吴颖星
- 作品数：11 被引量：23H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- NF-κBshRNA转染骨髓间充质干细胞对炎症因子的影响被引量：1
- 2014年
- 目的鉴定NF-κB/p65-shRNA质粒并转染入骨髓间充质干细胞,检测靶细胞在NF-κB通路激活时磷酸化NF-κB/p65的表达。方法用双酶电泳鉴定所得质粒。使用HP试剂将NF-κB/p65-shRNA质粒转染至小鼠BMSCs,在荧光显微镜下观察绿色荧光,并且以流式细胞术检测转染效率,最后以Western Blot检测转染后靶细胞在炎症环境下对磷酸化NF-κB/p65表达的抑制情况。结果 NF-κB/p65-shRNA质粒酶切鉴定结果与预期一致;流式细胞术检测转染效率达到52.76%;Western Blot检测在炎症环境刺激下,转染后靶细胞磷酸化NF-κB/p65表达明显降低。结论成功将NF-κB/p65-shRNA质粒转染至BMSCs中并有效表达,为进一步实验通过BMSCs修复和重建骨关节炎患者的软骨组织奠定基础。
- 吴颖星杨卿杨开祥叶亚平向威郭风劲
- 关键词：NF-ΚB间质干细胞骨关节炎
- 溶血磷脂酸通过RhoA-YAP通路调控脂肪干细胞增殖的研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)调控脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)增殖的作用及其分子机制。方法分离SD大鼠ASCs,利用LPA对其进行干预,干预时间为1 h,采用Western Blot检测YES相关蛋白(yes associated protein,YAP)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达水平。利用免疫荧光检测YAP亚细胞定位,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测CTGF和Ankrd1的m RNA表达水平。慢病毒转染ASCs,Western Blot检测不同分组YAP蛋白表达。进一步利用流式细胞术和CCK-8法检测不同分组中ASCs增殖情况。最后采用Rho A抑制剂C3干预,免疫荧光检测不同分组中YAP亚细胞定位,Western Blot检测YAP、CTGF和GTP-Rho A的表达情况。结果 LPA能显著促进YAP的表达和在细胞核内的聚集,同时LPA也能够促进YAP靶基因CTGF在蛋白水平的表达。LPA能上调YAP靶基因CTGF和锚蛋白重复域1(ankyrin repeating domain 1,Ankrd1)的m RNA表达水平。慢病毒转染敲除YAP表达后,LPA对YAP的上调作用被明显抑制。细胞周期流式细胞术和CCK-8检测结果显示LPA可显著促进ASCs的增殖,但在sh YAP慢病毒转染特异性敲除YAP后,LPA对ASCs的促增殖能力被明显削弱。Rho A抑制剂C3处理后,LPA对YAP细胞核聚集的促进作用被削弱,同时LPA对YAP、CTGF和GTP-Rho A表达的促进作用也得到了明显抑制。结论 LPA能够通过Rho A-YAP通路调控ASCs的增殖。
- 叶亚平李觅吴颖星黄俊明印卫锋郭风劲
- 关键词：溶血磷脂酸脂肪干细胞细胞增殖
- 周期性单轴牵张应力对大鼠前软骨干细胞相关增殖基因的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察周期性单轴牵张应力对大鼠前软骨干细胞增殖相关基因的影响。方法采用四点弯曲应力仪分别以2 000μstrain和4 000μstrain的牵张力刺激前软骨干细胞1 h,并设空白对照组,荧光定量PCR检测相关增殖基因PCNA和Cyclin D1的表达情况,并用免疫荧光检测力学激前后Ki67阳性细胞的表达情况。结果 2 000μstrain刺激组细胞表达PCNA以及CyclinD1较对照组高(P<0.05),免疫荧光检测提示2 000μstrain刺激组的细胞核内Ki67表达较对照组明显增多;而4 000μstrain刺激组细胞PCNA的表达与对照组相比明显降低(P<0.05),而Cyclin D1降低不明显(P>0.05)。结论适宜的周期性单轴牵张力能引起大鼠前软骨干细胞相关增殖基因的表达增加。
