刘雪婷
- 作品数：21 被引量：36H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种宠物干扰素便携式冷藏盒
- 本实用新型公开一种宠物干扰素便携式冷藏盒，包括盖板和盒体，所述盖板与所述盒体铰接，所述盒体内固定安装有制冷片，所述制冷片将所述盒体分为储物区和制冷区，所述储物区位于所述制冷区上方，所述储物区包括第一放置区、第二放置区和第...
- 贾红鑫婷袁维峰侯绍华蒋亚君郭晓宇姜一曈刘雪婷王洋崔帅
- 文献传递
- 一种分枝杆菌多重检测试剂盒
- 本实用新型公开一种分枝杆菌多重检测试剂盒，包括盒体，盒体的顶口处铰接有盒盖，盒体内设有隔板，盒体的侧壁上开设有开口，开口内安装有储物抽屉，储物抽屉位于隔板的底部，隔板的顶部设有试管架，试管架上周向安装有若干个试管，试管架...
- 鑫婷贾红郭晓宇袁维峰侯绍华蒋亚君崔帅王洋刘雪婷陈世钰于海男
- 文献传递
- 东北虎心脏cDNA文库构建及生物学特性分析
- 东北虎（Panthera tigris altaica）分布于亚洲东北部，是现存体积最大的猫科动物亚种，全世界最濒危物种之一。长期以来，由于受到生存环境的破坏，栖息地的丧失，人类偷猎盗猎等行为的影响，致使野生东北虎处于濒...
- 刘雪婷
- 关键词：东北虎心脏组织遗传资源
- 一种牛呼吸道疾病多重检测试剂盒
- 本实用新型公开一种牛呼吸道疾病多重检测试剂盒，由下至上依次设置有底层、中间层和盖体，所述中间层为若干个，所述底层和中间层可拆卸连接，相邻所述中间层间可拆卸连接，所述盖体盖合在顶部的所述中间层上；本实用新型公开的牛呼吸道疾...
- 鑫婷贾红郭晓宇侯绍华袁维峰蒋亚君崔帅姜一曈刘雪婷陈世钰
- 文献传递
- 抗犬瘟热病毒VHH抗体噬菌体库的构建与筛选被引量：5
- 2020年
- 为构建特异性犬瘟热病毒(CDV)的纳米抗体库,获得抗CDV的VHH抗体,本试验利用CDV免疫羊驼,四免后采集外周血淋巴细胞,提取总RNA反转录为cDNA,利用巢式PCR扩增纳米抗体序列。将目的片段连接至pComb3x噬菌体展示载体,并电转至TG1宿主菌,挑取40个克隆进行菌液PCR验证,随机挑选13个阳性单克隆进行测序,计算抗体库库容量,加入辅助噬菌粒拯救获得的噬菌体展示抗体库。经过3轮淘选,富集对CDV结合力高的噬菌体。利用毕赤酵母系统表达两株结合力高的噬菌体,经Ni柱纯化后,利用ELISA进行噬菌体结合力的鉴定。结果表明,四免后羊驼血清效价达1∶25000,达到建库要求,构建的噬菌体展示文库库容量达3.41×109 PFU。经过3轮淘选,特异性抗体库经稀释100倍后,ELISA检测仍为阳性,表明特异性结合CDV的噬菌体得到明显的富集。ELISA结果表明,两株纯化的纳米抗体与CDV的反应性显著高于对照组。以上结果提示,本研究成功筛选出2株特异性结合CDV的VHH抗体,为VHH抗体在犬瘟热的诊断和治疗方面的应用奠定了基础。
- 王召阳蒋亚君刘雪婷林伟东鑫婷侯绍华郭晓宇朱鸿飞贾红
- 关键词：真核表达
- 表皮干细胞的生物学特性及其潜在应用被引量：4
- 2016年
- 表皮是维持生命及保障各个组织器官发挥功能的重要屏障,而表皮干细胞能够分化为皮肤各层组织,从而使表皮始终处于持续不断的增殖、分化、凋亡的状态,在维持表皮平衡,表皮损伤后修复的过程中发挥重要的作用。随着细胞生物学的飞速的发展,人们越发认识到表皮干细胞的重要性,使其成为人们目前的研究热点之一。针对表皮干细胞研究进展,着重叙述了表皮干细胞的分类、定位、特征、功能以及应用前景,旨为相关研究者对表皮干细胞生物学特性及应用有更全面的认识。
- 刘雪婷白春雨关伟军马月辉
- 关键词：表皮干细胞
- 一种羊包虫病抗体检测新型试剂盒
- 本实用新型公开一种羊包虫病抗体检测新型试剂盒，包括盒体，所述盒体铰接有盒盖，所述盒体内中部固定有隔板，所述隔板将所述盒体隔离为试管盒和储物盒，所述试管盒内放置有试管架，所述试管架包括底座，所述底座内嵌设有若干气缸组，若干...
