黄俊明
- 作品数：3 被引量：45H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 溶血磷脂酸通过RhoA-YAP通路调控脂肪干细胞增殖的研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)调控脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)增殖的作用及其分子机制。方法分离SD大鼠ASCs,利用LPA对其进行干预,干预时间为1 h,采用Western Blot检测YES相关蛋白(yes associated protein,YAP)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达水平。利用免疫荧光检测YAP亚细胞定位,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测CTGF和Ankrd1的m RNA表达水平。慢病毒转染ASCs,Western Blot检测不同分组YAP蛋白表达。进一步利用流式细胞术和CCK-8法检测不同分组中ASCs增殖情况。最后采用Rho A抑制剂C3干预,免疫荧光检测不同分组中YAP亚细胞定位,Western Blot检测YAP、CTGF和GTP-Rho A的表达情况。结果 LPA能显著促进YAP的表达和在细胞核内的聚集,同时LPA也能够促进YAP靶基因CTGF在蛋白水平的表达。LPA能上调YAP靶基因CTGF和锚蛋白重复域1(ankyrin repeating domain 1,Ankrd1)的m RNA表达水平。慢病毒转染敲除YAP表达后,LPA对YAP的上调作用被明显抑制。细胞周期流式细胞术和CCK-8检测结果显示LPA可显著促进ASCs的增殖,但在sh YAP慢病毒转染特异性敲除YAP后,LPA对ASCs的促增殖能力被明显削弱。Rho A抑制剂C3处理后,LPA对YAP细胞核聚集的促进作用被削弱,同时LPA对YAP、CTGF和GTP-Rho A表达的促进作用也得到了明显抑制。结论 LPA能够通过Rho A-YAP通路调控ASCs的增殖。
- 叶亚平李觅吴颖星黄俊明印卫锋郭风劲
- 关键词：溶血磷脂酸脂肪干细胞细胞增殖
- 淫羊藿苷促进骨髓间充质干细胞成骨分化被引量：39
- 2016年
- 背景:传统中药淫羊藿应用于各类骨科疾病有着悠久的历史,其主要成分之一淫羊藿苷有多种生物学效应。目的:探讨淫羊藿苷在体内及体外对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及机制。方法:在体外存在或不存在成骨诱导培养的条件下,用淫羊藿苷作用于骨髓间充质干细胞,通过RT-PCR检测runx2、ocn和osx基因的表达情况,以及通过茜素红染色检测成骨细胞分泌的钙结节数量。用淫羊藿苷喂养大鼠(2 mg/d)5周后,进行Micro CT扫描并分析胫骨上段骨结构。结果与结论:(1)无论是否存在成骨诱导培养条件,淫羊藿苷均能促进成骨分化相关基因的表达;(2)在成骨诱导培养时,淫羊藿苷能明显增加钙结节沉积;(3)动物实验表明淫羊藿苷能显著促进骨小梁的生成。
- 鲍远黄俊明靖兴志李兴艳董永辉张津铭郭风劲陈安民
- 关键词：淫羊藿属骨细胞淫羊藿苷骨髓间充质干细胞成骨分化
- Yes相关蛋白通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞Sox9表达的研究被引量：4
- 2016年
- 目的研究Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞Sox9表达的机制。方法用si RNA分别沉默YAP基因和Lats1基因来调控YAP的活性,通过Realtime PCR检测软骨特异性基因和Wnt/β-catenin信号通路下游基因的表达;通过Western Blot检测GSK3β的磷酸化水平、活化β-catenin的蛋白水平以及Sox9的蛋白水平;并通过阿利新蓝染色检测软骨细胞外基质的分泌情况。用si RNA沉默YAP基因后,再用氯化锂干预细胞,通过Western Blot检测Sox9的表达和GSK3β的磷酸化水平。结果沉默YAP基因后,磷酸化GSK3β和活化β-catenin的蛋白水平减少,c-Myc和Nanog基因表达减少,Sox9、Col2和Aggrecan基因表达升高,并且软骨细胞分泌基质增多;沉默Lats1基因后,磷酸化GSK3β和活化β-catenin的蛋白水平增加,c-Myc和Nanog基因表达上调,Sox9、Col2和Aggrecan基因表达减少,并且软骨细胞分泌基质减少。此外,氯化锂可以阻断沉默YAP引起的Sox9表达上调。结论 YAP通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞Sox9的表达。
- 鲍远黄俊明吴颖星陈琨程鹏郭风劲陈安民
- 关键词：软骨细胞信号传导基因表达调控
