;转染pRc/CMV 反义 6A8cDNA ,有肺转移者为 3 /10 ( 3 0 % ) ,全部为Ⅰ级 .
- 张立新刘玉琴马凤蓉顾蓓史耕先赵雪梅李波高进赵方萄张淑珍李国燕王讯朱立平
- 关键词：CDNA转染鼻咽癌细胞株肺转移
- 一个新的CD4单克隆抗体的研制
- 1995年
- 用基因工程重组人ＣＤ４分子免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制备了一个分泌抗ＣＤ４ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。该ＭｃＡｂ与ＣＤ４分子有强反应，其亲和力常数Ｋａｆｆ＝６．１２５×１０￣９Ｍ￣（－１）。竞争结合实验表明，它与ＡＴＣＣ克隆ＣＲＬ８００２（ＯＫＴ４）分泌的ＭｃＡｂ分别识别ＣＤ４分子中不同的表位，其腹水滴度较ＡＴＣＣ（ＯＫＴ４）ＭｃＡｂ腹水高约１０倍。
- 朱立平关复华莫畏张淑珍崔莲仙石伟王李国燕陈家华李斯琼
- 关键词：CD4分子单克隆抗体
- 从人活化B细胞株3D5细胞λgtll cDNA文库筛选到的1529bp cDNA的核苷酸序列分析
- 1996年
- 对用单抗５Ｃ５和单抗５Ｃ５－Ｇ１的混合物从３Ｄ５细胞λｇｔｌｌｃＤＮＡ文库筛选到的７个阳性ｃＤＮＡ克隆中的１个（３Ｄ５－５）进行了核苷酸序列分析。由于３Ｄ５－５ｃＤＮＡ长１．６ｋｂ左右，不能直接测序，故先依测序用质粒ｐＢＳｃｒｉｐｔ－ＫＳ多克隆位点中的内切酶点行单酶切，经电泳分析画出测序用的物理图谱，再用相应内切酶行单酶酶切。藉低熔点琼脂糖回收各个片段。带质粒ｐＢＳｃｒｉｐｔ－Ｋ５的大片段经直接自身环化，小片段与质粒载体ｐＢＳｃｒｉｐｔ－ＫＳ重组，构建测序用的亚克隆。用双链双脱氧末端终止法测各亚克隆的核苷酸序列，再拚接出全长为１５２９ｂｐ的３Ｄ５－５ｃＤＮＡ全长序列。与国际基因库资料比较，未见有相同的序列。此ｃＤＮＡ中有一个长４６５ｂｐ（从５４０ｂｐ－１００４ｂｐ）的ＯＲＦ，编码１５４个氨基酸的蛋白质。此蛋白质中有二个疏水区（第１～３４位氨基酸及第７９～１０９位氨基酸），提示它可能属Ⅰ类穿膜蛋白。
- 石伟朱立平崔莲仙张立新张淑珍王汛李国燕
- 关键词：CDNADNAB细胞
- 用单抗5C5和5C5-G1筛选的613bp cDNA的核苷酸序列分析被引量：2
- 1996年
- 用识别人活化B细胞分化抗原５Ｃ５的单克隆抗体５Ｃ５和５Ｃ５－Ｇ１的混合物从人扁桃体细胞λｇｔ１１ｃＤＮＡ文库筛选到３个阳性克隆。其ｃＤＮＡ插入到质粒ｐＵＣ１８，经双链双脱氧测序法作核苷酸序列分析，知其中一个ｃＤＮＡ长６１３ｂｐ，另二个长４６７ｂｐ，后者与前者的前４６７ｂｐ完全重叠。６１３ｂｐｃＤＮＡ中有一个开放阅读框架，从１０３ｂｐ到４２９ｂｐ，共３２７ｂｐ。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析显示，此６１３ｂｐ ｃＤＮＡ与人扁桃体细胞和３Ｄ５细胞的ＲＮＡ在２．０ｋｂ左右有杂交带。与国际上有关基因库的资料比较，未发现有任何同源核苷酸序列。由于这是一个新的ｃＤＮＡ序列，ＧｅｎＢａｎｋ已接受（接受号为Ｕ２５０４１）。从此ｃＤＮＡ的读框推断的蛋白质中第２０－３０氨基酸为明显的疏水区，故这个蛋白有典型的膜蛋白结构。
- 石伟朱立平崔莲仙张淑珍王汛李国燕
- 关键词：分化抗原CDNA核苷酸序列
- 分化抗原6A8在B淋巴细胞膜和胞浆中的表达
- 1998年
- 采用间接免疫荧光染色、流式细胞仪、激光扫描共聚焦显微镜、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析研究分化抗原６Ａ８在人淋巴细胞的表达。流式细胞仪分析显示，单抗６Ａ８与所检测的Ｂ细胞株３Ｄ５、ＣＥＳＳ和Ｄａｕｄｉ有反应，与人组织细胞瘤细胞株Ｕ９３７也有反应，与慢性髓性白血病细胞株Ｋ５６２及所检测的Ｔ细胞株Ｊｕｒｋａｔ和Ｐｅｅｒ不反应。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测支持上述现象，３Ｄ５和Ｕ９３７细胞ｍＲＮＡ转录较丰富，ＣＥＳＳ细胞次之，而Ｊｕｒｋａｔ与Ｐｅｅｒ细胞的ｍＲＮＡ转录很少。激光扫描共聚焦显微镜观察显示，单抗６Ａ８识别的分化抗原见于３Ｄ５细胞浆和胞膜。可见在人Ｂ细胞株３Ｄ５，分化抗原６Ａ８不仅表达于胞膜，也表达于胞浆。
- 张立新朱立平朱立平马凤蓉石伟张淑珍石伟李国燕张淑珍
- 关键词：分化抗原B细胞单克隆抗体
- 单抗5C5-G1识别的分化抗原表达于活化B细胞胞膜被引量：4
- 1998年