- 杨开祥吴颖星宋明宇程鹏郭风劲
- 关键词：软骨细胞干细胞
- Yes相关蛋白通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞Sox9表达的研究被引量：3
- 2016年
- 目的研究Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞Sox9表达的机制。方法用si RNA分别沉默YAP基因和Lats1基因来调控YAP的活性,通过Realtime PCR检测软骨特异性基因和Wnt/β-catenin信号通路下游基因的表达;通过Western Blot检测GSK3β的磷酸化水平、活化β-catenin的蛋白水平以及Sox9的蛋白水平;并通过阿利新蓝染色检测软骨细胞外基质的分泌情况。用si RNA沉默YAP基因后,再用氯化锂干预细胞,通过Western Blot检测Sox9的表达和GSK3β的磷酸化水平。结果沉默YAP基因后,磷酸化GSK3β和活化β-catenin的蛋白水平减少,c-Myc和Nanog基因表达减少,Sox9、Col2和Aggrecan基因表达升高,并且软骨细胞分泌基质增多;沉默Lats1基因后,磷酸化GSK3β和活化β-catenin的蛋白水平增加,c-Myc和Nanog基因表达上调,Sox9、Col2和Aggrecan基因表达减少,并且软骨细胞分泌基质减少。此外,氯化锂可以阻断沉默YAP引起的Sox9表达上调。结论 YAP通过Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞Sox9的表达。
- 鲍远黄俊明吴颖星陈琨程鹏郭风劲陈安民
- 关键词：软骨细胞信号传导基因表达调控
- 艾拉莫德通过抑制破骨细胞与脂肪细胞分化缓解卵巢切除所致骨质流失
- 实验目的： 1.观察口服艾拉莫德后卵巢切除模型小鼠骨质及其他组织的变化。 2.建立体外破骨细胞分化模型与脂肪细胞分化模型，探索艾拉莫德对破骨细胞形成及脂肪细胞形成的影响及其机制。 实验方法： 1.建立卵巢切除动物...
- 吴颖星
- 关键词：卵巢切除艾拉莫德破骨细胞脂肪细胞
- 机械应力对前软骨干细胞增殖和炎症应答的影响及机制研究
- 目的： 研究机械应力对前软骨干细胞在正常环境中的增殖及炎性环境中代谢的改变，初步探讨其作用机制。 方法： 1.以显微外科机械分离与胶原酶消化相结合的方法分离乳鼠（大鼠）胫腓骨及股骨干骺端骺板软骨细胞;免疫磁珠分选前...
- 吴颖星
- 关键词：前软骨干细胞增殖机制炎症应答
- 文献传递
- 周期性单轴牵张力对前软骨干细胞增殖影响的实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察周期性单轴牵张力对前软骨干细胞增殖能力的影响。方法免疫磁珠分选新生大鼠前软骨干细胞(precartilaginous stem cells,PSCs),取生长良好的第三代PSCs,通过四点弯曲细胞加压装置对细胞加载不同的机械牵张力(2 000、4 000μstrain),并在不同时间点(1、2、4和8 h)收集细胞,采用流式细胞仪检测应力刺激后PSCs的细胞周期及增殖指数的变化,揭示不同的牵张力在不同的时间点对PSCs增殖活性的影响。结果周期性单轴牵张力能影响大鼠PSCs的增殖活性。2 000μstrain机械牵张力组与对照组相比,增殖指数升高(P<0.05),促进细胞增殖,并且S期DNA合成率增多(P<0.05);而4 000μstrain机械牵张力组与对照组比较,增殖指数降低,抑制细胞增殖(P<0.05),同时S期细胞DNA合成率减少(P<0.05)。结论适宜的机械牵张力能促进PSCs增殖,过大的机械牵张力反而抑制细胞增殖。