- 贾红鑫婷侯绍华郭晓宇袁维峰蒋亚君崔帅姜一曈刘雪婷陈世钰于海男
- 文献传递
- 非洲猪瘟病毒A104R蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2022年
- 为制备非洲猪瘟病毒(ASFV)重组蛋白A104R(rA104R)及研制抗rA104R的多克隆抗体,本研究通过ExPASy等在线生物信息学软件初步预测该蛋白的理化性质、信号肽、核定位信号等信息,继而合成ASFV的A104R基因,构建基于pET-28a(+)载体的原核表达系统。重组蛋白用Ni亲和层析纯化后,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blotting和液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术鉴定。纯化的蛋白免疫6~8周龄BALB/c小鼠,制备抗rA104R的多克隆抗体,通过Western blotting和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定其反应性和免疫原性。结果显示,原核表达载体构建成功;重组菌在37℃诱导8 h后表达量最高,在包涵体和上清中均有表达,表明其呈部分可溶性表达;纯化的重组蛋白大小约16 kDa,且反应性良好;LC-MS分析结果显示,该rA104R蛋白多个肽段均与目标蛋白的氨基酸序列相匹配,匹配率为59%;制备的鼠源抗rA104R多克隆抗体效价大于1∶2048000,具有良好的免疫原性。结果表明,本研究制备的rA104R及其多克隆抗体可进一步用于生物学功能研究,并可为疫苗及相关诊断试剂研制提供基础材料。
- 蒋亚君王召阳崔帅王洋鑫婷郭晓宇刘雪婷陈世钰房立春朱鸿飞贾红
- 关键词：非洲猪瘟病毒原核表达液相色谱-质谱
- 非洲猪瘟病毒K205R蛋白重组腺病毒载体的构建及小鼠免疫效力评价
- 2023年
- 为了研制安全有效的非洲猪瘟(ASF)疫苗,本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV) Georgia 2007/1株基因组序列合成ASFV K205R基因,通过同源重组技术构建重组腺病毒Ad5-ASFV-K205R,使用Western blot检测K205R非结构蛋白的表达情况,PCR检测其遗传稳定性,腺病毒滴度检测试剂盒测定其滴度。使用重组腺病毒免疫BALB/c小鼠,通过ELISA测定血清K205R特异性抗体,采用多因子检测试剂盒测定血清中IFN-γ和IL-4细胞因子含量,采用CCK8法检测淋巴细胞的增殖情况。结果显示,成功包装出重组腺病毒Ad5-ASFV-K205R,能够正确表达K205R融合蛋白;接种293T细胞并连续传代20代,均可稳定遗传,病毒滴度可达9.5×1010PFU/mL;ELISA结果显示,小鼠一免后7~21 d可检测到K205R特异性抗体,并在二免后14 d内产生更高的抗体水平;K205R蛋白能显著刺激免疫小鼠脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-4,同时也能显著刺激脾脏淋巴细胞增殖(P<0.05)。结果表明,Ad5-ASFV-K205R重组腺病毒免疫小鼠能诱导机体的体液免疫应答和细胞免疫应答,具有很好的应用潜能,为进一步研发ASF疫苗提供基础。
- 何宇恒刘雪婷庞忠宝翟文竹黄颖蒋思文吉日木图贾红李焕荣
- 关键词：非洲猪瘟重组腺病毒免疫效力
- 针对非洲猪瘟病毒p30基因CRISPR/Cas9基因编辑系统的构建和初步鉴定
- 2023年
- 构建针对非洲猪瘟病毒(ASFV)p30(CP204L)基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统,探究该系统对p30蛋白真核表达的影响。以含p30基因序列的质粒p30-IRES为模板,定向扩增目的基因片段并克隆至pmCherry-N1载体,构建含有p30、红色荧光报告基因的融合表达质粒;通过网站http://crispr.mit.edu/设计靶向CP204L的单导向RNA(sgRNA),并克隆至Cas9表达质粒eSpCas9-2A-GFP(PX458)中。将融合表达质粒与Cas9表达质粒共转染HEK 293T细胞,同时设置对照组,转染48 h后通过Western blot和荧光定量PCR(qPCR)方法分别检测转染细胞中p30蛋白和mRNA表达水平。由于CRISPR/Cas9基因编辑系统靶向切割p30基因,Western blot和qPCR结果显示转染靶向p30基因的Cas9质粒后,p30蛋白的真核表达受到抑制,具有显著性差异(P<0.05)。结果表明,CRISPR/Cas9基因编辑系统可以高效切割非洲猪瘟p30基因,抑制该蛋白的真核表达水平,该体系为抑制病毒生长和疫情防控提供了新的研究思路。
- 于海男崔帅王洋刘雪婷高新桃房立春郭晓宇朱鸿飞
- 关键词：非洲猪瘟病毒P30基因真核表达