- 目的鉴于５Ｃ５ｃＤＮＡ（６１３ｂｐ）的２～４５０ｂｐ与ＨＳＭＲＰ１７ｍＲＮＡ（１００８ｂｐ）的５６０～１００８ｂｐ的同源性高达９５％，且后者编码的蛋白质（ＭＲＰＬ１２）也在细胞活化后表达，本研究旨在探究两者是否属同一物。方法多个人Ｂ细胞株用单抗５Ｃ５－Ｇ１作间接免疫荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜观察。结果５Ｃ５－Ｇ１单抗识别分子表达于膜下近膜胞浆处、也可能在膜表面，但非单纯在膜上，而ＭＥＰＬ１２只表达于线粒体。另外，前Ｂ细胞Ｎａｌｍ－６与单抗５Ｃ５－Ｇ１反应阴性，活化前期Ｂ细胞Ｄａｕｄｉ和３Ｄ５的反应强阳性，分化晚期Ｂ细胞ＳＫＷ６为弱阳性。结论５Ｃ５ｃＤＮＡ与ＨＳＭＲＰ１７ｍＲＮＡ不属同一基因；
- 马凤蓉朱立平朱立平张立新张淑珍王汛张淑珍赵方萄王汛
- 关键词：B细胞胞膜显微镜检
- 一个与编码大鼠ERα-甘露糖苷酶同源的人cDNA分子克隆被引量：12
- 1997年
- 用抗人Ｂ细胞和Ｔ细胞共同分化抗原６Ａ８单克隆抗体从人扁桃体细胞λｇｔ１１ｃＤＮＡ文库克隆到１个长１３５８ｂｐ的ｃＤＮＡ。此ｃＤＮＡ内有一个长１２７８ｂｐ（２６～１３０３ｂｐ）的开放阅读框架，编码４２５个氨基酸的蛋白质。此蛋白质氨基酸序列中第１５７位到２２３位为疏水跨膜区。蛋白质的氨基酸序列与大鼠ＥＲα－甘露糖苷酶（１０４０个氨基酸）的６３２～１０３８位氨基酸序列间的相同性和相似性高达８２．０４５％和８８％。它与酵母Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｖｉｓｉａｅα－甘露糖苷酶（１０８３个氨基酸）的６５９～１０８３位氨基酸序列间的相同性和相似性也有３２．５％和５１．７５％。前者１６３～２７７位间与后者８３２～９４６位间１１５个氨基酸序列间的相同性和相似性达到５７％和７４％。由于６Ａ８ｃＤＮＡ核苷酸顺序未见于国外基因库资料，故已为ＮＩＨＧｅｎＢａｎｋ接受登记，接受号为Ｕ３７２４８。
- 张立新朱立平朱立平石伟祝庆麟马凤蓉王汛李国燕
- 关键词：分化抗原甘露糖苷酶CDNA分子克隆
- 编码与大鼠ERα-甘露糖苷酶同源的人6A8cDNA在真核细胞的表达被引量：7
- 1998年
- 目的观察６Ａ８ｃＤＮＡ（１３５８ｂｐ）在真核细胞的表达。方法Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ，构建６Ａ８ｃＤＮＡ表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ，转染ＣＯＳ－７细胞，及基因免疫小鼠。结果６Ａ８ｃＤＮＡ有４．３ｋｂ和３．５ｋｂ两种ｍＲＮＡ转录形式。４．３ｋｂｍＲＮＡ以外周血白细胞最丰富，其次为淋巴结、脾脏和骨髓，胸腺组织表达较少，胎肝则缺如。３．５ｋｂ者也以外周血白细胞最丰富，其次为肝脏、淋巴结和骨髓，胸腺和脾脏表达量最少。ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ在ＣＯＳ－７细胞表达了分子量４５０００左右的蛋白质，与单抗６Ａ８有反应。ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ基因免疫小鼠，６／１０只小鼠血清与人活化Ｂ细胞株３Ｄ５细胞膜有反应，５／５只对照小鼠血清呈阴性反应。结论６Ａ８ｃＤＮＡ（１３５８ｂｐ）在真核细胞获得表达，但此ｃＤＮＡ非为全长。
- 张立新马凤蓉朱立平李波石伟张淑珍李国燕王汛赵方萄
- 关键词：RNA信使甘露糖苷酶真核细胞
- 编码人分化抗原5D4的全长cDNA克隆及其编码蛋白质的二级结构分析被引量：2
- 1999年
- 用 3D5细胞染色强阳性 ,而Daudi与Jurkat细胞染色弱阳性的单克隆抗体5D4,从一个人扁桃体细胞λgt1 1cDNA文库 (ATCCNo .375 46 )筛选到一个长 1 846bp的cDNA克隆 .RT_PCR显示 3D5细胞、Daudi细胞和Jurkat细胞 5D4mRNA均阳性 ,但 3D5细胞明显强于后两者 . 5D4cDNA中 88～ 1 2 0 9bp为一个开放阅读框架 ,编码374个氨基酸的蛋白质 .Northernblot分析结果和起始密码子前 5′端非编码区有 2个连续的终止密码子表明 ,这是一个全长cDNA .从其开放阅读框架推断的蛋白质的氨基酸序列中 2 95～ 334aa为一强疏水区 ,预测 31 3～ 334aa为一分值极高的跨膜螺旋区 ,其方向最可能是由膜内到膜外 .
- 马凤蓉朱立平汪燚赵方萄史耕先李波李国燕张淑珍王讯刘音
- 关键词：CDNA分化抗原编码蛋白质单克隆抗体