- 杨开祥吴颖星杜宇刘芳娜郭风劲
- 关键词：软骨细胞干细胞
- Hedgehog信号通路抑制剂HPI-4对软骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力的影响被引量：3
- 2014年
- 目的检测Hedgehog(HH)信号通路在人软骨肉瘤中的表达情况,探讨HH信号通路抑制剂HPI-4对于软骨肉瘤细胞SW1353增殖和侵袭能力的影响。方法应用免疫组化技术检测人软骨肉瘤标本中HH信号通路相关蛋白Ihh及增殖相关蛋白Ki67的表达情况,应用CCK-8实验、平板集落形成实验、Transwell肿瘤细胞侵袭实验及免疫印迹法(Western blot)检测HPI-4阻断HH信号通路后SW1353细胞增殖和侵袭能力的变化。结果免疫组化结果证实Ihh蛋白及Ki67蛋白在人软骨肉瘤中存在明显表达。经不同浓度HPI-4干预后,CCK-8实验显示软骨肉瘤细胞SW1353的增殖活性随HPI-4浓度的增高而逐渐降低;平板集落形成实验显示单个肿瘤细胞不断克隆形成集落的能力受到抑制;Transwell实验证实肿瘤细胞侵袭能力随着HPI-4浓度的增高而递减;Western blot结果显示肿瘤细胞内增殖与侵袭相关蛋白的表达明显下降。结论人软骨肉瘤中存在HH信号通路的明显激活,HH信号通路抑制剂HPI-4能够明显抑制软骨肉瘤细胞的增殖和侵袭能力。
- 向威郭风劲蒋婷宫晨杨开祥吴颖星许凯
- 关键词：软骨肉瘤肿瘤浸润细胞增殖
- 去分化重编排脂肪干细胞在张应力刺激下成骨分化的研究
- 2013年
- 目的探讨去分化重编排脂肪干细胞在张应力刺激下的成骨分化并探讨其分子机制。方法分离人脂肪干细胞（hASCs），取第3代hASCs进行去分化重编排并标记为去分化重编排脂肪干细胞（De—hASCs）。张应力刺激条件下，将De．hASCs和hASCs在成骨诱导液中培养1周。并于培养4d和7d后检测碱性磷酸酶（ALP）活性，Runx2的mRNA和蛋白表达水平，骨形态发生蛋白（BMP）-2和基质金属蛋白酶（MMP）-3的mRNA表达水平。结果张应力刺激4d后，De—hASCs组的ALP活性高于hASCs组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。张应力刺激7d后，De—hASCs组ALP活性高于hASCs组，且差异有统计学意义（P〈0．05）。张应力刺激4d和7d后，De—hASCs组Runx2的mRNA和蛋白表达水平均明显高于hASCs组，且差异有统计学意义（P〈0．05）。张应力刺激4d和7d后，De—hASCs组BMP-2和MMP-3的mRNA表达水平均明显高于hASCs组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论张应力刺激条件下，去分化重编排脂肪干细胞具有更强的成骨分化能力，且与其上调BMP-2和MMP-3基因表达相关。
- 叶亚平胡伟华杜宇吴颖星杨开祥郭风劲
- 关键词：成骨分化脂肪干细胞
- CBE教学法联合多学科协作的教学模式在鼻咽癌临床教学中的应用被引量：6
- 2020年
- 目的探讨以能力为基础的教育(CBE)联合多学科协作(MDT)的教学模式在鼻咽癌临床教学中的应用效果。方法将48名接受住院医师规范化培训的学员随机分为对照组和研究组,各24名。对照组采用传统教学法,研究组采用CBE联合MDT教学方法进行教学。教学结束后,比较两组学员的考试成绩、对教学的满意度和对教学效果的评价结果。结果研究组学员的理论考试、阅片考试、技能考试和总成绩均高于对照组,教学满意度和教学效果评价均优于对照组(均P<0.05)。结论CBE联合MDT的教学模式应用于鼻咽癌临床教学中,可提高教学效果和学员的教学满意度。
- 张菁宫晨李定宇李建军吴颖星杨曦陈歆
- 关键词：鼻咽癌临床教学
